原發性肝癌患者血清GP73的表達及意義

吉文偉，郭勝利，宋展

(1、南陽市中心醫院膽道普外科，河南 南陽 473000；2、南陽市中心醫院普外科，河南 南陽 473000)

我國為乙肝大國，因乙肝發展而導致的肝硬化和肝癌嚴重影響了我國居民的正常生活。肝癌和術后復發的早期診斷和有效治療是提高生存率、改善預后的重要因素。目前臨床主要采用甲胎蛋白（Alpha fetoprotein，AFP）作為肝癌的血清標志物，但其敏感性相對較低，平均只有55%左右，部分早期肝癌患者無法通過AFP進行診斷[1]。最新的蛋白組學研究[2]提示高爾基體蛋白73（Golgi protein 73，GP73）有潛力成為肝癌早期診斷的血清標志物。但目前的GP73的研究主要停留在癌組織的研究上，但關于肝癌組織與GP73的相關性研究較少，現階段GP73蛋白的表達情況與肝癌患者臨床病理特征和預后的相關性研究也相對缺乏。故此，本研究深入探討了原發性肝癌患者血清GP73表達及意義，旨在為臨床原發性肝癌的早期診斷和治療提供新的思路，現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2015年2月至2017年3月在河南省南陽市中心醫院治療的原發性肝癌患者78例，納入標準：⑴均經病理組織學診斷；⑵入院前未進行放療、化療等治療；⑶患者知情同意。排除標準：⑴合并有其他原發性惡性腫瘤；⑵依從性差，不能配合隨訪者。同時選取肝硬化患者56例，慢性乙肝患者60例及健康志愿者70例，各組受試者年齡、性別比較差異無統計學意義（P＞0.05），見表1。

表1 各組受試者年齡、性別比較

1.2 實驗方法 所有待檢者入院后第2d取清晨靜脈血5ml，離心機離心后，取血清-80℃凍存備用。ELISA法檢測血清GP73水平，試劑盒購于南京凱基生物有限公司。

1.3 隨訪方法 通過電話聯系患者及其家屬獲取預后資料，隨訪時間記為手術日期至最后一次隨訪日期或患者死亡日期。

1.3 統計學處理 統計分析采用SPSS 19.0軟件，符合正態分布計量資料采用（±s）表示，組間比較使用方差分析，兩兩比較采用LSD-t檢驗；非正態分布資料采用秩和檢驗；計數資料比較使用χ2檢驗；生存曲線采用Kaplan-Meier法繪制，比較采用Long-rank法比較。以P＜0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 各組血清GP73表達水平比較 肝癌患者血清GP73明顯高于健康者和慢性乙肝患者 （P＜0.05），而明顯低于肝硬化患者（P＜0.05），見表 2。

表2 各組血清GP73表達水平比較

2.2 不同肝癌患者血清GP73表達水平比較 肝癌患者血清GP73與腫瘤大小和TNM分期有關 （P＜0.05），與患者性別、年齡、HBV、HCV、肝硬化、Child-Pugh評分、AFP和血管侵犯無關 （P＞0.05）。見表3。

表3 不同肝癌患者血清GP73表達水平比較

2.3 肝癌不同血清GP73水平患者預后比較 根據本次研究肝癌患者中位血清GP73水平，將患者分為血清GP73高表達組（血清GP73≥125.64ng/ml，n=43） 和血清 GP73低表達組 （血清 GP73＜125.64ng/ml，n=35）；截止 2017 年 9 月，血清 GP73高表達組和血清GP73低表達組中位生存時間分別為22.84個月和21.99個月，差異比較無統計學意義（χ2=0.309，P＞0.05），見圖 1。

圖1 生存曲線分析

3 討論

原發性肝癌是由化學致癌物質、病毒等多種因素共同作用，抗癌基因失活、致癌基因或相關基因激活及胚胎期部分癌基因重新復活等誘發的肝細胞增殖失控而導致的癌變。其中多種基因的表達和調控與肝癌的發生、發展具有密切關系[3]。部分學者認為GP73肝癌血清標志物中最值得期待的敏感蛋白[4]。GP73為高爾基體特異性Ⅱ型跨膜蛋白，定位于人9q21.33染色體基因組，亦稱為GOLM1或GOLPH2；GP73由膜內、膜外的C-端及疏水N-端共計3部分組成，跨膜結構完整[5，6]。但直至今天GP73的分子生物學作用還沒有得到深入研究，但已經明確GP73主要在肝組織的上皮細胞中表達，正常肝細胞未見其顯著表達，但可因肝臟疾病的發展而逐步表達增加[7，8]。故此，本研究深入探討了原發性肝癌患者血清GP73表達及意義，旨在為臨床原發性肝癌的早期診斷和治療提供新的思路。

朱波[9]的研究發現GP73主要在細胞質中表達，當GP73增量表達出現飽和時，可導致剩余的GP73向高爾基體順面遠側位移。本研究發現肝癌患者血清GP73明顯高于健康者和慢性乙肝患者（P＜0.05），而明顯低于肝硬化患者（P＜0.05）。 該結果說明肝癌患者血清GP73水平有所升高，隨著肝臟損傷程度的加深GP73的表達率逐漸升高，這表明GP73的表達強弱對肝臟損傷的程度具有提示作用，我們推測慢性肝臟疾病發展與GP73表達的調節機制有關。但方玫玫[10]的研究發現肝癌患者的GP73水平顯著高于肝硬化患者，與本研究結果存在出入，還有待擴大樣本量進一步研究證實。相關資料顯示GP73的調節機制可能主要存在于兩個過程中：一方面在肝臟慢性疾病發生、發展過程中出現；另一方面可能與肝細胞的急性損傷具有密切聯系[11，12]。

GP73在肝癌、結直肪癌、宮頸癌、神經膠質細胞瘤及肺癌組織中會呈現高表達。經分析可得，上述癌癥都是較容易轉移的類型，且當病理分期處于Ⅲ期后，更容易發生轉移，但是在不易轉移的癌癥組織中，GP73就不會呈現高表達[13]。這一現象預示了GP73與腫瘤轉移具有相關性。本結果顯示腫瘤大小≤3cm、TNM分期Ⅰ～Ⅱ期患者血清GP73均明顯高于腫瘤大小＞3cm和TNM分期Ⅲ～Ⅳ期患者（P＜0.05）。上述結果提示肝癌患者血清GP73水平與腫瘤大小和TNM分期有一定聯系，GP73可能成為一類具有較高潛在價值的腫瘤標志物。最新的研究[14]發現了干擾肝癌細胞中的GP73的表達，可影響腫癌增殖，這一機制是通過影響腫瘤細胞EMT進行的；通過干擾GP73后細胞遷移和侵襲能力的檢測，發現干擾GP73可顯著抑制腫瘤細胞的遷移和侵襲能力，從而GP73可能參與腫瘤轉移過程。但原發性肝癌的轉移、發生和發展是多因素共同誘發的過程，GP73在肝癌組織中如何運輸、合成、分泌的具體生物功能還需進一步研究[15]。

肝癌不同血清GP73水平患者預后比較發現血清GP73高表達肝癌患者 （血清GP73≥125.64ng/ml）和血清GP73低表達肝癌患者（血清GP73＜125.64ng/ml）中位生存時間分別為22.84個月和21.99個月，差異比較無統計學意義 （P＞0.05）。上說結果提示肝癌患者血清GP73水平與患者預后無明顯關系，我們認為這可能與本研究樣本量較少有關，還需要進行大樣本量深入研究證實。

綜上所述，肝癌患者血清GP73水平有所升高，與腫瘤大小和TNM分期有一定聯系，與患者預后無明顯關系。