氨溴索注射亞微乳穩(wěn)定性研究

張會(huì)麗，李書平，姜亞玲

（鄭州工業(yè)應(yīng)用技術(shù)學(xué)院藥學(xué)與化學(xué)工程學(xué)院，河南 鄭州 451150）

鹽酸氨溴索為黏痰溶解藥，2015年版《中國(guó)藥典（二部）》［1］收載的劑型有口服溶液、片劑、注射液、膠囊、緩釋膠囊、糖漿6種。雖有緩釋片上市，但對(duì)于不能口服給藥的患者無(wú)法使用，又存在臨床注射劑用量較大且有減少給藥次數(shù)的需求。鑒于該藥無(wú)乳劑品種上市，考慮將其制成乳劑以達(dá)到緩釋作用，而水／油（W／O）型和水／油／水（W／O／W）型乳劑由于注射時(shí)的生物相容性問題和儲(chǔ)藏不穩(wěn)定性使得制備和使用的可能性較小。本研究中將鹽酸氨溴索制成氨溴索，再用剪切儀及均質(zhì)儀做成油／水（O／W）型乳劑，以期制成有緩釋作用的注射用乳劑［2－4］，并對(duì)其穩(wěn)定性進(jìn)行研究［1，5－6］。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

隔水式電熱恒溫培養(yǎng)箱（上海市躍進(jìn)醫(yī)療器械廠）；YSEI藥品穩(wěn)定性試驗(yàn)箱（重慶市永生實(shí)驗(yàn)儀器廠）；AT460型電子天平、AG245型電子天平（瑞士Mettler Toledo儀器公司）；D－79282型高速剪切儀（德國(guó)Fluko公司）；M－110L型高壓微射流納米均質(zhì)機(jī)（美國(guó)Mfic公司）；TGL－16GB型小型通用離心機(jī)（上海安亭科學(xué)儀器廠）；Professional Meter PP－50型電位與pH計(jì)（德國(guó)Sartorius公司）；BI－9000AT型光子相關(guān)光譜儀（美國(guó)Brookhaven公司）。

1.2 試藥

鹽酸氨溴索（北京太洋藥業(yè)有限公司，批號(hào)為M130909）；氨溴索亞微乳（自制，規(guī)格10 mL，批號(hào)分別為 2014112001，2014112002，2014112003）；磷酸二氫鉀（天津科密歐化學(xué)試劑有限公司，批號(hào)為20120512）、氫氧化鈉（天津市進(jìn)豐化工有限公司，批號(hào)為20140512）均為分析純；甲醇（Merck公司，批號(hào)為1637030－217）為色譜純。

2 方法與結(jié)果

2.1 影響因素試驗(yàn)

2.1.1 考察項(xiàng)目及測(cè)定方法

按最終處方和制備工藝制備3批載藥乳劑（編號(hào)分別為 001，002，003），氮?dú)饬飨鹿喾庥?10 mL 安瓿，懸掛式震蕩滅菌。分別于 40℃，60℃，（4 500±500）lx光照，冰箱凍融3次后，考察以下項(xiàng)目。

外觀：目測(cè)，乳劑呈乳白色，倒轉(zhuǎn)后不粘壁，流動(dòng)性良好，記為（＋），表示乳劑穩(wěn)定；乳劑混濁、分層、粘壁或析油，記為（－），表示乳劑不穩(wěn)定。

離心穩(wěn)定性：取適量乳劑置5 mL離心管中，以4 000 r／min的速率離心15 min，同法評(píng)價(jià)乳劑穩(wěn)定性。

pH：用Professional Meter PP－50酸度計(jì)測(cè)定乳劑的pH，結(jié)果應(yīng)符合規(guī)定。

粒徑：采用動(dòng)態(tài)激光光散射法測(cè)量。

含量測(cè)定：采用高效液相色譜法測(cè)定氨溴索亞微乳含量［1，7］。采用 LC －10AT 型高效液相色譜儀（含 ANASTAR工作站，日本島津公司），Diamonsil?C18色譜柱（250 mm ×4.6 mm，5 μm，迪馬公司），檢測(cè)波長(zhǎng) 248 nm，柱溫 30℃，流速 1.0 mL／min，流動(dòng)相為 pH ＝7.0的磷酸鹽緩沖液 －甲醇（27 ∶73），進(jìn)樣量 20 μL。精密量取乳劑1 mL，置10 mL容量瓶中，加甲醇適量溶解，定容，精密量取1 mL，置10 mL容量瓶中，加甲醇適量溶解，定容；另配制同濃度的氨溴索對(duì)照溶液，進(jìn)樣，按外標(biāo)法計(jì)算氨溴索含量。

2.1.2 穩(wěn)定性考察

高溫試驗(yàn)：將氮?dú)饬飨鹿喾庥?0mL安瓿的載藥乳劑置40℃或60℃下10 d，分別于第5，10天取樣，按穩(wěn)定性重點(diǎn)考察項(xiàng)目進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果見表1和圖1?？梢?，溫度越高，乳劑的含量和pH下降越大，但粒徑幾乎無(wú)變化，說明乳滴本身對(duì)該條件穩(wěn)定；由于高溫會(huì)影響藥物穩(wěn)定性，因此，該藥乳劑應(yīng)避免高溫貯藏（因篇幅所限，僅附60℃高溫下5 d粒徑分布圖）。

表1 高溫試驗(yàn)結(jié)果

圖1 60℃高溫試驗(yàn)5 d粒徑分布圖

強(qiáng)光照射試驗(yàn)：將氮?dú)饬飨鹿喾庥?0 mL安瓿的載藥乳劑置（4 500±500）lx照度的條件下10 d，分別于第5天和第10天取樣，按穩(wěn)定性重點(diǎn)考察項(xiàng)目進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果見表2?？梢?，不同光照條件下，乳劑粒徑幾乎無(wú)變化，含量下降不明顯，但考慮到光是引起藥物降解的主要因素，因此乳劑仍宜避光貯藏。

表2 強(qiáng)光照射試驗(yàn)結(jié)果

凍融試驗(yàn)（熱循環(huán)試驗(yàn)）：美國(guó)食品藥物管理局（FDA）于1998年6月發(fā)布的穩(wěn)定性指導(dǎo)原則草案提出，對(duì)于易發(fā)生相分離、黏度減小、沉淀或聚集的藥品，需通過熱循環(huán)試驗(yàn)來(lái)驗(yàn)證其運(yùn)輸或使用過程中的穩(wěn)定性。作為影響因素試驗(yàn)的一部分，應(yīng)模擬藥品在運(yùn)輸與使用過程中可能碰到的溫度條件下循環(huán)考察上市包裝藥品的穩(wěn)定性。將氮?dú)饬飨鹿喾庥?0 mL安瓿的載藥乳劑，以－20℃條件下冷凍48 h和40℃條件下放置48 h為1個(gè)循環(huán)，共循環(huán)3次。每完成1個(gè)循環(huán)，按穩(wěn)定性重點(diǎn)考察項(xiàng)目進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果見表3。可見，乳劑在該條件下含量變化不明顯，但粒徑變化高于60℃時(shí)，貯藏乳劑時(shí)應(yīng)避免劇烈的溫度變化。

表3 凍融試驗(yàn)結(jié)果

2.2 加速試驗(yàn)

按最終處方和制備工藝制備3批載藥乳劑（編號(hào)分別為 001，002，003），氮?dú)饬飨鹿喾庥?10 mL 安瓿，懸掛式震蕩滅菌。置溫度（30±2）℃、相對(duì)濕度（65±5）%的條件下6個(gè)月，分別于第1，2，3，6個(gè)月末取樣，按穩(wěn)定性重點(diǎn)考察項(xiàng)目進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果見表4?？梢姡?個(gè)月內(nèi)氨溴索亞微乳pH降低不明顯，粒徑稍增大，說明乳劑在該試驗(yàn)條件下相對(duì)穩(wěn)定，但考慮到乳劑本身的熱力學(xué)不穩(wěn)定性，仍宜冷藏保存。

表4 加速試驗(yàn)結(jié)果

2.3 長(zhǎng)期留樣試驗(yàn)

按最終處方和制備工藝制備3批載藥乳劑（編號(hào)分別為 001，002，003），氮?dú)饬飨鹿喾庥?10 mL 安瓿，懸掛式震蕩滅菌。置溫度（25±2）℃、相對(duì)濕度（60±10）%條件下6個(gè)月，分別于第1，2，3，6個(gè)月末取樣，按穩(wěn)定性重點(diǎn)考察項(xiàng)目進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果見表5?？梢姡?個(gè)月內(nèi)氨溴索亞微乳pH降低不明顯，粒徑稍微增大。

表5 長(zhǎng)期留樣試驗(yàn)結(jié)果

3 討論

鹽酸氨溴索有溶解分泌黏液及促進(jìn)黏液排出的作用，并能增加呼吸道黏膜漿液腺的分泌，減少黏液腺分泌，從而降低痰液黏度；同時(shí)可促進(jìn)肺表面活性物質(zhì)的分泌，增加支氣管纖毛運(yùn)動(dòng)，使痰液易于咳出，達(dá)到顯著排痰及改善呼吸的作用。肺癌患者由于腫塊壓迫、侵犯氣管，使得支氣管狹窄，引流不暢，致使癥狀遷延不愈，感染不易控制［8］。對(duì)于合并阻塞性肺炎的肺癌患者，聯(lián)合鹽酸氨溴索治療能更好地緩解癥狀，控制炎癥，提高氧合能力，促進(jìn)病灶吸收，減少抗菌藥物的使用時(shí)間和住院時(shí)間［9］。

在不同影響因素、加速試驗(yàn)和長(zhǎng)期試驗(yàn)條件下，乳劑的粒徑變化均不明顯，說明乳滴本身對(duì)該條件穩(wěn)定。但影響因素試驗(yàn)中，乳劑的pH及氨溴索亞微乳含量略有下降，對(duì)含量的影響大小順序?yàn)?0℃＞40℃＞凍融＞光照。因此，乳劑在貯存時(shí)宜陰涼處避光保存。

由于溫度和貯存期間甘油酯和磷脂的水解會(huì)產(chǎn)生游離脂肪酸，從而導(dǎo)致乳劑pH下降，故制備乳劑時(shí)pH需調(diào)至弱堿性。又因在各種條件下，乳劑pH均有下降，故制備乳劑時(shí)宜將其pH調(diào)至8.5左右。

60℃高溫試驗(yàn)結(jié)果顯示，乳劑的含量和pH值下降較大；加速試驗(yàn)6個(gè)月和長(zhǎng)期試驗(yàn)6個(gè)月結(jié)果顯示，乳劑中氨溴索亞微乳下降率較小，分別為1.67%和1.29%。由于高溫會(huì)影響藥物穩(wěn)定性，因此該藥乳劑應(yīng)陰涼處貯藏。