基層醫院孕婦血型鑒定與抗體檢測分析

李小紅

(濮陽市婦幼保健院輸血科，河南 濮陽 457000)

血型抗體存在 “天然抗體”和免疫性抗體兩種。輸血、妊娠是產生同種免疫抗體的主要原因。在臨床上，除了ABO、Rh血型抗體外，其他如Kell、Duffy、Kidd等血型系統也有報道，但不常見。孕婦比較容易產生血型抗體，它常引起免疫溶血性輸血反應(HTR)和新生兒溶血病(HDN)的發生。本文通過分析濮陽地區血型ABO正反不一致、不規則抗體及弱D等情況以探討在基層婦幼醫院圍產期孕婦血型鑒定與抗體檢測的重要性，現報告如下。

1 資料與方法

1.1 標本來源 選取2013年至2016年在本院門診及入院待產孕婦為研究對象，根據知情同意原則分別采集不抗凝血3ml和EDTA抗凝血2ml。

1.2 主要試劑 ABO紅細胞、抗-A、抗-B、抗-D血清、抗球蛋白試劑、抗體篩選紅細胞及鑒定譜細胞（上海血液生物醫藥有限責任公司）；抗球蛋白微柱凝膠卡（長春博訊生物技術有限公司）；所有試劑都在有效期內。

1.3 方法 血型ABO正反定型、RhD血型、ABO血型亞型確認試驗、不規則抗體篩選與鑒定試驗、間接抗人球蛋白試驗及吸收放散試驗，依照文獻[1]，嚴格按試劑說明書操作。

2 結果

2.1 ABO血型正反定型不一致6例，其原因分布見表1。

2.2 檢出112例RhD陰性，確認2例弱D，共檢出19例不規則抗體陽性。其中抗-D14例 （73.7%），抗-E 4例（21.1%），抗-C 1例（5.2%）。

3 討論

ABO定型錯誤將造成嚴重的輸血后果，可能威脅患者的生命。只有正確進行ABO血型的定型，才可能保障輸血的有效性和安全性。排除人為因素，出現ABO血型正反定型結果不一致的原因可能是技術問題或是被檢者自身ABO抗原或抗體存在問題。如表1中，均由于正反定型不一致而發現的問題，并進一步查找原因。如果抗體只是減弱，反定型可以通過增加反應時間或加大血清量并在4℃下放置5～10min后再進行試驗。由于ABO亞型的紅細胞抗原性減弱，抗-A或抗-B的實際有時不能檢出其抗原性，造成定型的困難。吸收放散試驗是敏感的血清學方法，可以用來檢測抗原，也可以用于檢測抗體，在條件有限的基層醫院，靈活運用吸收放散試驗鑒定ABO血型。血型正反定型不符的原因可以是亞型引起，也可以是由IgM性質的不規則抗體（如抗-M，-N，-P）。表1中，病例編號4，6分別是抗-M和冷凝集素引起的正反定型不一致?？筂抗體是MN血型系統中的一種血清抗體。在血型鑒定正反不合以及交叉配血不符合時常被發現[2，3]。當懷疑存在冷自身抗體時，要把患者紅細胞用溫鹽水洗滌3遍，然后再做常規ABO血型正反定型檢測[4]。冷凝集素是冷反應性紅細胞抗體[5]，一般置37℃溫育均能散開。

表1 6例血型正反定型不一致血清學結果及原因分析

當工作中遇到正反定型不符時，考慮亞型還是不規則抗體引起，可根據反定型中O細胞和患者的血清反應格局做出初步判斷，當O細胞和患者的血清無凝集時考慮是亞型，反之則考慮不規則抗體。同時做自身紅細胞做對照，以確定自身抗體的干擾。

不規則抗體是指紅細胞ABO血型抗-A、抗-B和抗-AB以外的其他血型抗體，多為IgG抗體，是臨床輸血引起免疫性溶血性輸血反應和新生兒溶血病的重要原因之一[6]。本調查中19例檢測出Rh系統的抗體，這19例孕婦分娩前備血必須選用紅細胞不含相應抗原的血液。大量研究表明，紅細胞血型不規則抗體是輸血無效及溶血性輸血不良反應的主要原因[7，8]。她們分娩的新生兒高度警惕發生Rh-HDN。Rh-HDN是由Rh血型系統抗體引起的，Rh血型抗體是由妊娠或輸血產生的同種異型免疫抗體。在臨床工作中，孕婦做抗體篩選非常有必要，有妊娠史(包括流產史)、輸血史的母親再次妊娠時，應該特別注意Rh-HDN[9，10]。Rh血型系統能夠引起HDN的除D外還有C、c、E、e，以D抗原不合最為常見。實驗室常規檢測中，當在鹽水介質中反應為陰性，間接抗人球蛋白試驗（IAT）為陽性時可認為弱D表現型（包括弱D和部分D），但其不能區別弱D或部分D[11]。本文中2例弱D或部分D，其備血或輸血都以RhD陰性對待。RhD陰性孕婦一般在整個孕期要定期檢測不規則抗體及抗體效價，對已有不規則抗體產生者，為了避免胎兒在母體繼續遭受侵害，需擇期住院，盡早分娩。有研究表明，體血液循環中胎兒紅細胞的出現率為6-7%，晚期可達30%，在這種情況下，大約有5%-7%的RhD陰性孕婦產生抗體，妊娠次數的增加在抗-D抗體的產生中具有相當重要的意義[12，13]。本文中抗-E產生的比例也不低，這與文獻相一致的[14]，我國人群中Rh(E)陰性頻率遠遠高于Rh(D)陰性的頻率，而Rh(E)抗原又是Rh血型系統中除Rh（D）之外最強的抗原，Rh(E)陰性者因妊娠接受Rh(E)抗原刺激后容易產生抗-E[15]。故抗體篩查應列入常規檢查項目。

產科出血大多為大量急驟性的出血，如果失血量達到一定程度時，發生彌漫性血管內凝血、休克等嚴重并發癥。一旦發生產科出血，除采取積極有效的治療措施，科學有效地對產科大量出血患者實施輸血，以提高患者生存率和生存狀態是至關重要的。故孕婦正確的血型抗體鑒定在孕期開展并記錄，以避免分娩時緊急輸血配血困難。實驗室采用多種法進行抗體篩查，保證血型抗體的檢出率。對于正反定型不符必須引起重視，檢驗人員應當做好記錄、分析原因、通過相關試驗準確及時鑒定ABO血型以確保臨床用血安全。實驗室制定并嚴格遵守血型正反定型不一致、不規則抗體篩查等標準操作流程，條件相對薄弱的地區醫院也可將標本送至上一級血型參比實驗室檢測。盡可能避免血型抗體漏檢，減少醫療事故的發生。