胃腺癌中巨噬細胞加帽蛋白G和基質金屬蛋白酶-2的表達及相關性

王 靜 于 敏 牛亞靖 張 紅

(錦州醫科大學附屬第三醫院外科，遼寧 錦州 121001)

胃癌最常見的病理類型是腺癌，病變形成過程中腫瘤細胞具有明顯的遷移特征，對周圍組織的侵襲和破壞能力明顯〔1〕。基質金屬蛋白酶(MMP)-2具有較強的溶解細胞外基質和基底膜的作用，可以使腫瘤轉移的屏障打開，促進腫瘤細胞的播散〔2〕。巨噬細胞加帽蛋白(Cap)G是凝膠溶素超家族中的肌動蛋白結合蛋白，通過給微絲末端加帽和形成驅動力來控制微絲的移動，并對維持細胞的結構，調控腫瘤細胞的遷移〔3〕。本研究關注胃腺癌中CapG和MMP-2的表達，分析其臨床意義及相關性。

1 資料與方法

1.1一般資料 2015年1月至2016年12月錦州醫科大學附屬第三醫院行根治手術后的59例胃腺癌患者為觀察組，留取完整的臨床資料及術后新鮮的組織。男31例，女28例，年齡38～87(平均62.9)歲。病例均經病理醫師確診，并符合世界衛生組織(WHO)中的診斷標準及分型。排除標準：①術前行放、化療；②有風濕免疫性疾病；③伴有其他器官惡性腫瘤。選擇12例距腫瘤邊緣>5 cm的非腫瘤性胃黏膜組織為對照組，留取新鮮組織，其中男6例，女6例，年齡40～82歲，平均59.8歲。兩組性別、年齡構成差異無統計學意義(P>0.05)。

1.2兩組CapG和MMP-2表達檢測 兩組新鮮標本取材后均立即置于70%的酒精中固定。CapG和MMP-2檢測應用流式細胞術。取出70%酒精固定后組織，用眼科剪刀將其剪碎成漿糊狀，放在不銹鋼網上輕搓后，用生理鹽水輕輕沖洗，300目銅網過濾后收集細胞懸液，離心1 min后制備單細胞懸液(1×106/ml)。取1 ml，嚴格按實驗步驟加入一抗、磷酸鹽緩沖液(PBS)及異硫氰酸熒光素(FITC)-IgG二抗等試劑后，應用美國BC公司生產的流式細胞儀上機檢測，應用系統的自帶的 Expo32 ADC軟件進行分析。

1.3結果判定 以熒光指數(FI)表示蛋白表達的半定量。FI=(癌組織中蛋白表達的平均熒光強度-對照樣品平均熒光強度)/正常對照樣品平均熒光強度。

1.4統計學方法 應用SPSS17.0統計軟件進行t檢驗及線性相關分析。

2 結 果

2.1兩組CapG和MMP-2表達的比較 觀察組CapG和MMP-2表達量明顯高于對照組(P<0.05)。見表1。

表1 兩組CapG和MMP-2表達的比較

2.2CapG和MMP-2表達在觀察組不同臨床病理特征中比較 觀察組CapG和MMP-2表達與腫瘤淋巴結轉移、脈管累犯和癌結節顯著相關(P<0.05)。見表2。

2.3觀察組CapG和MMP-2相關性 CapG和MMP-2表達呈正相關(r=0.48，P<0.05)。

表2 CapG和MMP-2表達在觀察組不同臨床病理特征中的比較

3 討 論

胃腺癌是由胃黏膜上皮異型增生引起的，引發高級別上皮內瘤變并癌變，癌細胞形成后腫瘤多數表現為低分化的，腫瘤細胞體積小，具有侵襲性生長的特征，同時具有明顯遷移潛能〔4，5〕。MMPs家族是一類蛋白，具有類似結構，由疏水信號肽序列、富含脯氨酸鉸鏈區、催化活性區、前肽區、羧基末端區構成。其中前肽區和催化活性區具有高度保守性〔6〕。MMP-2屬于明膠酶，其基因定位在染色體16q21，由12個內含子和13個外顯子構成，其表達蛋白的分子量是72 kD〔7〕。MMP-2的功能調節源于轉移后的分泌、前酶原的激活。活化后的MMP-2在降解細胞外間質的作用過程中有“鉆頭”的作用〔8，9〕，MMP-2的作用有促進細胞增殖，使分離脫落的腫瘤細胞侵入脈管系統；調節腫瘤細胞運動，促進趨化性；促進腫瘤間質新生血管形成〔10，11〕。CapG含有348個氨基酸，大小為38.5 kD，廣泛表達于巨噬細胞相關的組織中〔12〕。肌動蛋白細胞骨架是細胞有眾多功能的特征，對保持細胞形態有重要作用〔13〕。當鈣離子存在的作用下，CapG作為Actin結合的蛋白，可以與鈣離子形成有效的結合，能在F-actin延伸末端加帽，阻止其延伸，參與肌動蛋白和肌動纖維的重塑過程中，對調節細胞凋亡、調節細胞遷移及調節胞吞作用有重要價值〔14，15〕。CapG尤其在細胞高增殖、局部浸潤和遠處播散的腫瘤中表達升高，認為CapG是細胞侵襲和轉移的相關促進蛋白〔16〕。

本研究提示CapG和MMP-2高表達是胃腫瘤形成的重要蛋白因素，二者可能具有癌基因的類似作用；CapG和MMP-2二者高表達可以促進腫瘤的淋巴結轉移和脈管侵犯的過程，由于上述因素是腫瘤進展及不良預后的重要指標，因此CapG和MMP-2高表達預示著腫瘤具有高度侵襲性的生物學行為和不良的預后。本文提示CapG和MMP-2二者在對腫瘤生長及進展的調節作用過程中具有一定的協同效應，并非是完全通過獨立的通路實現的。CapG可能作為上游信號對MMP-2進行高效調節。有研究認為CapG高表達有助于上皮間質轉化，使腫瘤細胞與間質的同質性增強，增加轉移潛能〔17〕。此時失去極性的胃腺癌上皮細胞易于轉化為運動能力強的間質樣腫瘤細胞，使腫瘤細胞與定植部位的組織黏附性增強，腫瘤出現定植，生長，形成轉移瘤〔18，19〕。

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