絲瓜種質苗期對霜霉病的抗性鑒定

陳 銑

（福州市蔬菜科學研究所，福建 福州 350111）

絲瓜（Luffa cylindrica）為葫蘆科絲瓜屬1年生草本植物，絲瓜根據棱角有無分為有棱絲瓜和普通絲瓜2個栽培種，有棱絲瓜易感霜霉病，而普通絲瓜高抗霜霉病。絲瓜霜霉病（Downy Mildew）主要危害葉片，發病初期在葉片正面出現不規則的黃色斑，逐漸擴展成多角形黃褐色病斑，濕度大時病斑背面長出灰黑色霉層，后期病斑連片，整葉枯死[1]。福建省在濕度大、光照少的春雨季、霉雨季及臺風大雨多發時，有棱絲瓜霜霉病發生普遍，造成產量和品質顯著下降，給生產帶來重大損失。防治霜霉病最根本、最經濟有效的方法是培育和利用抗病品種，而絲瓜抗霜霉病材料的鑒定是選擇抗病親本的重要環節。在絲瓜霜霉病研究方面，前人對絲瓜霜霉病的發生原因、發生規律及藥劑防治方面進行了較多研究[1-12]；有些學者研究了絲瓜對霜霉病抗性的影響因子[13-15]；謝大森等[16]對絲瓜霜霉病菌人工接種技術進行了研究；謝文華等[17]分析了棱角絲瓜對霜霉病的抗性遺傳。有關絲瓜種質對霜霉病抗性的鑒定評價方面尚未見報道。試驗旨在通過對絲瓜不同品種材料苗期霜霉病抗性進行鑒定，明確各品種材料的抗病情況，選出高抗的品種材料，為生產用種和育種親本的選擇提供依據。

1 材料和方法

1.1 試驗材料

供試材料為福州市蔬菜科學研究所絲瓜課題組歷年從各地引進的72份絲瓜品種材料，其來源分別為：廣東32份，廣西13份，福建9份，河北7份，湖南3份，臺灣、江西、江蘇、山東等省各2份。其中常規品種材料是經過6代自交純化的自交系，具體見表1。

1.2 試驗方法

1.2.1 鑒定材料準備

供試的絲瓜種子用5%次氯酸鈉溶液消毒10 min后，用清水洗凈，放入墊有2層濾紙的培養皿中，置于30 ℃恒溫培養箱中保濕催芽，待胚根長約0.5 cm時將其播種于育苗杯里，播種基質為消毒過的蛭石草炭營養土（3∶1），每杯1粒，每品種重復3次，每重復10株苗。

1.2.2 抗病性接種鑒定方法

絲瓜苗期對霜霉病的抗性鑒定采用人工噴霧接種法[16,18]。

接種液的制備：從田間采集自然發病的早期病葉，用無菌水沖洗干凈，于25 ℃下保濕培養16 h。取出病葉，用毛筆刷取葉背面新生的孢子囊，置于盛有無菌水的燒杯中，攪拌均勻后用血球計數板記錄孢子囊數。接種濃度為5×106個孢子囊／mL。

接種方法：采用噴霧接種法，于2～3片真葉期將配好的新鮮菌液均勻充分噴射在葉片正反面，接種后于25 ℃下黑暗保濕16 h，后將植株置于白天25 ℃左右、夜晚20℃左右的溫室中正常管理。

病情調查與分級標準：于接種后10 d調查發病情況，記錄病級，分極標準為：0 級：無病癥；1級：葉片出現輕微壞死斑，直徑小于0.5 cm；3 級：壞死斑明顯，直徑0.5～1.0 cm；5級：壞死斑面積占葉片面積的1/3以下；7 級：壞死斑面積占葉片面積的1/3～2/3；9 級：壞死斑面積占葉片面積的2/3以上。病情指數計算公式：

病情指數DI=∑（相應發病級別的株數×發病級別）/（調查總株數×9）×100%。

種質群體對霜霉病的抗性依苗期病情指數分5級，分別為：高抗（HR）：DI＜10；抗病（R）：10≤DI＜30；中抗（MR）：30≤D I＜50；感病（S）：50≤D I＜70；高感（HS）：DI≥70。

2 結果與分析

由表2可知：供試材料的病情指數在3.3～72.7，其中高抗、抗及中抗的病情指數分別為3.3～9.3、11.2～29.4、30.3～44.5。高抗、抗病、中抗、感病和高感的品種材料分別有12、21、22、14、3份，分別占試驗品種總數的16.7%、29.2%、30.5%、19.4%、4.2%，沒有發現對霜霉病免疫的材料。在供試品種中，中抗品種占比最高，高感品種占比最低。高感霜霉病的3個品種材料為茅崗、豐棱一號和武平角瓜，高抗霜霉病的12個品種材料分別為3號棱角、春豐、春綠、翠秀花點、綠勝二號、美的大肉花點、春綠夏棠、匯豐大肉、翠綠、六葉香棱、綠冠和碧麗喜。從植株的生長情況看，高感霜霉病的這3個品種葉片病斑連接成片，葉片枯死；高抗霜霉病的12個品種材料葉片上零星分布1～2個黃色小斑點，且噴霧接種后正常長出了新葉，新葉上沒有出現病斑，植株生長良好。病情指數低的品種葉片上病斑較少，且擴展速度慢，危害較輕。不同發病程度的品種之間植株生長勢差別明顯，試驗表明了不同絲瓜品種對霜霉病抗性存在著巨大差異。高抗霜霉病的12份品種材料可進一步進行全生育期的抗性評價以及重要農藝性狀的綜合鑒定，對于農藝性狀優良的品種直接在生產上應用推廣或作為抗病材料加以運用。

表1 品種及來源

另外，廣東省32份品種中，高抗品種6份、抗病品種9份、中抗品種11份、感病品種5份、高感品種1份。廣西壯族自治區13份品種中，高抗品種2份、抗病品種4份、中抗品種4份、感病品種2份、高感品種1份。福建省9份品種中，高抗品種1份、抗病品種2份、中抗品種2份、感病品種3份、高感品種1份。其他各省（除江蘇省、臺灣省、江西省）均有抗病及感病品種，品種的來源地與抗病性沒有明顯的相關性。

表2 抗病性鑒定結果

3 結論與討論

3.1 結論

霜霉病是絲瓜主要病害之一，絲瓜霜霉病菌在溫濕度適宜時產生孢子囊，經氣流、雨水等途徑傳播并侵染發病。72份供試材料中沒有對霜霉病免疫的材料，供試材料的病情指數在3.3～72.7，高抗、抗病、中抗、感病和高感的品種材料分別有12份、21份、22份、14份和3份,分別占試驗品種總數的16.7%、29.2%、30.5%、19.4%和4.2%；其中高抗品種分別為3號棱角、春豐、春綠、翠秀花點、綠勝二號、美的大肉花點、春綠夏棠、匯豐大肉、翠綠、六葉香棱、綠冠和碧麗喜。試驗在相同的環境條件下，有病情指數為3.3的高抗病品種、病情指數高達72.7的高感病品種以及在這兩者之間不同感病程度的品種，說明不同絲瓜品種對霜霉病的抗性是有巨大差異的，這種差異初步認為是由遺傳基因的差異引起的，因而，明確絲瓜霜霉病的遺傳規律，通過選擇抗病材料作親本進行雜交育種，有望選育出商品性狀符合育種目標，又能高抗霜霉病的新品種。

3.2 討論

絲瓜霜霉病的人工接種技術有子葉注射法和苗期噴霧接種法，兩種方法都能較好地鑒別品種的抗性[16]。子葉注射法能比較好地控制接種體的分布，但較費時、費力，對子葉注射的技術要求高，而苗期噴霧接種法簡單、方便、快速, 病菌分布均勻, 更適宜大批量接種。由于試驗材料多，樣本大，因此采用苗期噴霧接種法。供試材料于2017年春季種植田間進行抗性及農藝性狀評價，在整個生長期治蟲不治病的栽培條件下，供試材料的田間霜霉病發生情況與本次試驗結果基本一致，因此絲瓜苗期人工噴霧接種對霜霉病抗性進行早期鑒定是有效的。

絲瓜中普通絲瓜栽培種對霜霉病是高抗的，普通絲瓜與有棱絲瓜的雜交親和力強，其雜交種在生產上廣泛應用。有棱絲瓜與普通絲瓜的雜交種生長旺盛，抗病性強，由于果實具有苦味，目前作為其他瓜類蔬菜如甜瓜、苦瓜的砧木使用。通過有棱絲瓜與普通絲瓜雜交，經多代回交轉育和定向選擇，選育去除苦味的優良抗源材料也是一個新的研究方向。