5490例性病門(mén)診患者HPV檢測(cè)結(jié)果分析

于功奇 王真真 付希安 王 川 王 娜 劉 紅 張福仁

人乳頭瘤病毒(HPV)是一種小分子雙鏈DNA病毒，對(duì)人皮膚、黏膜有高度親嗜性。目前已發(fā)現(xiàn)該病毒有200余種亞型，根據(jù)不同基因型與癌發(fā)生危險(xiǎn)性的高低可分為高危型和低危型[1]，其中高危型HPV包括16、18、31、33、45、52、56、58型等，其持續(xù)性感染與子宮頸癌的發(fā)病及男性陰莖及肛周癌變密切相關(guān)；低危型HPV包括6、11型等，其感染與外生殖器尖銳濕疣等良性病變有關(guān)[1-3]。為了更好了解近年來(lái)山東地區(qū)HPV感染情況，本研究采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法對(duì)2012年8月至2016年8月來(lái)本院性病門(mén)診就診的患者進(jìn)行HPV(6,11型)及HR-HPV(8個(gè)型)檢測(cè)，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 標(biāo)本來(lái)源 選取2012年8月至2016年8月來(lái)山東省皮膚病醫(yī)院性病門(mén)診就診的5490例檢測(cè)HPV項(xiàng)目的患者。其中男3195例，女2295例。年齡1個(gè)月至92歲。

1.2 標(biāo)本采集 男性無(wú)菌棉拭子插入尿道2～3 cm輕輕捻動(dòng)拭子采集分泌物后取出立即置于采集管中，密閉送檢(采集分泌物前2小時(shí)禁小便)；女性用無(wú)菌生理鹽水棉球洗去宮頸外分泌物，再用無(wú)菌棉拭子插入宮頸內(nèi)，停5 s后旋動(dòng)棉拭子采集宮頸分泌物，將棉拭子置入無(wú)菌管中，密閉送檢。尖銳濕疣患者標(biāo)本的采集用無(wú)菌棉拭子刮取包皮、尿道口、大小陰唇、陰道口和肛周贅生物組織液，密閉送檢。

1.3 儀器與試劑 使用ABI7300基因擴(kuò)增儀；HPV(6,11型)核酸檢測(cè)試劑盒，HR-HPV(8個(gè)型)核酸檢測(cè)試劑盒(包含16、18、31、33、45、52、56、58型)。試劑盒與質(zhì)控品均為中山大學(xué)達(dá)安基因股份有限公司產(chǎn)品。

1.4 DNA提取及檢測(cè) 向無(wú)菌管中加入1 mL滅菌生理鹽水，渦旋震蕩，擠干棉拭子。將全部液體轉(zhuǎn)移到1.5 mL離心管中，13 800×g離心5 min，棄上清液，沉淀中加入50 μL DNA 提取液充分混勻，100℃恒溫10 min，13 800×g離心5 min。根據(jù)試劑盒要求吸取2 μL上清液作為模板加入反應(yīng)管中進(jìn)行PCR反應(yīng)。擴(kuò)增參數(shù)及結(jié)果判定嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 15.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，率的比較采用χ2檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 5490例性病門(mén)診就診患者中有高危型HPV和低危型HPV單一感染的，也有重疊感染的，其中HPV(6,11型)陽(yáng)性2016例，陽(yáng)性率為36.72%。女性患者陽(yáng)性753例(32.81%)，男性患者陽(yáng)性1263例(39.53%)；HR-HPV(8個(gè)型)陽(yáng)性1715例，陽(yáng)性率為31.24%，女性患者陽(yáng)性925例(40.31%)，男性患者陽(yáng)性790例(24.73%)；HPV(6,11型)+HR-HPV(8個(gè)型)陽(yáng)性768例，占13.99%，女性患者陽(yáng)性358例(15.6%)，男性患者陽(yáng)性410例(12.83%)。檢測(cè)結(jié)果顯示HPV(6,11型)陽(yáng)性患者中，男性發(fā)病率高于女性，兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，而HR-HPV(8個(gè)型)陽(yáng)性患者中，女性發(fā)病率高于男性，兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。5490例患者HPV(6,11型)、HR-HPV(8個(gè)型)感染情況見(jiàn)表1。

2.2 HPV感染的年齡分布及各年齡段的感染率 本研究中患者年齡主要集中在20～40歲，<20歲及>50歲的患者相對(duì)較少，各年齡段感染情況及構(gòu)成比見(jiàn)圖1、表2、表3。所有數(shù)據(jù)均采用SPSS15.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，經(jīng)分析得出，不同年齡段女性HPV(6,11型)及HPV(8個(gè)型) 的感染率均有顯著差異(P<0.05)，不同年齡段男性HPV(6,11型)及HPV(8個(gè)型) 的感染率均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

圖1 各年齡段HPV感染情況對(duì)比圖

表1 HPV-DNA檢測(cè)結(jié)果 例

表2 男性HPV感染患者年齡分布表

表3 女性HPV感染患者年齡分布表

3 討論

HPV能引起人體皮膚黏膜的鱗狀上皮增殖，臨床上可分為高危型HPV和低危型HPV，其中低危型HPV感染尤其是HPV6型和HPV11型與外生殖器尖銳濕疣等良性病變有關(guān)[4]；高危型HPV持續(xù)性感染與子宮頸癌的發(fā)病及男性陰莖及肛周癌變密切相關(guān)[2]。隨著社會(huì)發(fā)展人們性意識(shí)發(fā)生很大變化，初次性生活低齡化及多個(gè)性伴侶等不潔性行為的增加，加大了HPV的感染風(fēng)險(xiǎn)[5]。直接性接觸為HPV主要傳播途徑[3，6]，現(xiàn)已嚴(yán)重威脅人們的身心健康。流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，HPV感染的不同型別與地區(qū)及人口有差異[7，8]，調(diào)查不同地區(qū)的感染情況，具有十分重要的臨床價(jià)值。本文通過(guò)對(duì)2012年8月至2016年8月5490例來(lái)我院性病門(mén)診就診患者的泌尿生殖系統(tǒng)分泌物采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)對(duì)HPV(6,11型)和HPV(8個(gè)型) 的DNA進(jìn)行檢測(cè)，通過(guò)本次研究的結(jié)果分析，我們發(fā)現(xiàn)男性更易感染低危型HPV而女性更易感染高危型HPV。山東地區(qū)女性HPV(6,11型)和HPV(8個(gè)型)的感染率隨著年齡的變化均成“U”型分布，與既往國(guó)內(nèi)外報(bào)道結(jié)果相符[9，10]，感染率高峰出現(xiàn)在20歲以下及大于50歲，年輕女性感染率高發(fā)與性生活年齡的提前以及年輕女性宮頸免疫系統(tǒng)未被致敏有關(guān)。50歲后婦女進(jìn)入絕經(jīng)期后，生殖道免疫功能下降，清除病毒能力下降，導(dǎo)致高感染率[11]。而男性HPV(6,11型)和HPV(8個(gè)型)的感染率隨著年齡的變化無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。通過(guò)本次研究我們初步了解山東地區(qū)HPV感染情況，為今后臨床對(duì)HPV的預(yù)防監(jiān)控及治療提供了科學(xué)依據(jù)。