劉婷,陳先春,肖九長
(贛州市人民醫院檢驗科,江西 贛州 341000)
解脲脲原體(ureaplasma urealyticum,UU)和沙眼衣原體(Chlamydia trachomatis,CT)是女性生殖道感染常見的病原體,可引起非細菌性陰道炎、宮頸炎,還可導致女性的不孕不育、先兆流產和自然流產[1-3],嚴重影響女性健康。近年來,這兩種病原體引起的感染性疾病發病人數逐年上升[4],發病地區不斷擴大,危害日益嚴重,已成為當今突出的社會公共衛生安全問題。贛南地區是欠發達地區,外出流動人口較多,UU、CT感染的潛在風險大,因此,為了了解本地區UU、CT在女性人群中的感染情況,本研究采用實時熒光定量PCR檢測方法對2015年1月至2016年12月期間從我院婦產科、生殖科和皮膚科等科室送檢的女性生殖道分泌物標本進行UU、CT病原體檢測,分析其感染狀況及規律,為本地區女性生殖道感染疾病的臨床診斷和治療提供實驗室依據,為優生優育的實現提供幫助。
1.1 一般資料 2015年1月至2016年12月首次在江西省贛州市人民醫院婦產科、生殖科、皮膚科等科室就診的女性生殖道分泌物標本4453份,患者均來源于贛南地區,均有性接觸史,年齡分布在15-65歲之間,中位年齡33歲。
1.2 儀器與試劑 ABI7500熒光定量PCR儀購于美國ABI公司,UU、CT熒光定量檢測試劑盒購自廣東中山大學達安基因股份有限公司。
1.3 實驗方法
1.3.1 標本的處理 無菌棉拭子采集女性生殖道分泌物,加入1ml生理鹽水震蕩混勻后轉移至1.5ml離心管中,離心 12000r/min,5min,棄上清,沉淀中加50ulDNA提取液,用移液槍吹打混勻后置于100℃恒溫處理 10min,離心 12000r/min,2min備用。
1.3.2 PCR擴增 嚴格按照試劑盒說明書,取PCR反應管若干,分別加入處理后的樣品 (標本或陰性、弱陽性、陽性質控品)上清液2ul,或直接加入陽性定量參考品2ul,8000r/min離心數秒,放入ABI7500擴增儀樣品槽。按下列反應條件進行擴增 :93℃ ,2min;93℃ ,45s;55℃ ,60s,10 個 循 環 ;93℃,30s;55℃,45s,30 個循環。
1.3.3 結果判讀 若增長曲線呈 S形且 Ct值<27判定為陽性:若增長曲線不呈S形或Ct值>30,則標本的DNA含量低于檢測下線,結果為陰性:如果27<Ct值<30則為實驗灰度區,需重復實驗一次,若增長曲線呈S形且Ct值<27判定為陽性。
1.4 統計學分析 采用SPSS 17.0統計軟件進行數據處理和統計分析,計數資料以例數或百分比表示,組間比較采用卡方檢驗,P<0.05為差異有統計學意義。
2.1 4453份標本中,UU感染陽性總人數為2809,陽性率為63.08%;CT感染陽性總人數為467,陽性率為10.48%;其中UU、CT混合感染的人數為308,陽性率為6.92%,占CT感染總陽性率的65.95%。
2.2 不同年齡段UU、CT感染情況分析 該結果顯示不同年齡段UU、CT的陽性率有統計學差異(P<0.05),UU、CT在小于20歲的女性人群中感染率最高。其中CT的感染率隨著年齡的增加而下降(見表 1)。

表1 UU、CT不同年齡段陽性率比較
2.3 不同季節UU、CT感染情況分析(如表2所示)

表2 不同季節UU、CT感染情況分析
解脲脲原體(UU)和沙眼衣原體(CT)是常見的性傳播疾病病原體,其中,UU的感染率普遍比CT高。女性UU、CT感染的常見部位是子宮頸,且常無自覺癥狀,不易引起注意,常反復遷延,造成不可逆的病理改變。UU是一類原核細胞微生物,介于細菌和病毒之間,能獨立生活,自行繁殖,主要寄生于泌尿生殖道。CT生長期中有始體和原體兩種發育形式,其中原體有很強的感染力,存在于宮頸、尿道分泌物、精液、糞便及易感宿主細胞中,通過親密接觸、性交及直接的體液交換傳播。UU、CT因能通過性生活傳播,近年來感染率有增高趨勢。女性感染的UU、CT可以經過宮頸管進入子宮再逆行感染輸卵管盆腔,從而引起輸卵管炎及盆腔炎,導致輸卵管不通,從而引起不孕不育[5,6],還能通過性交的方式傳給性伴侶,影響其精液質量,引起不育。由此可見,UU、CT不僅能引起生殖道炎癥,還是不孕不育的危害因素,不利于優生優育[7]。
本結果顯示UU在贛南地區女性生殖道感染的陽性率為63.08%,CT的陽性率為10.48%,與文獻報道的其他地區的陽性率接近[8-10]。這一結果提示UU是女性生殖道感染防治的重要病原體。究其原因,可能是因為UU是女性生殖道的正常居住微生物,與其他菌群共生,在感染人體后無明顯臨床癥狀,機體免疫力低下或粘膜受損的情況下可大量繁殖而致病。UU、CT混合感染的陽性率為6.92%,占CT感染總陽性率的65.95%,說明性傳播疾病患者常常不是單一病原體感染,因一種病原體感染后導致人體局部抵抗力降低,從而容易合并其他病原體感染[11]。這一結果提示對CT感染高危人群應同時做UU篩查。
不同年齡段UU、CT感染率數據分析顯示,每個年齡組的UU陽性率均高于60%,由此可見,UU是女性各年齡段生殖道感染的常見病原體。此外,小于20歲的女性生殖道感染陽性率比20歲以上的育齡女性高,可能與這類人群性健康知識的欠缺有關,應加強健康教育;CT的感染率隨著年齡的增長而降低,并且存在季節差異,其中在秋季感染的陽性率最高,提示女性在秋季更應注意生殖道衛生,加強防護,臨床醫生也應該加強對易感人群CT的檢測。
本研究通過熒光定量PCR技術,首次對贛南地區女性生殖道UU、CT感染狀況做了調查分析,對生殖道感染疾病的診斷和治療提供了依據,對指導育齡婦女的優生優育有積極的幫助。
[1]Amjad Ahmadi,Mazaher Khodabandehloo.Association between Ureaplasma urealyticum endocervical infection and spontaneous abortion[J].Iran J Microblol,2014,Dec:6(6):392-397.
[2]呂曉麗,閻琳等.生殖道感染與不孕不育的關系[J].國際檢驗醫學雜志,2014,35(7):835-836.
[3]金錫靜,金錫霞.妊娠生殖道感染與先兆流產的臨床關系研究[J].實用預防醫學,2015,6(22):712-713.
[4]徐媛,方莉等.四川東北地區女性生殖道感染沙眼衣原體、淋球菌和解脲脲原體的結果分析 [J].國際檢驗醫學雜志,2014,35(15):2047-2048.
[5]周云,徐學嵐,王春平,等.327例輸卵管性不孕患者生殖道衣原體、支原體檢測及藥物敏感分析[J].中華實驗和臨床病毒學雜志,2011,25(3):201-204.
[6]陳仁,劉穎.輸卵管性不孕癥患者病原體感染狀況及用藥研究[J].實用預防醫學,2014,21(2):212-214.
[7]王芬,何文娟,周紅.不孕癥患者的解脲支原體和人型支原體感染率分析[J].中國婦產科臨床雜志,2012,13(1):59-60.
[8]莫秋菊,李歡,林華,等.桂林地區女性生殖道支原體及衣原體感染情況分析[J].國際檢驗醫學雜志,2015,(11):1623-1624.
[9]劉斌,胡慧瓊.荊州地區女性生殖道沙眼衣原體、解脲脲原體感染情況分析[J].實驗與檢驗醫學,2017,35(1):100-101.
[10]丁友發,劉五高,王艷,等.對女性生殖道解脲脲原體、沙眼衣原體及淋病奈瑟菌感染的研究[J].中華醫院感染學雜志,2011,21(21):4619-4620.
[11]張國棟,么作義,喬國昱,等.熒光定量PCR檢測CT、NG和UU性病混合感染[J].河北醫藥,2011,33(5):771-772.