4種禽流感病毒M2e多肽的串聯(lián)表達(dá)和小鼠口服免疫效果

羅斌，錢(qián)凱，徐萬(wàn)祥，唐海平，季朝能，謝毅，顧少華

1. 復(fù)旦大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院遺傳學(xué)研究所，上海 200438； 2. 上海市計(jì)劃生育科學(xué)研究所國(guó)家人口和計(jì)劃生育委員會(huì)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，上海 200032； 3. 上海市工業(yè)菌株工程技術(shù)研究中心，上海 200438

根據(jù)甲型流感病毒(influenza A virus，IAV)兩個(gè)主要膜蛋白血凝素(hemagglutinin，HA)和神經(jīng)氨酸酶(neuraminidase，NA)的不同，分為18個(gè)HA亞型和11個(gè)NA亞型[1-2]。甲型流感病毒通過(guò)HA與宿主細(xì)胞表面的唾液酸受體結(jié)合進(jìn)入候鳥(niǎo)、家禽、豬和人等宿主。由于不同種屬唾液酸受體的結(jié)構(gòu)不同，甲型流感病毒存在種屬特異性，難以跨種屬傳播，有禽流感病毒、豬流感病毒和人流感病毒之分[3-4]。甲型流感病毒的最初宿主為禽類(lèi)[5]，其HA發(fā)生突變后就可能跨種屬傳播，因此禽流感病毒為甲型流感的元兇。

目前研制禽流感疫苗的策略是：每年根據(jù)流行病學(xué)監(jiān)測(cè)進(jìn)行預(yù)測(cè)，大約提前6個(gè)月決定疫苗所用的禽流感病毒株；針對(duì)所用病毒株的HA和NA編碼基因制備新的禽流感疫苗，以匹配可能流行的禽流感病毒[6]。由于HA和NA編碼基因極易發(fā)生突變，或因不同亞型病毒株之間基因重配，目前尚難以對(duì)將要流行或暴發(fā)的禽流感病毒株進(jìn)行準(zhǔn)確預(yù)測(cè)，所以研制對(duì)不同禽流感病毒具有廣譜作用的疫苗極其重要。

基質(zhì)蛋白2(matrix protein 2，M2)是禽流感病毒的第3個(gè)膜蛋白[7]，其N(xiāo)端1～24位殘基為M2胞外區(qū)(M2 ectodomain，M2e)。M2e在不同亞型禽流感病毒之間高度保守[8]，是研制廣譜性禽流感疫苗的靶標(biāo)之一，但其免疫原性較弱[9]。霍亂弧菌腸毒素亞單位A1(Vibriocholeraeenterotoxin subunit A1，CTA1)和來(lái)自金黃色葡萄球菌蛋白A的兩個(gè)Ig結(jié)合域(two Ig-binding domains，DD)串聯(lián)組成的CTA1-DD能起黏膜免疫佐劑作用[10-11]。……