脂肪酶的試劑攜帶污染對總膽汁酸檢測的影響

雷鵬，侯芳，陳開楊，歐陽慧，楊陽，向尹

(樂山市人民醫院檢驗科，四川 樂山 614000)

血清總膽汁酸（TBA）在臨床肝病診斷中應用較廣，對急、慢性肝炎，肝硬化，肝內外膽道阻塞，膽汁淤積等疾病的診斷具有重要的臨床意義[1，2]。在實際工作中我們發現部分TBA結果有假性升高的現象。經追蹤發現，測定脂肪酶（LPS）后的TBA濃度與單獨測定TBA濃度有差異。為探討LPS試劑是否影響TBA測定，我們用日立7600－110和7600－020全自動生化分析儀，實驗分析LPS試劑對TBA攜帶污染的情況，現報告如下。

1 材料與方法

1.1 試劑與儀器 ⑴檢測標本：收集當日無溶血、無黃疸、無脂血的血清標本混合成1份樣本后再分為20份，每份2ml。⑵儀器：日立7600－110、7600－020全自動生化分析儀。其中，7600－110由D模塊與P模塊組成，LPS與TBA試劑在P模塊。7600－020由兩個 P模塊組成，LPS試劑在 P2模塊，TBA試劑在P1模塊。試劑：TBA試劑由四川邁克提供，批號：0217011，有效期：20180209。

1.2 方法 ⑴LPS對TBA的干擾程度：先對10份混合血清的TBA進行單獨檢測，將其作為對照組。接著另取混合血清10份，做LPS檢測后接著做TBA檢測，連續10次，將其作為實驗組1。然后在LPS檢測后設置特殊清洗，做LPS檢測后接著做TBA檢測，連續10次，將其作為實驗組2。在7600－110上進行上述三種檢測，在7600－020上進行上述前兩種檢測。⑵干擾試劑的確認：取混合血清1份，取500μl混合血清與5μl生理鹽水混合作為對照組，再取兩份500μl混合血清分別與5μl LPS的R1、R2試劑混合作為實驗組1和實驗組2，每份樣本重復測定10次。在7600－020上進行上述檢測。⑶LPS對TBA結果影響的持續時間：將10份混合血清單獨測試TBA，作為對照組。接著在儀器上對15份混合血清按下列順序測試：LPS、LPS、LPS、LPS、LPS、TBA、TBA、TBA、TBA、TBA、TBA、TBA、TBA、TBA、TBA，按上述檢測重復 10次作為實驗組1。然后在LPS檢測后設置特殊清洗，重復實驗組1步驟作為實驗組2。在7600－110上進行上述檢測。

1.3 統計學處理 應用SPSS 18.0統計軟件進行數據分析，計量資料以（±s）表示，P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 LPS對TBA的干擾程度實驗結果 在7600－110上同時選擇LPS與TBA進行檢測所得TBA的值明顯高于單獨檢測TBA，差異有統計學意義（P＜0.05）。而在檢測LPS后設置特殊清洗再檢測TBA所得的值也明顯高于單獨檢測TBA，差異有統計學意義（P＜0.05）。 而在 7600－020 上同時選擇LPS與TBA進行檢測所得TBA的值與單獨檢測TBA 相比，差異無統計學意義（P＞0.05）。 （表 1）

2.2 攜帶污染的試劑確認實驗結果 加入LPS試劑R1后，所測得的TBA值明顯高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05）。 而加入 LPS試劑 R2后，所測得的TBA值也明顯高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05）。 （表 2）

2.3 LPS試劑攜帶污染對TBA結果影響的持續時間 參照參考文獻[3，4]方法，未設置特殊清洗時，LPS試劑對其后TBA檢測的干擾到第10管仍然存在，差異有統計學意義（P＜0.05）。而在 LPS 檢測后設置特殊清洗，LPS試劑對其后TBA檢測的干擾持續到第 7 管測試，差異有統計學意義（P＜0.05），第 8管測試與對照組相比，差異無統計學意義 （P＞0.05）。 （表 3）

表1 3種不同方法檢測TBA

表2 加入LPS試劑后所測TBA含量

3 討論

目前，全自動生化分析儀在臨床檢驗中廣泛使用，給日常工作帶來了極大的便利[5，6]。但在實際工作中，儀器的攜帶污染現象難以避免[7－9]。資料顯示，攜帶污染是影響全自動生化分析儀準確度、精密度的常見原因之一[10，11]。攜帶污染與不同儀器、試劑成分及項目測定順序、組合以及試劑針、攪拌棒、比色杯是否清潔或損壞均有一定的關系[12]，其中常見原因是試劑間的交叉污染。試劑間的交叉污染常見于試劑中含有下一個檢測所要測定的底物，或含有的某種試劑成分與下一反應的底物有作用，因而直接干擾下一反應的測定結果；另一種原因是該試劑所發生的反應對下一個項目的反應過程帶來間接的干擾[13－15]。

本文通過實驗發現LPS的R1和R2試劑對TBA測定有明顯的正干擾，同時還發現LPS的R1和R2試劑中含有大量的膽汁酸。在7600－110上對LPS先測定，之后行TBA測定時，TBA測定結果表現為假性增高，結果明顯區別于對照組。同時在對LPS測定后設置特殊清洗再行TBA測定，TBA測定結果仍假性增高，結果也高于對照組。而在7600－020上，由于LPS與TBA試劑分別處于不同的模塊中，所以并不存在LPS對TBA的攜帶污染。實驗結果還表明在LPS檢測后設置特殊清洗并不能完全清洗試劑針上的LPS試劑，這可能與LPS試劑中含有大量的膽汁酸，儀器并不能徹底沖洗干凈有關。

表3 LPS試劑對TBA測定干擾持續時間

本實驗還表明LPS試劑對TBA測定的影響具有持續性，未設置特殊清洗，TBA測定的第10管仍存在攜帶污染。即使設置特殊清洗，TBA測定的第7管也存在攜帶污染。這要求實驗室人員在平時的工作中發現TBA出現異常結果時，要及時考慮攜帶污染的情況，分析之前測定的項目是否包含LPS，并在不同的儀器上復查。

綜上所述，結合TBA測定中，LPS試劑對其結果正干擾影響進行分析，可將被干擾的項目和干擾的項目在不同的模塊中安排，對分析項目的設置必須注意位置，加強防范措施，從根本上保證實驗數據的可靠性，為臨床提供客觀真實的診療依據。

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