聯合檢測血清尿酸、β2微球蛋白和尿液輕鏈在多發性骨髓瘤早期診斷中的應用

羅敏琪 張宏斌 許玨 覃舒琪 董慧敏

中山大學附屬第三醫院檢驗科（廣州510630）

多發性骨髓瘤（multiple myeloma，MM）是常見的惡性漿細胞疾病，是骨髓中單一漿細胞株異常增生和惡性積累的一種腫瘤性疾病［1］，約占造血系統惡性腫瘤的15%左右，惡性腫瘤的1%［2］。本病好發于中老年人，男性多于女性，由于MM起病隱匿、緩慢，全身各個系統均可累及，臨床表現復雜，常出現的臨床癥狀有貧血、出血、反復感染、骨痛、腎功能不全以及相關免疫功能障礙等。由于癥狀不典型，導致許多病例在出現首發癥狀時不會疑診本病，極易出現漏診、誤診。據文獻報道，該病誤診率高達65.17%［3］。目前，骨髓涂片是MM診斷的重要依據，但由于MM患者的骨髓瘤細胞在骨髓中常呈灶性分布［4］，骨髓纖維化等因素也會對骨髓涂片取材造成干擾，加上骨髓涂片本身對患者也會造成損傷，臨床上進行骨髓穿刺的MM患者往往已處于疾病中晚期。因此，尋找用于MM早期輔助診斷的檢測指標非常重要。為有效降低MM的漏診率和誤診率，提高患者生存質量和生存率，我們通過回顧性分析96例患者在確診MM之前發病早期的血清尿酸（UA）、β2微球蛋白（β2?MG）和尿液κ、λ輕鏈檢測結果，以探討三項指標聯合檢測在MM早期診斷中的應用價值。

1 對象與方法

1.1 研究對象 選擇2014年7月至2016年6月期間在中山大學附屬第三醫院住院最終確診為MM的96例患者作為觀察對象（MM組），所有病例均符合世界衛生組織（WHO）的診斷標準［5］，MM發病早期的檢測結果及相關病史資料完整；剔除合并其他血液系統疾病、不以MM為原發病但可影響血清UA、β2?MG和尿液κ、λ輕鏈水平的并發癥患者。其中男56例，女40例，男女性別比為1.4∶1，年齡30～88歲，平均61.65歲，中位年齡63歲。另選擇2016年12月至2017年3月期間在本院體檢，與MM組性別、年齡組成相似的85例健康成人作為對照組，其中男51例，女34例，男女性別比為1.5∶1，年齡26～84歲，平均55.76歲。

1.2 研究方法 回顧性收集MM組患者發病早期血清UA、β2?MG和尿液κ、λ輕鏈的檢測結果。對照組健康成人于體檢時空腹采血，分別采用尿酸酶法和免疫透射比濁法在日立7600?020全自動生化分析儀檢測血清UA、β2?MG；并收集尿液，離心后采用散射比濁法在西門子BN Pro Spec特定蛋白分析儀檢測尿液κ、λ輕鏈。樣本處理和檢測均嚴格按照操作規程進行。血清UA≥420 μmol/L，血清β2?MG≥3.0 mg/L，尿液κ、λ輕鏈≥7.1 mg/L、≥3.9 mg/L判斷為異常。

1.3 統計學方法 采用SPSS 13.0統計學軟件包進行數據分析，計量資料用±s表示。組間比較采用獨立樣本的t檢驗；服從正態分布的數據采用單因素方差分析來檢驗，不服從正態分布的數據比較采用非參數檢驗；采用χ2檢驗比較不同聯合檢測方式之間的靈敏度與特異度。P＜0.05認為差異具有統計學意義，置信區間為95%。

2 結果

2.1 不同性別、不同年齡段MM患者血清UA、β2?MG和尿液κ、λ輕鏈檢測結果比較 對96例MM組患者進行性別、年齡分層，并對各個分層的檢測結果進行統計分析，結果見表1。四項指標在不同性別之間比較差異無顯著性（P＞0.05）；且四項指標在不同年齡段之間無論男性還是女性總體上比較差異無顯著性（P＞0.05）；僅大于80歲年齡段男性MM患者尿液λ輕鏈水平與其他年齡段比較差異存在顯著性（P＜0.05），60～69歲年齡段男性MM患者尿液κ輕鏈水平與50～59歲年齡段比較差異存在顯著性（P＜0.05），而不同年齡段女性MM患者四項指標比較差異均無顯著性（P＞0.05）。

表1 不同性別、不同年齡段MM患者血清UA、β2?MG和尿液輕鏈檢測結果比較Tab.1 Comparison of the results of serum UA，β2?MG and urine light chain in MM patients in different sex and age ± s

表1 不同性別、不同年齡段MM患者血清UA、β2?MG和尿液輕鏈檢測結果比較Tab.1 Comparison of the results of serum UA，β2?MG and urine light chain in MM patients in different sex and age ± s

注：大于80歲年齡段男性MM患者尿液λ輕鏈水平與其他年齡段比較，*P＜0.05；60～69歲年齡段男性MM患者尿液κ輕鏈水平與50～59歲年齡段比較，#P＜0.05

分層男性～49歲50～59歲60～69歲70～79歲80歲～女性～49歲50～59歲60～69歲70～79歲80歲～例數56 15 11 13 12 5 40 8 4 1 5 13 0血清UA（μmol/L）489.97±192.70 506.36±220.21 490.95±215.13 478.98±151.29 454.08±180.30 556.68±243.30 430.80±167.10 394.92±134.76 378.60±125.09 458.70±169.91 431.22±195.98-血清β2?MG（mg/L）10.53±13.73 7.24±5.74 16.70±22.26 6.33±3.07 12.38±16.97 12.78±13.28 8.37±7.94 4.19±1.71 6.03±5.18 10.33±6.73 8.92±10.80-尿液κ輕鏈（mg/L）246.30±615.40 64.50±81.76 615.66±1 150.57#222.90±433.70 81.68±134.70 294.55±389.55 229.88±505.13 89.68±60.80 324.24±371.64 138.64±326.46 376.28±774.98-尿液λ輕鏈（mg/L）304.44±916.59 181.64±353.03*443.50±788.48*24.48±56.91*17.28±24.61*2 594.56±3 656.37 533.97±1 214.62 56.75±71.57 230.65±217.24 906.65±1 606.77 331.35±959.77-

2.2 MM組與對照組血清UA、β2?MG和尿液輕鏈檢測結果比較 三項指標MM組與對照組之間比較差異均有顯著性（P＜0.05）。見表2。

2.3 MM組與對照組血清UA、β2?MG和尿液輕鏈單項檢測以及兩兩和三項平行檢測、聯合檢測的陽性檢出情況 見表3、4。2.4 血清UA、β2?MG和尿液輕鏈單項檢測以及聯合檢測診斷MM的靈敏度和特異度比較 三項指標平行聯合檢測時靈敏度達到最高，為93.32%，系列聯合檢測時特異度達到最高，為97.90%。見表5、6。

表2 MM組與對照組血清UA、β2?MG和尿液輕鏈檢測結果比較Tab.2 Comparison of the results of serum UA，β2?MG and urine light chain in MM group and control group ± s

表2 MM組與對照組血清UA、β2?MG和尿液輕鏈檢測結果比較Tab.2 Comparison of the results of serum UA，β2?MG and urine light chain in MM group and control group ± s

注：與對照組比較，*P＜0.05

組別MM組對照組例數96 85 UA（μmol/L）465.79±184.07*359.78±90.32 β2?MG（mg/L）9.64±11.67*2.28±0.87 κ輕鏈（mg/L）239.16±566.14*9.49±5.55 λ輕鏈（mg/L）404.23±1 054.42*4.07±1.21

表3 MM組與對照組血清UA、β2?MG和尿液輕鏈單項陽性檢出情況Tab.3 Positive rate of serum UA，β2?MG and urine light chain by single detection in MM group and control group 例（%）

3 討論

MM是克隆性漿細胞異常增生的一種疾病，單克隆漿細胞惡性增生并分泌大量單克隆免疫球蛋白，患者男女比例大約為（2～2.5）∶1。據相關文獻報道，歐美國家MM發病高峰年齡為66歲［5］，而我國MM患者中位年齡大概為57歲［6］，與其相比趨于年輕化，所以多發性骨髓瘤的早期診斷非常重要。目前診斷確診MM的重要依據是骨髓涂片［7］，但由于其操作易受干擾及有損傷性［8］，因此尋找相關生化指標的聯合檢測為MM的早期診斷服務就顯得非常重要。

表4 MM組與對照組血清UA、β2?MG和尿液輕鏈聯合檢測陽性檢出情況Tab.4 Positive rate of serum UA，β2?MG and urine light chain by combined detection in MM group and control group 例（%）

表5 血清UA、β2?MG和尿液輕鏈單項檢測診斷MM的靈敏度和特異度Tab.5 Sensitivity and specificity of serum UA，β2?MG and urine light chain in single detection in MM patients %

尿酸是機體內核酸中嘌呤代謝的終產物，主要經腎臟從尿液中排出，MM屬于惡性增生的漿細胞侵犯骨髓產生的溶骨性病變，大量的瘤細胞核酸分解加強，從而引起患者血中UA含量上升，故血清UA為MM的一個較為特異的生化指標。本研究結果顯示，確診為MM的患者其血清UA指標平均水平為（465.79±184.07）μmol/L，與對照組比較差異有顯著性（P＜0.05），其數值明顯升高，而該指標在不同性別以及不同年齡患者之間并無明顯的差異（P＞0.05）。β2?MG是機體有核細胞合成釋放的蛋白質，主要由淋巴細胞產生，但機體所有的有核細胞都能不同程度地產生β2?MG，特別以代謝活躍的惡性腫瘤細胞為主。在MM中，由于瘤細胞的增殖，大量合成并分泌β2?MG，同時瘤細胞壞死后大量釋放β2?MG，并出現紅細胞周轉加速以及腎功能損害的現象而導致血中β2?MG水平增高；另外患者機體免疫反應系統遭到嚴重破壞后，可經免疫反應激活活化作用，使淋巴細胞的生物學活性作用明顯增加，進而分泌大量的β2?MG［9］。許多文獻報道認為血清β2?MG水平與MM的臨床狀態及預后關系非常密切［10?12］，故血清β2?MG也為一個診斷MM的較為敏感、特異的指標。本研究結果顯示，MM組患者的血清β2?MG平均水平為（9.64±11.67）mg/L，明顯高于對照組（P＜0.05），但其在MM患者中無性別、年齡之間的差異，即在不同性別以及年齡層之間的比較差異無統計學意義（P＞0.05）。正常人免疫球蛋白分子由2條重鏈和2條輕鏈組成，與5種免疫球蛋白相結合的輕鏈只有κ、λ兩種。正常情況下，尿中無游離輕鏈出現，當尿中游離輕鏈升高或κ/λ比值異常，則提示免疫球蛋白組成發生了改變［13］，由于MM是一種惡性漿細胞單克隆增殖性疾病，會過量產生一種單克隆免疫球蛋白輕鏈，同時抑制另一種輕鏈的生成，過量的輕鏈經腎臟從尿液中排出，從而使尿液中出現κ、λ輕鏈［14?15］，而且尿液游離κ和λ不受腎臟功能及尿量影響，因此有較好的特異性和靈敏性。本研究結果顯示，在MM患者的尿液標本中，出現了大量κ、λ輕鏈，與對照組相比具有明顯的差異性（P＜0.05）。

表6 血清UA、β2?MG和尿液輕鏈聯合檢測診斷MM的靈敏度和特異度Tab.6 Sensitivity and specificity of serum UA，β2?MG and urine light chain in combined detection in MM patients %

本研究探討血清UA、β2?MG和尿液κ、λ輕鏈三項指標聯合檢測在MM早期診斷中的臨床應用價值，旨在通過三項指標的相關檢測數據給臨床醫師提示，考慮病患MM的可能性，從而減少MM的漏診、誤診，及早診斷治療MM，提高患者的生存率。從單項檢測和聯合檢測靈敏度、特異度的比較來看，經χ2檢驗，平行聯合檢測靈敏度與各單項檢測的靈敏度之間，系列聯合檢測特異度與各單項檢測的特異度之間有統計學意義（P＜0.05）在所有聯合檢測組合的方式中，血清UA、β2?MG和尿液κ、λ輕鏈三項聯合檢測的方式在平行聯合檢測時診斷MM的靈敏度最高，為93.32%；系列聯合檢測時診斷MM的特異度最高，為97.90%。說明當三項指標聯合檢測時，平行聯合檢測較單項檢測明顯提高了診斷的靈敏度，而系列聯合檢測較單項檢測則明顯提高了診斷的特異度，故三項指標聯合檢測為輔助MM早期診斷的最佳組合。通過對MM組96例患者進行性別以及年齡分層后，血清UA、β2?MG和尿液κ、λ鏈的比較來看，在性別方面，男性與女性之間這幾項生化指標差異無統計學意義（P＞0.05）；在不同年齡層之間，除尿液κ及λ鏈在男性個別年齡分層之間具差異有顯著性（P＜0.05）外，其余指標不同年齡層之間差異均無顯著性（P＞0.05）。該結果則表現出在這三項指標中，患者的性別、年齡之間并無顯著的關聯性，說明不同性別、不同年齡的MM患者除尿液κ及λ鏈外，在這幾項指標的表現上并無差距。因此，在MM的臨床診斷和分析中，常規生化檢查起著不可或缺的作用，其對MM的早期診斷起到的預警作用不容小覷，其中血清UA、β2?MG和尿液κ、λ鏈三項指標對MM有一定的特異性，在輔助早期診斷MM疾病上有重要的臨床意義。在對患者的常規生化檢測結果分析時，臨床醫生應注意血清UA、β2?MG和尿液κ、λ鏈三項指標的結果，當三項指標出現異常時，應考慮到MM的可能性，對患者加以進行免疫固定電泳等進一步確定是否為MM疾病的檢查，從而減少MM的漏診、誤診率，提早發現MM并及時進行治療，從而提高患者的生存率。

本課題所研究的材料數量范圍從一定意義上來看還是較少，并且研究材料中的MM組是已經確診為MM的患者，其三項指標已經發生了明顯的特異性改變，因此可能并不能很全面地反映出三項指標在不同性別以及不同年齡患者之間的差異，還需進一步更深入的研究。