稻瘟病病原孢子觀測

朱興剛 馬軍挺

水稻是我國的主要糧食作物之一，種植面積占到了耕地總面積的26%，產量占糧食總產量的43%。稻瘟病（ Pyricularia oryzae Cavara ） 是影響水稻生產的主要病害，稻瘟病菌在一個生長季節里，只要條件合適，就能完成菌量積累過程而造成病害的流行。稻瘟病有以下特點：侵染頻繁，潛育期短，能夠藉氣流和雨水飛濺傳播；病原物繁殖率高但壽命不長，對環境敏感，不利條件下會迅速死亡； 病害傳播距離和效能高。稻瘟病菌孢子的產生、釋放、傳播和侵染過程受多種因素的影響，在大田條件下進行空中孢子浮游量的監測，及時掌握稻瘟病菌的時空動態，了解初侵染菌量或再侵染的菌量，有助于制定最佳的防治時機，有效地進行病害的控制和管理。掌握和運用合適的孢子檢測方法，對于基層植保工作者以及植物保護科研人員都有其重要價值。

1 影響稻瘟病孢子生活史的主要因素

1. 1 光 光不是孢子形成所必須的，但光線照射能顯著促進孢子形成。誘發分生孢子形成所需要的最少照射時間因溫度而不同。溫度越高照射時間應越短，在25 ℃溫度下需6 h。但光照減少會影響光合作用，削弱了抗性，增加感染。

1. 2 溫度 孢子萌發溫度10 - 35 ℃，最適溫度為25 - 28 ℃。潛育期主要受溫度控制，高溫下病斑擴展很快。

1. 3 濕度 高濕有利于分生孢子形成、飛散和萌發，高濕度持續達一晝夜以上，有利于病害的發生與流行。

1. 4 風 在每秒3. 5 m的弱風條件下，分生孢子原樣著生在分生孢子梗上干燥、收縮，但不脫落。超過這個限度的風速，特別是在每秒鐘5 m 以上的風速下，風力引起了孢子的機械脫落。

1. 5 雨 雨水飛濺對氣傳孢子的釋放和傳播都有重要影響。稻葉表病菌孢子附著率在孢子與葉表接觸5 h內與降雨強度和降雨持續時間關系密切，5 h 后影響變小，實際感染日期與下雨時期有關，根據常年觀察資料，稻瘟病發生和發展的初期常常有連續的降雨過程，且雨后迅速放晴，氣溫回升。

1. 6晝夜周期 晴天測定田間分生孢子脫落，8∶00 - 14∶00 脫落最少，0∶00 - 2∶00 脫落最多。孢子的脫落需要飽和的濕度，以及光照以后有6 - 8 h 的黑暗期，這樣的明暗周期，從明亮到黑暗的變化，可以觀察到敏感反應的脫落；相反地，由黑暗到明亮的變化則不發生脫落（鈴木1966） 。也有反對需要明暗周期的不同看法（巖野1978）。

1. 7 水滴 讓水滴接觸分生孢子柄與孢子的連接點時，馬上可以觀察到脫落（小野，鈴木1959） 。因此可以推斷，自然的露水、分泌液、雨滴等對于孢子的脫落起很大作用。即使濕度為100 % ，如果沒有水滴，也不能萌發和形成附著器。一旦讓孢子吸水20 min ，再讓它變成干燥狀態，孢子便失去萌發力。

1. 8 露珠 在最適溫度24 ℃左右，如果結露時間不到7 h ，也不能侵入。鈴木（1969） 提出了消露時間（x） 與形成附著器的孢子率y 之間存在y = 3. 4x - 19. 8 （6 ≤x ≤12） 。

2. 顯微鏡檢測方法和密度換算辦法

常見的檢測面積為18 mm ×18 mm ，利用推進器掌握長度和寬度，存在一定的誤差。在預報初期孢子量較少的情況下，可以全玻片檢查；孢子密度變大后可以改為觀測幾行，或者隨機觀測固定的n 視野數內的孢子數量。用接目測微尺計測法，可以在一定的觀測倍數下，測定出所用顯微鏡在固定倍數下的單視野直徑和面積S。根據某點觀測的視野數n 和觀測的孢子數x 就可以換算出該點的孢子密度：ρ= x/ nS。如果是全玻片檢查，就可以直接用孢子數和玻片面積來計算密度；如果是成行檢查，用一定倍數下的視野直徑D 和玻片長度W、觀測行數m 可以計算孢子密度：ρ=x/ mWD，或ρ=36.36364x/ mW.

3. 玻片法捕捉的擺放方式和擺放高度玻片法捕捉時，多采用水平的擺放方式，也有采用豎直放置方式的。擺放高度對于捕捉效果有明顯的影響。

同樣在1 m 的高度，豎直放置方式與水平放置相比，捕捉效率僅為水平放置的19 % - 36 %左右。所以用水平放置方式捕捉效果比豎直放置方式較好。因此在較多點位和較長時間的孢子量的監測中，特別是基層的農業植保部門，簡易的玻片捕捉法更加方便和實用。在田間樹立木樁作為支架，將涂有凡士林的玻片放置在不同的作物冠層高度及不同的方向上，定期更換玻片，并在顯微鏡下（10 ×10 或16 ×10 視野左右） 鏡檢每視野的孢子數或者整張玻片的孢子量。通過田間病原孢子的捕捉，可以模擬田間的實際情況，了解田間初始菌量的數量，研究不同生育期和不同距離、方向上病原孢子的發生和傳播情況，有利于及時對田間病情的發展作出預測，制定最佳防治時機，減輕病害損失。玻片的面積25.4*76.2=1935.48mm2，根據幾年的觀測當孢子密度大于2.1個/cm2，玻片孢子數大于40個，24小時觀測值時，即應該進行防治。

（作者單位：156333黑龍江省北大荒農業股份有限公司青龍山分公司、黑龍江省建三江青龍山農場陽光保險公司）