復方芩連草顆粒的急性毒性試驗研究

張郴 蘭慧 陽敬

摘 要：目的：研究復方芩連草顆粒的急性毒性，評價黃芩顆粒的安全性。方法：采用經典的急性毒性試驗方法對小鼠進行急性毒性研究。結果：給藥組小鼠無1例死亡，與對照組比較給藥組小鼠的體重變化無顯著性差異，行為活動未受影響，對給藥的小鼠尸解后未發現器官異常，未測得小鼠的黃芩顆粒的半數致死量（LD50），最大耐受量MTD為147.6g/kg。結論： 本試驗從急性毒性試驗研究結果分析，復方芩連草顆粒是一個安全的劑型。

關鍵詞：黃芩顆粒；急性毒性；試驗研究

中圖分類號：R285.5 文獻標識碼：A 文章編號：1671-2064（2018）08-0192-02

大頭瘟是因感受天行邪毒侵犯三陽經絡而引起的以頭面焮紅腫痛、發熱為主要特征的溫疫病。又稱大頭病、大頭風、蝦蟆瘟、大頭天行等。多發于冬春兩季。由于人體正氣不足，感受時行風熱邪毒而形成。初起邪毒在于衛分，可見發熱微惡寒等表證，旋即熱毒燔灼肺胃膽經，上攻顏面咽喉[1-3]。

復方芩連草顆粒源于萬密齋《保命歌括》黃芩黃連甘草湯，由黃芩、黃連、甘草三味藥組成，被歷代醫家譽為“經方”，經臨床使用具有清熱解毒，消腫止痛的功效。用于治療小兒大頭瘟。但湯劑服用量大，味道不佳，小兒難以服用，且湯劑不方便攜帶，因此特將黃芩黃連甘草湯開發成現代制劑復方芩連草顆粒。為使復方芩連草顆粒合理安全應用應用于臨床，本實驗參照急性毒性實驗方法，進行復方芩連草顆粒的小鼠急性毒性試驗[4-5]。

1 儀器與藥材

復方芩連草顆粒由紅河衛生職業學院藥學教研室提供；JY201電子稱，上海民橋醫療器械有限公司生產；昆明種小鼠，清潔級，體重：20±2g，雌雄各半，分性別飼養于實驗室內。室溫20～26℃，相對濕度40%～70%，自然光源，排風扇通風2次/d，每次0.5h，雌雄分籠飼養，水（自來水）自由攝取，飼料為實驗動物全價營養飼料。

2 方法與結果

2.1 預試驗

在正式實驗開始之前，以小規模小鼠數量做了預試驗，以便為正式試驗提供依據。隨機將16只小鼠分為2組，雌雄各半，一組作為空白組，另一組作為預實驗組，試驗給藥前禁食不禁水12h。給藥組：以可供灌胃的最大生藥濃度，即1.23g/ml，小鼠灌胃可承受的最大體積（每1g體重0.04ml）1次灌給；復方芩連草顆粒空白組灌胃等量蒸餾水，方法同預實驗組。給藥后常規飼養，觀察5d。結果小鼠全部存活.因此，無法測出該中藥制劑的LD50，說明該中藥復方制劑藥毒性很低，是較安全的，故測定本藥對小鼠的最大耐受量[6-7]。

2.2 最大耐受量的測定

在體重范圍內，選取健康小鼠40只，雌雄各半，按性別隨機分為2組：對照組和復方芩連草顆粒組，每組20只。禁食不禁水15h后，復方芩連草顆粒藥物組生藥濃度為1.23g/ml，按（每10g體重0.4ml）的最大容積給藥，對照組給予等體積的純凈水。上述動物按一天三次給藥，給藥間隔時間4小時，即上午（9：00）給藥1次，中午（13：00）給藥1次，下午（17：00）給藥1次，給藥間隔期間不進食，給藥四小時后自由進食、飲水。給藥后密切觀察小鼠的反應情況，然后繼續觀察連續15d，每天稱取其體重并觀察動物反應。試驗第15d稱取體重后，處死小鼠，解剖觀察其心、肝、脾、肺等主要器官的組織變化。

2.3 試驗結果

試驗結果見表1、表2及圖1所示：

從表1，表2、圖1可看出：復方芩連草顆粒給藥后15日內，動物沒有死亡，狀況良好，大小便正常，且外觀、皮毛、行為、呼吸均正常，鼻、眼、口腔無異常分泌物，給藥組與對照組的體重增長無顯著差異。復方芩連草顆粒組小鼠的最大藥量為147.6g/kg，按成人60kg體重計算相當于人全日用藥量（0.8g/kg）的185倍，未見動物死亡。認為復方芩連草顆粒毒副作用小。

3 討論

本試驗對復方芩連草顆粒小鼠急性毒性進行了觀察和評價，研究結果發現：給小鼠灌胃最大濃度的復方芩連草顆粒水溶液，無一死亡，經小鼠急性毒性最大耐受量試驗考察，得到黃芩顆粒水溶液的最大給藥量值為147.6g·kg-1·d-1。本實驗采取最大濃度以及可耐受的最大灌胃體積灌胃給藥，復方芩連草顆粒組和對照組小鼠均未觀察到毒副反應，未見1例死亡。一般認為，按體質量計算小鼠最大給藥量相當于成人用量的100倍以上則較安全，因此本試驗可為進一步臨床研究提供依據。

參考文獻

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[2]李果剛，員鳳英，王歡，張妍妤，程建麗.重古法而不拘古方——古代醫家辨治疫病大頭瘟芻議[J].上海中醫藥雜志，2008，（11）：59-61.

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[7]王東.兩性霉素B脂質體在雌雄大鼠的急性毒性和毒代動力學研究[D].河北醫科大學，2017.