安徽省休寧縣一起人感H7N9流感后家禽流行病調查及分析

（休寧縣動物疫病預防與控制中心，安徽休寧 245400）

禽流感病毒屬于正黏病毒科流感病毒屬，是一種氣球樣有包膜的單股負鏈RNA病毒，可分為16個H亞型和9個N亞型，H7N9流感病毒感染家禽后，無明顯臨床癥狀，此次休寧縣發生的人感H7N9流感病例，縣畜牧獸醫部門聯合衛生計生部門開展了流行病學調查，經實驗室診斷，隨后采取撲殺措施，把出現第二例人感病例的風險降到最低。通過分析這起人感H7N9流感病例，對重大動物疫病防控，特別是H7N9流感防控具有意義。

1 流調及采樣

2017年1月14日 晚20點，縣衛計委通報，縣人民醫院有一名初步診斷為H7N9流感的患者，據患者反映近期有活禽接觸史。15日上午6點，縣動物疫病預防與控制中心分4組赴養殖戶及活禽批發市場開展流行病學調查和采樣。

1.1 流調

1.1.1 基本情況

患者所在村民組共47戶，148人，存欄散養家禽1018羽。患者于2016年12月28日和2017年1月4日，分兩次從外村雞販子處，購買10只黃羽肉雞，本村民組還有其他3戶村民同批購買了17只黃羽肉雞。截至調查時，除患者家中死亡2只肉雞外，其他戶也死亡2只肉雞。雞販子所販賣的黃羽肉雞來自本市一活禽批發市場。

1.1.2 臨床癥狀

未見雞冠出血或發紺、頭部和面部水腫、腳鱗出血等高致病性禽流感臨床癥狀，也未見呼吸急促、咳嗽、喘氣、精神沉郁等癥狀，僅出現黃綠色糞便。據養殖戶反映死亡的雞也沒有出現腳鱗出血和雞冠出血癥狀。

1.2 樣品采集

參考《高致病性禽流感防治技術規范》，分4組采集樣品，一組赴外購黃羽肉雞養殖戶家中，共采集23份全血和雙腔拭子；二組赴村內其他散養戶家中，重點采集患者及同批外購黃羽肉雞周邊的散養戶，共采集32份全血和雙腔拭子；三組赴村外養雞大戶家中，采集44份全血和雙腔拭子；四組赴城區活禽交易市場，采集20份環境樣，54份全血和雙腔拭子。雙腔拭子采集后，放入密閉的塑料袋內（一個采樣點的樣品，放一個塑料袋），于保溫箱中加冰、密封，送市動物疫病預防與控制中心實驗室檢測。全血經離心后，放入離心管中，編號，冷藏，縣動物疫病預防與控制中心檢測。

2 實驗室檢測

2.1 檢測試劑

禽流感病毒 H5（Re-6 株）亞型血凝抑制試驗抗原（哈爾濱維科生物技術開發公司出品，批號 2015033）；H7亞型血凝抑制試驗抗原（哈爾濱維科生物技術開發公司出品，批號2015031）；禽流感病毒H7亞型RT-PCR檢測試劑盒（北京世紀元亨動物防疫技術有限公司產品，批號AIVH7 20161216P）。

2.2 檢測方法

2.2.1 禽流感病原學檢測

按禽流感病毒RT-PCR檢測方法（NY/T 772-2013）。從樣品中提取病毒 RNA 后，在反轉錄酶的作用下，以RNA為模板，以引物為起點合成與RNA模板互補的cDNA鏈，在TaqDNA聚合酶的作用下，經過高溫變性、低溫退火、中文延伸的循環，使特異DNA片段的拷貝數放大一倍。經過35次循環，最終使擴增DNA片段放大數百萬倍。將擴增DNA片段進行電泳，經染色后在紫外燈照射下，可見到DNA片段的擴增帶，實現檢測AIV-H7亞型核酸的目的。

2.2.2 禽流感抗體檢測

按高致病性禽流感診斷技術（GB/T 18936—2003）進行血凝和血凝抑制試驗。

2.3 檢測結果

2.3.1 血清學檢測結果

共檢測153份家禽血清，H5抗體合格率96.73%，H7抗體陽性率為16.99%。其中4戶外購黃羽肉雞戶所采樣品H7抗體陽性率為95.65%；周邊散養戶所采樣品H7抗體陽性率為0%；養殖大戶所采樣品H7抗體陽性率為4.55%；城區活禽交易市場所采樣品H7抗體陽性率為3.7%；外購黃羽肉雞戶所采樣品中，H7抗體效價達到9孔以上占34.78%，8孔占17.39%，7孔占17.39%，6孔占13.04%，5孔占8.7%，4孔占4.35%，3孔占4.35%。

2.3.2 病原學檢測結果

根據市動物疫病預防與控制中心實驗室檢測結果顯示，共檢測32份病原學樣品，6份陽性，陽性率為18.75%，外購黃羽肉雞戶所檢測樣品的陽性率為38.46%，周邊散養戶及規模養殖戶所檢樣品陽性率為0%。

3 處置

3.1 家禽處置

為防止陽性帶毒家禽將H7N9流感病毒傳染到本村其他散養家禽或野鳥，參照《高致病性禽流感防治技術規范》，對村內所有家禽進行撲殺，將家禽及其墊料一并深埋無害化處理。

3.2 活禽交易市場處置

城區內兩個活禽交易市場休市，清洗活禽交易攤點的禽籠、宰殺設施，指導交易市場管理方對交易攤點每日早晚各用漂白粉消毒一次。

4 討論

4.1 患者H7N9流感病毒傳染源

此H7N9流感患者為一名58歲的男性，發病前16d和9d，妻子分兩次外購了10只黃羽肉雞，存在家禽暴露史，發病前一天還從事未充分發酵的雞糞鋪攤還田，患者自身體質較弱。從患者外購的黃羽肉雞雙腔拭子中檢測出H7N9流感病毒，且血清學實驗顯示患者外購的黃羽肉雞H7抗體效價全部為陽性（效價達到9孔的占50%）。提示該患者的傳染源很有可能是外購黃羽肉雞及其分泌排泄物。由于H7N9流感當前在我國養禽場的具體流行情況尚未明確[1]，所以黃羽肉雞的H7N9流感病毒來源有可能來自本市這家農產品批發市場，可能來自雞販子販賣途中經過區域，也有可能為當地野鳥。由于患者及其家屬從未前往城區活禽交易市場，所以可以排除本地活禽交易市場暴露傳染。

4.2 處置措施

為避免再次出現人感H7N9病例，根據市、縣實驗室檢測結果，迅速采取撲殺無害化處理措施、消毒滅源措施和定期采樣監測措施。在當地人民政府、畜牧獸醫局工作人員和村級防疫員的共同努力下，完成H7N9人感流感應急處置工作。

4.3 活禽批發市場監管

此次被感染的活禽均來自活禽批發市場，批發市場銷售的活禽來自外省，作為市場監管應在活禽進場前，快速檢測該批次家禽是否攜帶H7N9流感病原。在農業部2017年4月出臺2516號公告后，市場監管方應向活禽批發商販索取活禽H7N9流感抗體檢測報告。并嚴格執行“1110制度”。

4.4 實驗室診斷重要性

此次人感H7N9流感病例出現后，市縣獸醫實驗室迅速開展病原學和血清學檢測，通過實驗室診斷，為采取措施提供科學依據，充分體現出市縣獸醫實驗室診斷的重要性。

4.5 強制免疫必要性

自2017年9月起，農業部要求在家禽中開展H5H7二價苗強制免疫，經過強制免疫后，我國人感H7N9流感病毒大幅下降，據統計2016年10月1日至2017年第15周全國共610人感染，2017年10月1日至2018年4月16日，全國只有4人感染。

[1]劉沛增，莊青葉.我國 9 省份 H7N9 亞型禽流感和傳染性支氣管炎病原流行病學調查[J].畜牧與獸醫，2014，46（7）：101-105.