自體CIK細胞聯合化療治療老年急性髓細胞白血病的臨床研究

劉金榮，韓宗政，熊　勤，趙　杰，李　苗,姚　芬

(湖北省漢川市人民醫院,湖北 漢川 431600)

白血病發病原因為機體造血干細胞功能異常，細胞無法完全成熟導致細胞發育停滯[1]。隨著我國老齡化趨勢日益加劇，白血病在老年人群中的患病率激增，絕大部分患者為急性白血病，老年人群自身各器官功能減弱，免疫力降低，使得發生急性白血病后病死率較高。如何有效延緩病情進展、降低老年急性白血病病死率成為目前學術界研究的重點[2]。本研究采用自體CIK細胞聯合化療治療老年急性髓細胞白血病患者取得了滿意的臨床效果，現報道如下。

1　臨床資料

1.1一般資料選取我院2014年1月—2016年12月收治的12例老年急性髓細胞白血病患者，均符合白血病的臨床診斷標準[3]，年齡61～85歲，患者或監護人簽署知情同意書，排除年齡低于60歲者，嚴重肝腎臟器疾病者，對本研究使用藥物過敏者及伴其他影響本次研究結果因素者。隨機將患者分為2組：觀察組6例，男4例，女2例；年齡61～85(68.19±7.93)歲；病理分期M4期2例，M5期2例，M6期2例；基礎疾病為高血壓1例，糖尿病2例，其他慢性疾病3例。對照組6例，男3例，女3例；年齡62～84(68.55±8.58)歲；病理分期M4期1例，M5期3例，M6期2例；基礎疾病為高血壓2例，糖尿病1例，其他慢性疾病3例。2組性別、年齡、病理分期及基礎疾病情況比較差異均無統計學意義(P均>0.05)，具有可比性。

1.2治療方法對照組給予常規化療：米托蒽醌6 mg/(m2·d)靜滴，第1—3天：阿糖胞苷100～150 mg/(m2·d)靜滴，第1—5天。每療程間隔2～3周。完全緩解后用原方案鞏固2個療程。觀察組在常規化療基礎上給予自體CIK細胞回輸。由取得專業CIK質控資格的技術工作人員制備自體CIK細胞，然后采集患者入組時清晨空腹靜脈血60 mL, 嚴格按照操作規范在無菌條件下分離單個核細胞，調整細胞濃度至 4×106mL-1， 加入重組人γ-干擾素(rhIFN-γ)2 000 IU/mL，置于37 ℃，CO25%無血清培養基中懸浮培養，第2天在培養基中添加anti-CD3McAb 50 ng/mL和注射用重組人白細胞介素-2(rhIL-2，江蘇金絲利藥業有限公司生產，國藥準字S10970054)1 000 IU/mL， 分別于第4，7，10，13天添加rhIL-2以調節細胞密度。當CD8+細胞比例>40%、CD3+細胞比例>70%、CD3+CD56+細胞比例>30%時定義為CIK細胞表型成熟[4]。然后每次給予CIK細胞(2～4)×109個回輸，2次/d，回輸結束給予rhIL-2，2 mIU/d, 10 d為1個療程，共3個療程。

1.3觀察指標統計2組患者治療前后外周血中CD3+、CD8+及CD3+CD56+水平變化情況、出現感染次數及持續時間、臨床輸血量。

1.4統計學方法采用SPSS 20.0軟件包進行數據處理。計數資料比較采用2檢驗；計量資料采用表示，組間比較采用t檢驗。P<0.05為差異有統計學意義。

2　結　　果

2.12組治療前后免疫細胞指標比較治療前2組外周血CD3+、CD8+及CD3+CD56+水平比較差異無統計學意義(P均>0.05)；治療后觀察組上述指標顯著增高(P均<0.05)而對照組顯著降低(P均<0.05)，且觀察組顯著高于對照組(P均<0.05)。見表1。

2.22組治療前后感染控制情況比較治療前2組感染次數及持續時間比較差異無統計學意義(P均>0.05)；治療后觀察組感染次數顯著少于治療前及對照組(P均<0.05)，持續時間明顯短于治療前及對照組(P均<0.05)，而對照組感染次數及持續時間均無明顯變化(P均>0.05)。見表2。

表1　2組治療前后免疫細胞指標比較

注：①與治療前比較，P<0.05;②與對照組比較，P<0.05。

表2　2組治療前后感染控制情況比較

注：①與治療前比較，P<0.05;②與對照組比較，P<0.05。

2.32組治療前后輸血量比較治療前2組輸血量比較差異無統計學意義(P>0.05)；治療后觀察組輸血量顯著減少(P<0.05)，對照組無明顯變化(P>0.05)。見表3。

表3　2組治療前后輸血量變化情況比較

注：①與治療前比較，P<0.05;②與對照組比較，P<0.05。

3　討　　論

急性髓細胞白血病患者由于機體造血系統異常而發病，老年患者由于機體器官功能及免疫力降低，發病率要高于低齡人群[5]。而老年人群普遍合并多種慢性基礎疾病，故發病后病情進展快速[6]。針對急性髓細胞白血病的臨床治療主要以常規化療為主，但老年患者由于機體器官功能及免疫力較弱，化療后易反復感染，且感染持續時間長，導致疾病復發率較高，治療效果不佳，病死率增高[7]。

為了提高老年急性髓細胞白血病患者的化療耐受性，提高治療效果，改善機體內環境，減少復發與死亡，醫學工作者開始使用自體CIK細胞回輸聯合化療治療[8]。

CIK細胞臨床特點為細胞增殖速度快，抗腫瘤活性細胞通過高速增殖，可改善機體免疫活性[9]；細胞具有識別腫瘤的機制，對正常的細胞無毒性作用；屬于自體活化細胞，進入體內無排異性[11]。由于CIK細胞同時表達CD3+和CD56+2種膜蛋白分子，故該細胞即具備T淋巴細胞強大的抗瘤活性，又具備NK細胞的非MHC限制性殺瘤優點，臨床又將CIK細胞叫做NK細胞樣T淋巴細胞[11]。CIK細胞免疫療法屬于腫瘤治療技術的新研究方向，該技術采集患者體內少量外周血，通過無菌實驗室內誘導、培養免疫細胞，之后回輸給患者，可刺激、激活機體免疫活性，有效拮抗腫瘤細胞生成與正常細胞癌變[12]。CIK細胞溶瘤效果屬于非MHC限制性，腫瘤組織類型對其治療作用無影響，具有廣譜抗腫瘤效果，特別是對高抗原表達的癌癥作用更好，如髓性白血病[13]。

本研究結果顯示，治療后觀察組患者感染次數明顯減少，感染持續時間明顯縮短，外周血CD3+、CD8+及CD3+CD56+水平較治療前顯著增高，輸血量較治療前顯著減少；而對照組外周血指標均降低，其余指標無明顯變化。說明CIK細胞回輸后患者機體中免疫功能細胞顯著增多，機體免疫功能增強，從而提高了機體抗感染能力，減少了感染頻次，縮短了感染持續時間，輸血量也顯著減少，與文獻[14]報道相符，提示自體CIK細胞回輸聯合常規化療有助于改善患者機體細胞免疫功能，降低感染率，臨床應用前景廣闊。