王國旗,唐佩福
創面污染能否導致感染形成常取決于致病菌的類型和數量,一般創面軟組織內細菌數量達到105CFU/g (tissue)即可認為達到臨床感染標準[1,2]。因此,減少或殺滅軟組織內的細菌是治療軟組組感染的重要目標,也是用來衡量軟組織感染治療狀況的重要指標之一。負壓創面療法 (negative pressure wound therapy, NPWT)在嚴重開放性骨折創面、糖尿病足潰瘍、下肢靜脈潰瘍等治療方面已經得到廣泛應用[3-7]。近年來,眾多研究相繼報道NPWT在感染性創面的應用,發現其可以減輕創面感染程度,加速創面愈合[8-11]。然而,目前報道NPWT治療下銅綠假單胞菌感染創面生物膜變化、生物膜成分改變,以及細菌在軟組織內的侵襲深度的研究較少。
1.1 巴馬香豬軟組織感染模型 巴馬香豬24只,術前適應性飼養1周。經過麻醉、脫毛及消毒,在巴馬香豬背部建立一個直徑5 cm深達肌肉層的軟組織創面,去除肌肉腱膜,充分止血后接種0.5 ml表達綠色熒光蛋白的銅綠假單胞菌菌液(總菌量為5×107CFU),涂抹均勻,半透明膜敷料覆蓋24 h,以確保細菌的穩定黏附和定植。本研究經過我院動物倫理委員會審查。
半透明膜敷料覆蓋24 h后(建模成功)將巴馬香豬隨機分為NPWT組(負壓組)和無菌紗布治療組(對照組),每組12只,分別進行治療。密切觀察敷料變化情況,每兩天更換敷料1次。分別于治療的第4、8、12、16天取材。
1.2 軟組織內細菌計數 將標本稱重并記錄。首先用無菌組織剪充分剪碎組織標本,按照組織標本與無菌PBS緩沖液的重量比為1∶99的比例混合,于研磨器中再次充分研磨。……