P53在胃癌中的表達及其與L-OHP+5-FU化療藥的相關(guān)性

郭騰 ，王家宏 ，國強 ，趙艷飛

內(nèi)蒙古包頭醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院普外二科，內(nèi)蒙古包頭 014010

胃癌（GC）是世界范圍內(nèi)常見的惡性腫瘤之一，70%的患者患病產(chǎn)生于發(fā)展中國家，特別是我國，即現(xiàn)階段患病率與致死率很高的一種疾病，預后極差，多數(shù)胃癌患者確診時已為晚期[1]。即使行根治性手術(shù)之后，仍有60%的患者術(shù)后會復發(fā)、轉(zhuǎn)移，其中70%發(fā)生在術(shù)后2年內(nèi)，約90%發(fā)生在術(shù)后5年內(nèi)[2-3]，以奧沙利鉑+氟尿嘧啶為主聯(lián)合化療方案對治療晚期胃癌有顯著療效[4]。P53是一種腫瘤抑制基因，與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。該研究選取包頭市腫瘤醫(yī)院2015年4月—2017年4月病理診斷明確的胃腺癌患者資料75例探討患者T和N中P53的表達水平是否與L-OHP+5-FU化療藥的療效相關(guān)聯(lián)，為LOHP+5-FU化療藥的個體化治療提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集包頭市腫瘤醫(yī)院的胃癌組織（T）和癌旁組織（N）蠟塊標本各75例，納入標準：臨床資料完整，組織學類型均為腺癌，術(shù)前均未行放化療，術(shù)后均行輔助化療以LOHP+5-FU為主的聯(lián)合化療治療，85 mg/m2的奧沙利鉑（國藥準字：H20040817）施以靜脈注入d1聯(lián)合0.4 g/m2的亞葉酸鈣（國藥準字：H20090089）施以靜脈注入 d1聯(lián)合0.4 g/m2的5-FU （國藥準字：H31020593）施以靜脈注入d1聯(lián)合2.4 g/m2的5-FU連續(xù)施以靜脈注入 46 h d1（2個星期反復），治療6個療程后評價療效，直至疾病進展或出現(xiàn)不可耐受的毒副作用。

1.2 方式

施行熒光定量多聚核苷酸鏈式反應（FQ-PCR）這一檢測。按石蠟包埋組織切片miRNA提取試劑盒說明書提取樣本T和N內(nèi)部的總RNA。測算RNA處于280 nm與260 nm這一分光光度計波長過后的吸入值，測算濃度并評測濃度。依據(jù)試劑盒指引評測T和N中的P53的表達量，以U6snRNA為內(nèi)參照。依據(jù)所得Ct值，用相對表達量的公式RE=2-△△ct分別計算P53在T和N中表達水平。△△Ct=［腫瘤或癌旁組織 （CtP53-CtU6）］—［正常對照組織（CtP53）-CtU6］，RE指代P53處于胃癌組織與癌旁組織內(nèi)部的對應表達總量，就是胃癌組織與癌旁組織內(nèi)部的表達及匹配正常組織內(nèi)部的表達總量的比重。

分組及療效評價標準：近期療效依據(jù)實體瘤療效評定標準（1981）分為：完全緩解（complete remission,CR）、部分緩解（partial remission，PR）、穩(wěn)定（stable disease，SD）和疾病進展 （progression disease，PD），CR和PR患者需在1個月后確證療效，以CP+PR計算有效率。

1.3 統(tǒng)計方法

憑借SPSS 17.0統(tǒng)計學軟件統(tǒng)計并調(diào)研相關(guān)的數(shù)據(jù)，計量資料用均數(shù)±標準差(±s)表示，行 t檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

T和N中P53的表達水平的比較 N中P53的相對表達量高于T中P53的相對表達量，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），見表 1。

表1 T和N中P53表達水平的比較（±s）

表1 T和N中P53表達水平的比較（±s）

組織胃癌組織（n=75）癌旁組織（n=75）P53 2-△△CT P 值2.66±0.68 2.84±0.83 0.036

T和N中P53的表達量與臨床病理因素的關(guān)系 T中P53的對應表達總量及患者的性別、年齡、TNM分型、組織學分型與具備淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與否加以比照，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；N內(nèi)部P53的對應表達總量及患者的性別、年齡、TNM分型、組織學分型與具備淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與否加以比照，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）;T和 N中 P53的相對表達量與患者對奧沙利鉑和氟尿嘧啶化療藥的敏感性明顯相關(guān)（P＜0.05）；在敏感組中：N中P53的相對表達量明顯高于T中P53的相對表達量；在耐藥組中：T中P53的相對表達量明顯高于N中P53的相對表達量,見表2

表2 T和N中P53的表達水平與臨床病例因素的關(guān)系（±s）

表2 T和N中P53的表達水平與臨床病例因素的關(guān)系（±s）

臨床因素T中P53的表達量2-△△CT P 值N中P53的表達量2-△△CT P 值年齡（歲）≥60（n=46）＜60（n=）29性別男（n=57）女（n=18）組織學分級高分化（n=2）中分化（n=46）低分化（n=27）TNM分期T1±T2（n=7）T3±T4（n=68）淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有（n=59）無（n=16）化療敏感性是（n=46）否（n=29）0.3910.310 2.71±0.73 2.57±0.60 2.91±0.79 2.71±0,89 0.4690.513 2.65±0.71 2.69±0.60 2.83±0.85 2.85±0.80 0.6630.619 2.33±0.35 2.70±0.75 2.60±0.59 2.51±0.40 2.91±0.92 2.75±0.68 0.6180.264 2.78±0.72 2.64±0.68 3.12±0.64 2.81±0.84 0.2270.472 2.80±0.85 2.47±0.72 2.80±0.85 2.98±0.75 0.0100.014 2.50±0.66 2.91±0.65 3.03±0.86 2.55±0.71

3 討論

胃癌處于普遍的惡性腫瘤內(nèi)暫列第四，晚期患者處于5年內(nèi)的存活率低過5%[5]，我國即胃癌尤為普遍的一大國家，由于胃癌致死的人口總量占據(jù)國際的50%。目前，國內(nèi)外公認的延長病人壽命和生存的治療原則是化療為主的綜合治療[6-7]。

胃癌的產(chǎn)生及變換即數(shù)個時期與數(shù)個基因加入的尤為繁雜的進程，原癌基因相應的激活與抑癌基因相應的失活均與腫瘤的產(chǎn)生及進展間緊密關(guān)聯(lián)。人身體的P53基因處在染色體17號內(nèi)部的染色體短臂(17q13),長度即20 kb,經(jīng)由11個外顯子與10個內(nèi)含子生成,其蛋白質(zhì)產(chǎn)物處在細胞核,對應分子的質(zhì)量即53 000 Da,就是P53。其可以監(jiān)控細胞基因組相應的健全性,修復各類要素引發(fā)的DNA受損并消除各類具備癌變趨向的細胞等功能而凸顯出抑癌功能[8]。國內(nèi)研究[9]也指出了,P53相應的表達與患者的性別、年齡、腫瘤位置、腫瘤尺寸TNM分型不具備關(guān)聯(lián)性,而與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移間緊密關(guān)聯(lián)。而另外的調(diào)研指出了,P53蛋白表達不單與分化狀況、遠端轉(zhuǎn)移等具備關(guān)聯(lián)性,還與浸潤程度間緊密關(guān)聯(lián)。此次研究結(jié)果指出了P53在T和N中的表達量與年齡、性別、組織學分級、TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移不具備關(guān)聯(lián)性，這與樣品總量的尺寸不一致、監(jiān)測方式與評定規(guī)范不一致具備關(guān)聯(lián)性。T和N中P53的表達量與L-OHP+5-FU化療藥物敏感性有關(guān)，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。

P53被認為是一個判斷腫瘤細胞發(fā)生發(fā)展的有價值的標志物，和腫瘤的分化程度、復發(fā)、轉(zhuǎn)移和患者預后無密切關(guān)系。然而，P53在T和N中的差異表達能否作為預測奧沙利鉑+氟尿嘧啶化療藥物敏感性和知道臨床化療選擇方案的指標，該研究結(jié)果顯示P53在T和N中的表達量分別是（2.66±0.68）和（2.84±0.83）（P＜0.05），P53 的表達量在T和N中的表達量與奧沙利鉑+氟尿嘧啶化療藥物敏感性有關(guān)，與相關(guān)研究[10]的調(diào)研相一致。其指出了，P53在胃癌中的表達隨組織分化降低而降低，分化程度分別是（0.635±0.111）與（0.501±0.084）（P＜0.05）。 P53 在 T 和N中的表達量可作為奧沙利鉑+氟尿嘧啶藥物臨床化療選擇方案的預測因子，奧沙利鉑+氟尿嘧啶化療藥的個體治療提供理論依據(jù)。