規模化豬場流行性腹瀉防控案例分析

包銀莉，李高凱，余世勇，胡 彬

（四川海林格生物制藥有限公司，四川 成都 610030）

摘 要：豬流行性腹瀉是由豬流行性腹瀉病毒（Porcine Epidemic Diarrhea Virus， PEDV)引起的急性、高度接觸性傳染病。其毒株的高度變異性給該病的防控帶來了難度。福建某規模化養豬場發生腹瀉疫情，通過膠體金檢測確診為豬流行性腹瀉病毒感染。疫病初期通過返飼與疫苗肌肉注射等方式進行防控，疫情未得到有效控制。為快速控制疫情，結合豬流行性腹瀉病毒的發病與排毒規律，從“降低排毒、激發黏膜免疫、構筑免疫屏障、切斷傳染源、加強飼養管理”等角度，提出“三打兩噴+仔豬噴鼻”的疫情防控方案，方案執行1周，腹瀉疫情得到有效控制，發病率由90%以上降低到8.60%。同時，該方案在四川地區24個規模豬場得到了有效的驗證。

關鍵詞：豬流行性腹瀉；防控；案例分析

豬流行性腹瀉是由豬流行性腹瀉病毒（Porcine Epidemic Diarrhea Virus， PEDV)引起的急性、高度接觸性傳染病，臨床上主要以嚴重的腸炎、嘔吐、水樣腹瀉以及脫水為特征，感染仔豬死亡率極高。其發病時間急、仔豬死亡率高，主要感染豬小腸上皮細胞，引起腸絨毛脫落，造成新生仔豬迅速脫水死亡。自2010年暴發以來，豬流行性腹瀉給我國養豬業造成了巨大的經濟損失。

豬流行性腹瀉病毒分子流行病學調查顯示，近年來其流行毒株S基因出現了較大變異，與傳統疫苗毒株相比同源性僅90%左右。大量涌現的變異株給豬流行性腹瀉的防控工作帶來了難度。同時，隨著對PEDV致病機理研究的深入，大量的文獻指出與傳統的可通過體液免疫防控的病毒不同，PEDV防控更多的需要黏膜免疫系統的參與。這些防控的難點使PEDV在日常生產中的防控效果并不理想，同時也使如何有效防控豬流行性腹瀉已經成為了行業的難題。病料返飼、直接將感染仔豬敲死、甚至于飼喂避孕藥延后生產等方式并不能徹底的解決豬流行性腹瀉。在發病豬場環境中排毒量巨大、肌肉注射疫苗接種豬群免疫保護力有限的條件下，唯有“降低排毒、激發黏膜免疫、構筑免疫屏障、切斷傳染源、加強飼養管理”等綜合防控方案才能迅速控制疫情。

1 流行病學調查

福建某規模豬場，生產母豬500頭左右。2017年11月底開始出現腹瀉癥狀，主要發生于后備新生仔豬。豬場采用“活苗+死苗+死苗”的免疫方案，于2017年9月份開始普免二聯活苗，10月份開始注射滅活苗。在計劃進行第三針免疫的時候，2017年11月底豬場突然暴發大面積的腹瀉病情，26頭后備母豬陸續出現腹瀉，新生仔豬死亡率高達70%。隨后豬場在2017年12月—2018年3月期間嘗試了3種緊急防控方案對腹瀉病情進行控制，但都收效甚微。

第1種：全場一刀切二聯活疫苗一次，之后母豬產前15 d免疫1次，出生仔豬肌注0.5頭份，結果：小豬出生3～5 d開始大面積發生腹瀉，死亡率仍然高達70%。之后，豬場采用“全場一刀切變異毒株滅活疫苗1次，產前45 d母豬注射1次，20 d注射一次”的第2套方案，結果發病率70%，死亡率80%。于是，豬場自制了一批自家苗，全群母豬一刀切免疫1次，后續跟胎使用產前25 d注射一次，10 d注射1次。結果在接種自家苗后豬場腹瀉情況有所好轉，發病率降至20%～30%之間，死亡率30%。但是至今年3月6日豬場腹瀉病情再次反彈，新生仔豬死亡率超過60%。

3 月中旬公司技術團隊進駐該場，協助該場進行腹瀉病情的防控。

2 臨床癥狀及剖檢變化

圖1 腹瀉仔豬剖檢圖

該場發病仔豬表現為水樣腹瀉、嘔吐、體溫略升高、精神沉郁。發病初期主要以4～6日齡仔豬為主，也有9～14日齡仔豬，傳播迅速，數日內蔓延到全群。隨病程發展，豬出現消瘦、脫水以及大量哺乳仔豬死亡。雖然該場的飼養員通過補液的方式挽回了一些仔豬，但60%左右的仔豬最終死亡。

剖檢死亡小豬可見小腸腸管擴張，腸壁變薄缺乏彈性，切開腸壁可見內容物稀薄呈黃色泡沫狀，腸黏膜絨毛嚴重萎縮。切開胃壁可見黃色內容物及乳白色凝塊，胃底黏膜充血（圖 1）。

圖2 膠體金快速檢測結果圖

3 膠體金快速診斷

現場采集腹瀉仔豬糞便，用安捷公司PEDV 膠體金檢測試劑盒和TGEV膠體金檢測試劑盒進行快速檢測，結果顯示PEDV抗原陽性，TGEV抗原陰性（圖2），確診為由PEDV感染導致的腹瀉疫情。

4 防控方案

在確定了病原體后，采取了“三打兩噴+仔豬噴鼻”的疫苗控制措施進行腹瀉病情的防控。具體操作如下。

4.1 產前9～14 d的母豬防控方案

方案開始當天，對24頭母豬進行肌肉注射1次，4 mL/頭；2 d后，再次肌肉注射1次，4 mL/頭，同時保定噴鼻1次，4 mL/頭，每個鼻孔各2 mL；3 d后，再次進行再次肌肉注射一次和保定噴鼻，劑量同前。

4.2 所產仔豬防控方案

后備母豬生產仔豬共滴鼻6次，出生滴鼻1 mL/頭仔豬，0.5 mL/鼻孔。間隔8 h再滴鼻1次，1 mL/頭仔豬，0.5 mL/鼻孔，連續操作3 d。

老母豬生產仔豬共滴鼻4次，出生滴鼻1 mL/頭仔豬，0.5 mL/鼻孔。間隔8 h再滴鼻一次，1 mL/頭仔豬，0.5 mL/鼻孔，連續操作2 d。

5 效果

該方案中一共生產23窩仔豬，總頭數221頭（不包括1頭母豬出現難產子宮脫落生產2頭的）。經上述防控方案后，僅有兩窩19頭仔豬出現輕微拉稀癥狀，糞便呈現糊狀，發病率為8.60%。對這19頭仔豬口服給藥后快速恢復。

從出生到斷奶階段，總共死亡14頭，死亡率6.33%，遠遠低于使用”三打兩噴+仔豬噴鼻“方案之前的70%的死亡率。且14頭仔豬死亡原因均由其他因素導致，非腹瀉問題。

6 討論

在這個案例中，腹瀉發生之時，豬場先后采用了3套方法來防控豬流行性腹瀉病毒導致的腹瀉病情。先期的活疫苗肌注免疫、中期的滅活疫苗肌注免疫，均沒有獲得比較好的防控效果；后期的返飼操作，雖獲得了一定的防控效果，但是之后又出現豬場腹瀉病情反復的情況。返飼是一把雙刃劍，其對專業要求較高。返飼病料必須經過專業化檢測，明確是否存在其他疫病，病毒含量是否足夠（膠體金檢測即可），以實現防控的效果，但同時返飼也是豬場的潛在的風險因素，返飼后所有動物都在排毒，環境中的病毒含量極高，如果此時環境中的返飼病毒進入產房，仔豬則完全無力抵抗。

大量的研究表明，PED的防控主要依賴機體黏膜免疫系統產生的特異性sIgA。本案例中采用的“三打兩噴+仔豬噴鼻”方案中的“兩噴”操作，可以有效的激發動物機體的黏膜免疫系統，促使母豬的乳腺黏膜產生特異性SlgA。該類型抗體隨乳汁進入到仔豬的腸道而不被吸收，停留在腸道表面直接中和外來病毒。同時，“仔豬噴鼻”的操作也在一定程度上誘導仔豬的黏膜免疫系統發揮作用。這是該方案獲得較好防控效果的原因之一。

其次，肌肉注射可以誘導系統免疫，通過細胞免疫和ADCC作用高效抑制病毒的復制，從而降低病毒在腸道的復制，顯著降低病毒的排出。在日常采用PED 膠體金對腹瀉仔豬進行病原鑒定的時候，我們常常發現對于由PEDV引發腹瀉的仔豬而言，用棉簽蘸取少量糞便稀釋成1 mL 進行檢測，試紙條即可顯示明顯的陽性條帶。PED 膠體金試紙條的檢測敏感性通常為105.5TCID50，這就說明每克糞便中病毒含量高于106.5TCID50。由此可見在發病豬場環境中病毒含量是非常高的。而目前我國常用腹瀉疫苗效力評價標準為：疫苗免疫無PED 抗體的母豬或仔豬，免疫后對仔豬進行攻毒保護試驗，以103個MID 的組織毒攻擊（導致無PEDV 抗體仔豬發病的最低感染劑量為10-7稀釋，即選用10-4稀釋構建效檢攻毒模型），對照組4/5 以上發病，免疫組4/5 以上保護，即判定該疫苗有效。實驗室替代檢驗方案為：免疫豬群的中和抗體高于1∶32 即判定為有效。因此，只有多次肌肉注射優質的疫苗（三打），才可以不斷地提升機體的系統免疫，降低病毒的外排，保障后期免疫仔豬的效果。

為了進一步確定“三打兩噴”免疫方案的可行性，2017年至今，在川渝地區28個腹瀉疫情不同的豬場進行了驗證。結果顯示其中24個發病豬場效果明顯，死亡率從60%～90%降至10%以下，并最終完全達到康復。其中所有豬場均在7 d內控制住了疫情，平均控制時長為6.5 d，有效率高達92%。

由此可見，作為從“降低排毒、激發黏膜免疫、構筑免疫屏障、切斷傳染源、加強飼養管理”等防控思路出發設計的方案，“三打兩噴”的免疫方案雖然是一種新興的操作方式，但是其在防控豬流行性腹瀉方面有著非常顯著的效果。