坪山區從業人員攜帶沙門菌的血清型分布及藥敏試驗分析*>*

張鮑虎，張 莉，楊書才，周 杰，張 揚

(廣東省深圳市坪山區人民醫院檢驗科 518118)

沙門菌可引起人類傷寒、副傷寒、食物中毒和胃腸炎等多種疾病，其種類繁多，至今血清學分型已高達 2 500 多個[1]。由于抗菌藥物的濫用,沙門菌逐漸呈現多重耐藥現象,近年來發現的1株超級細菌DT104就是多重耐藥沙門菌[2]。抗菌藥物濫用致使沙門菌耐藥菌株越來越多，對帶菌者進行藥敏試驗監測，可指導帶菌者規范用藥治療。為控制攜帶沙門菌的從業人員引起感染性疾病暴發傳播，本研究擬通過流行病學調查深圳市坪山區食品及公共場所從業人員(簡稱從業人員)攜帶沙門菌情況，并對檢出的沙門菌進行鑒定及藥敏試驗分析，為指導攜帶者規范藥物治療、常規抗菌藥物監測和防止食源性疾病發生提供幫助，現報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 收集2015年7-11月在坪山區人民醫院體檢的食品及公共衛生從業人員肛拭子4 620份，采用培養法分離出沙門菌61株。

1.2儀器與試劑 VITEK 2 Compact 細菌鑒定儀(法國梅里埃)；A2 生物安全柜(濟南巴貝斯)；恒溫培養箱(上海浦東榮豐)；沙門(SS)增菌液、血平板、木糖賴氨酸脫氧膽鹽(XLD)平板、克氏雙糖鐵生化管、動力-吲哚-尿素酶(MIU)生化管(廣州迪景)；沙門菌顯色平板(鄭州博賽)；革蘭陰性細菌(GN)鑒定卡、腸桿菌(ATB G-5)藥敏條(法國梅里埃)；沙門菌多價診斷血清(寧波天潤)。標準菌株傷寒沙門菌(ATCC 50096)購自深圳優康生物技術有限公司；藥敏質控菌株大腸埃希菌(ATCC 25922)來源于廣東省疾病預防控制中心。

1.3方法

1.3.1采樣方法 采樣人員采用無菌棉拭子插入受檢者肛門內 3～5 cm，略微轉動2周后取出放入SS增菌液等待送檢。

1.3.2培養方法 將采樣后的SS增菌液管放入35 ℃培養箱增菌24 h，3區劃線接種到XLD平板，放入35 ℃培養箱培養24 h，在XLD平板挑取可疑菌落接種到血平板、MIU管及克氏雙糖鐵培養管做初步生化鑒定及分離培養，經初步鑒定后將疑似沙門菌的標本進行革蘭染色、顯色平板培養。

1.3.3菌株鑒定 將顯色平板生長為紫紅色革蘭陰性桿菌菌落采用GN鑒定卡經VITEK 2 Compact細菌鑒定儀進行確認；血清型按照寧波天潤生物藥業有限公司沙門菌診斷試劑盒說明書進行分型。

1.3.4藥敏試驗 采用ATB G-5腸桿菌藥敏條，參照試劑說明書完成操作后，放35 ℃溫箱培養24 h后判讀結果。

2 結 果

2.1血清學分布 61株沙門菌血清型呈多樣性分布，B群最多，共31株(50.82%)，其中斯坦利沙門菌8株(13.11%)，鼠傷寒沙門菌6株(9.84%)，德比沙門菌7株(11.48%)，阿哥納沙門菌4株(6.56%)，乙型副傷寒沙門菌1株(1.64%)，沙門菌(未能鑒定型別)5株(8.20%)； 其次是C1群12株(19.67%)，其中湯卜遜沙門菌4株(6.56%)，嬰兒沙門菌2株(3.28%)，波茨坦沙門菌1株(1.64%)，沙門菌(未能鑒定型別)5株(8.20%)；C2群7株(11.48%)，其中紐波特沙門菌4株(6.56%)，病牛沙門菌1株(1.64%)，曼哈頓沙門菌1株(1.64%)，沙門菌(未能鑒定型別)1株(1.64%)；E1群7株(11.48%)，其中倫敦沙門菌3株(4.92%)，紐蘭沙門菌1株(1.64%)，沙門菌(未能鑒定型別)3株(4.92%)；E4群4株(6.56%)，其中夫登堡沙門菌4株(6.56%)。 61株沙門菌分屬5個群，14個血清型，有14株(22.95%)未能鑒定型別，排名前3位的分別是斯坦利沙門菌(13.11%)、德比沙門菌(11.48%)、鼠傷寒沙門菌(9.84%)。

2.2藥敏試驗結果 見表1。61株沙門菌對14種抗菌藥物呈不同程度耐藥，對復方磺胺甲噁唑、哌拉西林、替卡西林、替卡西林/克拉維酸、阿莫西林耐藥率較高，分別為27.9%、24.6%、24.6%、24.6%、23.0%，其余抗菌藥物的耐藥率較低,其中頭孢噻肟、頭孢他啶、頭孢吡肟、美羅培南及亞胺培南表現為全部敏感。

表1 坪山區食品衛生從業人員沙門菌帶菌者藥敏試驗結果[n(%)，n=61]

3 討 論

沙門菌廣泛存在于人、動物和環境中，是人群中重要的腸道傳染病原，可引起人類傷寒、食物中毒、胃腸炎及敗血癥[3]。全球每年約有1.6×107例沙門菌感染病例，其中有60萬例死亡[4]。我國由沙門菌引起的食物中毒也已居首位[5-6]。對有關從業人員進行沙門菌檢查，及時檢出并治療是預防沙門菌暴發傳播的重要手段[7-9]。目前，坪山區從業人員數量龐大，本研究數據顯示,坪山區4 620例從業人員中攜帶沙門菌人員為61例， 61株沙門菌血清型中B群血清型分布最多，共有31株(50.82%)，這與馬妮等[10]研究結果相符合。61株沙門菌分屬5個群，14個血清型，排名前3的分別是斯坦利沙門菌、德比沙門菌及鼠傷寒沙門菌,由于試劑的局限性，有14株未能鑒定型別，也有可能是新型菌株，對于基因型分析研究可能會有價值。

61株沙門菌藥敏試驗分析結果顯示，耐藥率較高的前5名分別是復方磺胺甲噁唑、哌拉西林、替卡西林、替卡西林/克拉維酸及阿莫西林，而頭孢噻肟、頭孢他啶、頭孢吡肟、美羅培南及亞胺培南表現為全部敏感，提示臨床治療應首選頭孢類藥物，這與何廣概等[11]研究相似。根據坪山區從業人員沙門菌帶菌者藥敏試驗結果可以看出，抗菌譜較窄的青霉素類藥物耐藥性較強，推測可能是因為此類藥物價格低廉，容易購買，人群使用比較普遍，導致抗菌藥物的濫用，從而引起細菌耐藥性改變。近年來有研究報道顯示，耐環丙沙星的沙門菌感染病例逐漸增多，然而目前臨床上常根據經驗采用第3代頭孢類及喹諾酮類藥物進行治療[12-13]。本研究結果顯示，有2例菌株耐環丙沙星，4例菌株中介。因此，細菌藥敏試驗檢測結果能夠正確指導臨床用藥，為避免抗菌藥物濫用和預防耐藥菌株發生提供理論依據。

沙門菌感染人群通常可以自愈，但是感染沙門菌后，有2%～5%的患者糞便排菌時間較長，可能會威脅他人的健康[14]。本研究發現1例乙型副傷寒沙門菌，屬于乙類傳染病。2013年本院接收了由攜帶甲型副傷寒沙門菌的流動食品商販傳播導致的十余例住院患者，在坪山區產生嚴重的不良影響。因此，對有關從業人員進行健康體檢是衛生管理的一個重要環節，加強該環節的監測，及時發現沙門菌攜帶者并給予治療，能有效避免攜帶沙門菌的從業人員傳播感染性疾病。特別是市場上長期存在的一些流動食品商販、夜宵攤點，此類非正規食品營業工作人員沒有參加體檢，有關部門應高度重視，讓從業人員認識沙門菌的危害，并積極參加體檢以取得從業資格證，從而預防沙門菌傳播引起的感染性疾病。

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