溶血患兒與非溶血患兒COHb、參數的變化觀察

王琦

(南陽市第一人民醫院檢驗科，河南 南陽 473000)

新生兒溶血可以導致患兒病死率的顯著上升，其病因主要與血型抗體對于不同抗原表位的結合導致的患兒紅細胞的溶解有關。流行病學研究顯示，ABO新生兒溶血的發生率可達223－455/1萬人左右，且在二胎或者既往具有溶血性疾病的孕產婦中，其發病率更高[1，2]。直接抗人球蛋白試驗等血清學檢查評估ABO新生兒溶血的靈敏度較低，但其檢測過程不夠簡便易行。新生兒碳氧血紅蛋白（COHb）、網織紅細胞參數等指標，能夠反應新生兒溶血過程中紅細胞分解、血紅素的代謝等病理過程，并能夠反應患兒體內造血功能的代償程度。部分研究證實了COHB在新生兒溶血中的異常表達，揭示高表達的COHB是促進新生兒核黃疸、膽紅素腦病等不良臨床結局的重要因素[3－5]，但缺乏對于COHB的診斷學價值的分析，本次研究選取90例ABO溶血患兒，研究了COHB、網織紅細胞參數等指標的異常表達及其診斷學效能。

1 對象與方法

1.1 研究對象 選取90例ABO溶血患兒 （病例組），病例收集時間2014年2月－2016年9月，選取同期非溶血病理性黃疸兒90例作為對照組，同期健康新生兒90例（健康組）。

病例組，男58例、女32例，分娩孕周 37～41周， 平均 39.6±1.5 周， 新生兒體質量 3304.2±391.2g，發病日齡 2.9±0.5d，母親血型均為 O 型，患兒血型：A型50例、B型40例，游離抗體試驗陽性例72例。對照組，男54例、女36例，分娩孕周37～41 周， 平均 39.4±1.2 周， 新生兒體質量 3341.7±366.9g，發病日齡 2.8±0.5d，母親血型均為 O 型，患兒血型：A型53例、B型37例，游離抗體試驗陽性例70例。健康組，男50例、女40例，分娩孕周37～41 周， 平均 39.2±1.3 周， 新生兒體質量 3321.6±300.2g，母親血型均為O型，新生兒血型：A型49例、B型41例。病例組和對照組的性別、分娩孕周、新生兒體質量、發病日齡、新生兒血型比較，差異均無統計學意義（P＞0.05）；三組新生兒的性別、分娩孕周、體質量、母體及新生兒血型差異無統計學意義（P＞0.05）。

1.2 納入排除標準

1.2.1 納入標準 ⑴ABO溶血的診斷標準參考中華醫學會的相關標準；⑵孕周37～41周；⑶體質量＞1.5kg；⑷入組前患兒未接受退黃治療；⑸日齡＜10d；⑹本研究獲得研究對象父母的知情同意。

1.2.2 排除標準 ⑴具有宮內窘迫、窒息病史；⑵合并妊娠糖尿病、高血壓；⑶伴有免疫功能障礙、遺傳性疾病；⑷伴有異常其他疾病（顱內出血、敗血癥等）。

1.3 指標檢測方法 采集靜脈血約5ml并分作兩份，一份自然抗凝后以3000r/min離心10min，取上清液采用酶聯免疫吸附法測定血清中COHb、STB水平，檢測試劑盒購自北京中杉金橋生物有限公司，具體檢測步驟嚴格按照試劑盒說明書進行操作；另一份置于枸櫞酸鈉抗凝管內，加入RET、HFR、MFR檢測試劑盒后，利用免疫發光法檢測RET、HFR、MFR水平，試劑盒購自上海奧普生物醫藥有限公司，具體檢測步驟嚴格按照試劑盒說明書進行。

1.4 統計學方法 統計軟件采用SPSS 16.0，采用均數±標準差（±s）進行統計描述，組間比較采用t檢驗，繪制ROC曲線，選取最佳診斷臨界值時對應的靈敏度、特異度、漏診率、誤診率及AUC值；P值＜0.05表示差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 病例組和對照組的COHb、STB水平指標比較病例組的COHb水平顯著的高于對照組和健康組（P＜0.05），病例組的STB水平與對照組均高于健康組 （P＜0.05）；對照組的COHb水平高于健康組（P＜0.05）；（表 1）。

表1 病例組和對照組的COHb、STB水平指標比較（±s）

表1 病例組和對照組的COHb、STB水平指標比較（±s）

組別病例組對照組健康組F值P值n C O H b（%） S T B（μ m o l/L）9 0 9 0 9 0 1.8 5±0.3 3 1.5 1±0.3 6 1.0 4±0.2 9 3 2.9 6 4＜0.0 0 1 2 6 7.8±8 9.1 2 6 2.0±9 4.2 1 1.0±5.2 1 5 8.4 0 1＜0.0 0 1

2.2 病例組和對照組的網織紅細胞參數指標比較病例組的RET、HFR、MFR檢測值顯著的高于對照組和健康組（P＜0.05），病例組的 LFR 測定值顯著的低于對照組和健康組（P＜0.05）；對照組的 RET、HFR、MFR 檢測值顯著的高于健康組（P＜0.05），對照組的LFR測定值顯著的低于健康組 （P＜0.05）；（表 2）。

表2 病例組和對照組的網織紅細胞參數指標比較（±s）

表2 病例組和對照組的網織紅細胞參數指標比較（±s）

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2.3 COHb、RET、HFR、MFR、LFR 鑒 別 診 斷 ABO溶血患兒的 ROC曲線分析 COHb、RET、HFR、MFR、LFR鑒別診斷ABO溶血患兒的AUC值分別為 0.887、0.924、0.865、0.872、0.856，COHb、RET、HFR、MFR、LFR鑒別診斷ABO溶血患兒的靈敏度、特異度、漏診率、誤診率詳見表3；（表3）。

表 3 COHb、RET、HFR、MFR、LFR 鑒別診斷ABO溶血患兒的ROC曲線分析

3 討論

ABO新生兒溶血的發生，是現階段臨床上較為常見的新生兒疾病，其疾病的發生發展能夠在下列幾個方面影響到新生兒臨床結局[6，7]：⑴ABO新生兒溶血導致的高膽紅素血癥，促進新生兒腦組織的氧化應激損傷，加劇了神經元細胞膜的破壞；⑵ABO新生兒溶血的發生，能夠加劇肝腎功能損傷，促進心肌細胞膜的破壞等，增加患兒的病死率。因此ABO新生兒溶血的早期診斷具有重要的臨床意義，能夠早期指導臨床上光照治療等，改善高膽紅素血癥表現，降低多器官損害的并發癥的發生[8，9]。但迄今為止雖然直接抗球蛋白試驗的檢查，能夠作為臨床上評估溶血發生的主要指標，但其對采血、檢測、設備要求及費用等方面均有較為嚴格的要求，而且抗球蛋白試驗檢測難以評估患兒體內的造血系統的代償性表現，只能在協助診斷方面具有一定的參考價值，而對于治療、預后評估等方面無相應的預測作用。

COHb是血紅素分解為膽紅素的過程中一氧化碳與氧氣結合的產物，其能夠較為靈敏的反應紅細胞破壞、膽紅素生成等病理過程。已經證實的是COHB在RH溶血患兒體內存在明顯的波動，其檢測能夠為RH溶血的發生提供較為理想的篩查指標，其篩查的靈敏度可達 65%以上[10，11]；高、中、低熒光網織紅細胞百分率（HFR、MFR、LFR）是評估骨髓造血系統紅細胞成熟過程的重要指標，并能夠反應溶血新生兒體內的網織紅細胞的成熟程度[12，13]。

本次研究中并未發現兩組患兒的血清中STB的表達差異，提示STB并不能作為臨床上評估新生兒溶血病情或者早期診斷篩查的依據，這主要與膽紅素代謝的多種因素影響有關，新生兒溶血或者其他原因導致的紅細胞的溶解代謝性疾病等，均可能促進STB的上升；COHB的表達具有明顯的差異，其中病例組患兒血清中COHB的表達明顯高于對照組，差異具有統計學意義，COHB的上升主要與患兒體內一氧化碳對于血紅蛋白的結合程度、紅細胞分解代謝的速率等因素有關，由于新生兒ABO溶血的紅細胞破裂后血紅蛋白、含鐵血黃素等的分解，一氧化碳結合循環血中代謝產物的能力明顯增強。楊愛娟等[14，15]研究者也發現，ABO溶血的新生兒，COHB的濃度可平均上升25%-55%左右，患者的體內COHB的濃度越高，臨床預后越差、病程越長。HFR、MFR是評估骨髓造血系統中不成熟網織紅細胞數量的重要指標，相關指標的上升程度越高，骨髓造血的代償性表現越為明顯，本次研究中病例組新生兒體內的HFR、MFR等指標明顯上升，這主要與ABO溶血導致的骨髓造血系統的激活有關，而網織紅細胞比例的上升則符合溶血性貧血的一般性表現。LFR測定值顯著的低于對照組，其原因一方面與本次研究的臨床資料的收集偏差關，另一方面可能與LFR測定的臨床影響因素較為復雜有關。最后，本次研究發現 COHb、RET、HFR、MFR、LFR 對鑒別診斷ABO溶血患兒的診斷價值較高，臨床上可以通過評估RET等指標，對于抗球蛋白抗體檢測尚無開展或者無相關檢測條件的醫院，可以考慮檢測上述相關指標來評估新生兒ABO溶血的發生風險。

綜上所述，ABO溶血新生兒 COHb、RET、HFR、MFR顯著的升高，STB水平顯著的降低，對于早期診斷ABO溶血新生兒具有一定的臨床價值。

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