冠狀動脈粥樣硬化患者血脂及修飾化脂蛋白水平研究*

羅 薇,郭 英,都向陽,丁 霏,李小玲,賀 勇,聶 鑫,宋昊嵐,李貴星

(四川大學華西醫院實驗醫學科，成都 610041)

急性心肌梗死(AMI)是指心肌缺血導致的心肌細胞缺氧壞死而引起的急重癥，是大多數國家人口死亡的主要原因之一，冠狀動脈粥樣硬化(AS)是AMI發生的主要病理基礎[1-2]。傳統研究認為，引發AS的危險因素有高脂血癥、高血壓、吸煙、糖尿病、肥胖和缺乏體力活動等[3]。近年來有研究表明，修飾化脂蛋白與AS的形成密切相關[4-5]。本研究分析AS患者血脂及修飾化脂蛋白水平，比較其與對照組之間的差異，探究血脂及修飾化脂蛋白與AS發生的關系，現報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料

1.1.1病例組 納入2016年9-12月因AMI就診于四川大學華西醫院急診科、最終診斷為冠狀動脈粥樣硬化性心臟病的220例患者作為病例組，其中男142例，女78例；年齡54～73歲，平均(56.35±2.35)歲。納入標準：患者為首次發作，影像學檢查提示冠狀動脈粥樣斑塊，符合2015歐洲心臟病學年會急性冠狀動脈綜合征診斷標準，最終均行冠狀動脈造影確診為AMI[6]。排除標準：既往有陳舊性AMI、糖尿病、高血壓病史的患者；嚴重肝腎疾病或惡性腫瘤患者；病歷資料不全及不愿意提供基礎信息的患者。

1.1.2對照組 納入同期四川大學華西醫院體檢中心健康體檢者200例作為對照組，其中男130例，女70例；年齡51～64歲，平均(51.28±1.72)歲。納入標準：無冠心病、高血壓、糖尿病、慢性阻塞性肺疾病、周圍血管疾病、高脂血癥、嚴重肝腎疾病病史；無心血管藥物服用史；心電圖和心臟彩超顯示心臟功能正常。

1.2生化指標測定 采集所有研究對象空腹外周靜脈血5 mL，顛倒混勻后取全血檢測患者糖化血紅蛋白(HbA1c)，以3 000 r/min、離心10 min，取上清液檢測空腹血糖(FBG)、三酰甘油(TG)、膽固醇(TC)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)。所有指標均采用德國ROCHE公司Cobas 8000全自動生化分析儀及其配套試劑及校準品進行測定。所有標本檢測均于華西醫院實驗醫學科完成，符合試驗項目標準化程序和美國病理家協會認可要求。檢測完成后，將剩余血清標本分別用EP管分裝置于-20 ℃冰柜冷凍保存備用。

1.3修飾化脂蛋白及脂蛋白相關磷脂酶A2( Lp-PLA2)測定 修飾化脂蛋白及Lp-PLA2檢測均采用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)，將-20 ℃保存的研究對象血清復溫，離心后取上層血清進行測定。氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)、氧化高密度脂蛋白(ox-HDL)測定采用美國CELL BIOLABS公司提供的ELISA Kit試劑及其配套標準品。糖化低密度脂蛋白(gly-LDL)、糖化高密度脂蛋白(gly-HDL)測定采用美國TSZ公司提供的Human gly-HDL/LDL ELISA Kit試劑及其配套標準品。Lp-PLA2測定采用美國R&D Systems公司提供的Human PLA2G7/PAF-AH/Lp-PLA2 Immunoassay試劑及其配套標準品。

1.4統計學處理 采用SPSS20.0軟件進行數據分析處理，正態性檢驗采用Kolmogorov-smirnov分析，所有指標均為非正態分布資料，故采用M(P25,P75)表示，組間比較采用秩和檢驗；計數資料組間比較采用χ2檢驗。以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1病例組與對照組修飾化脂蛋白與Lp-PLA2水平比較 見圖1、表1。病例組ox-LDL、ox-HDL、gly-LDL、gly-HDL及Lp-PLA2水平明顯高于對照組，差異均有統計學意義(P<0.05)，見表1、圖1。

2.2病例組與對照組血糖及血脂水平比較 見表2。由表2可見，病例組FBG和HbA1c高于對照組，而TC、HDL-C、LDL-C低于對照組,差異均有統計學意義(P<0.05)，兩組間TG差異無統計學意義(P>0.05)。

圖1 病例組與對照組ox-LDL、gly-LDL、ox-HDL、gly-HDL、Lp-PLA2水平比較

組別n ox-LDL(μg/mL)ox-HDL(μg/mL)gly-LDL(ng/mL)gly-HDL(ng/mL) Lp-PLA2(ng/mL)病例組22016.92(14.96,20.60)76.19(71.90,78.86)30.08(25.04,40.17)6.26(4.95,7.50)8.26(5.65,13.29)對照組20011.58(10.73,12.72)57.92(43.40,67.86)22.95(18.14,27.06)3.61(2.66,5.15)5.42(4.63,6.44)P<0.05<0.05 <0.05 <0.05 <0.05

表2 病例組與對照組血糖及血脂水平比較[M(P25,P75)]

3 討 論

AS是指動脈內膜的脂質和血液成分的沉積，平滑肌細胞及膠原纖維增生，同時伴有壞死及鈣化等不同程度病變的一類慢性進行性病理過程[7]。AS所致AMI是由于冠狀動脈血管腔狹窄、閉塞引起心肌供血不足，導致心肌缺血缺氧性壞死，具有高復發率、高致殘率、高病死率等特點，嚴重威脅中老年患者身心健康[8]。有關AS的形成機制尚不完全清楚，傳統觀點認為，高脂血癥特別是高LDL是動脈粥樣硬化發生的主要危險因素[9]。但有研究顯示，血脂水平與AS的關系并不密切[10-11]。2015年《美國居民膳食指南》去除了對居民TC攝入量的限制，膳食指南咨詢委員會認為人體攝入TC量無須顧慮，建議控制糖攝入[12]。

正常情況下，LDL可與LDL受體結合，通過LDL受體途徑進入細胞，當細胞TC水平過高時可通過下調LDL受體表達量減少LDL的攝入；另一方面可通過抑制羥甲基戊二酰輔酶A還原酶活性減少細胞內TC的合成，從而維持TC水平的穩定。HDL可將過量的TC從外周組織轉運到肝臟進行清除，同時HDL還有抗炎、抗氧化功能，從而起到AS的作用。但LDL、HDL發生糖化或氧化修飾后，由于其結構改變，無法與正常受體結合。國外研究顯示，修飾化的LDL、HDL只能通過清道夫受體攝入細胞，而通過清道夫受體攝入的脂質不能下調清道夫受體的表達。因此，修飾化的脂蛋白通過清道夫受體不斷攝入細胞，引起TC不斷堆積，最終引起細胞泡沫化，導致AS形成[13-14]。

Lp-PLA2又稱血小板活化因子乙酰水解酶，是由成熟的巨噬細胞和淋巴細胞合成分泌的一種炎性標志物，能催化LDL中氧化磷脂水解釋放出溶血卵磷脂和氧化型游離脂肪酸，生成的炎癥因子吸引更多單核粒細胞聚集到病變部位形成巨噬細胞，進而吞噬修飾化脂蛋白形成更多的泡沫細胞，導致AS形成[15-17]。有研究顯示，Lp-PLA2表達水平與動脈粥樣硬化斑塊穩定性及嚴重程度相關，且Lp-PLA2水平越高，斑塊穩定性越差[18]。

本研究結果顯示，病例組患者血脂水平與對照組比較無明顯升高，TC、HDL-C、LDL-C水平低于對照組，但修飾化脂蛋白(ox-HDL、ox-LDL、gly-HDL、gly-LDL)及Lp-PLA2水平均明顯高于對照組。表明常規降脂治療可有效降低患者的血脂水平，AS患者并不存在高脂血癥，但是修飾化脂蛋白水平明顯高于對照組。因此，高水平的修飾化脂蛋白是促進AS發生和發展的重要因素，常規降脂治療并不能明顯延緩AS的發生和發展，在降脂治療的同時更應控制修飾化脂蛋白形成。

值得注意的是，本研究結果顯示，病例組FBG水平明顯高于對照組，高血糖可通過對脂蛋白進行糖化形成糖基化終末產物，進而形成修飾化脂蛋白而促進泡沫細胞形成[14]。糖基化終末產物還可以趨化和活化單核巨噬細胞，并最終引發AS產生[19]。近年來，高血糖在AS發生中的作用受到越來越多的重視[10-11]。

綜上所述，血脂水平并不是AS發生和發展的主要因素，而修飾化脂蛋白水平與AS的發生和發展密切相關。應進一步研究修飾化脂蛋白的形成機制及其途徑，從而在降脂治療的同時控制脂蛋白糖化和氧化，減少修飾化脂蛋白形成，這對延緩AS的發生和發展，減少動脈粥樣硬化性心臟病的發生具有重要意義。

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