在微柱凝膠血小板血型配型實驗中紅細胞血型不規則抗體的影響因素觀察及處理措施

吳玉敏，趙志紅

(鄭州大學附屬洛陽市中心醫院輸血科，河南 鄭州 471000)

不規則抗體是臨床輸血過程中發生率較高，是由于患者輸血治療過程中血清中含外抗－A、抗－B外的其他抗體，治療前如果未能發現，將會造成溶血性反應，增加輸血風險。因此，臨床上對于需要輸血治療患者必須進行輸血前不規則抗體篩選[1]。常規篩查方法以聚凝胺法為主，該測定方法雖然能篩選出不規則抗體，但是篩查方法相對復雜，影響因素較多，難以提高輸血安全[2]。微柱凝膠技術（MGT）也是血小板血型配型實驗中紅細胞血型不規則抗體篩查中常用方法，能完成血液中不規則抗體的篩選，有助于提高輸血安全性[3]。因此，加強微柱凝膠血小板血型配型實驗中紅細胞血型不規則抗體的影響因素及處理措施對降低治療風險、提高預后具有重要的意義[4，5]。本課題以2014年6月－2017年7月自愿到醫院進行治療的輸血治療患者473例作為研究對象，探討微柱凝膠血小板血型配型實驗中紅細胞血型不規則抗體的影響因素及處理措施，報道如下。

1 資料與方法

1．1 臨床資料 選擇2014年6月－2017年7月自愿到醫院進行治療的輸血治療患者473例作為研究對象，男 281 例，女 192 例，年齡（5～94）歲，平均（48．51±8．86）歲?；颊咧?，再生障礙性貧血 279 例，急性單核細胞白血病89例，血小板減少性紫癜105例。本課題均得到醫院倫理委員會批準，且患者自愿簽署輸血相關條約

1．2 納入及排除標準 納入標準：⑴符合輸血治療適應證者[6]；⑵輸血前均完成血小板血型配型、紅細胞血型不規則抗體篩選；⑶能嚴格遵循醫囑完成相關檢查、治療。排除標準：⑴不符合輸血治療或存在輸血風險者。⑵合并嚴重肝、腎功能異?；虼嬖诿黠@的精神異常者；⑶資料不全或治療后無法根據實驗要求完成隨訪。

1．3 儀器與試劑 本課題所需儀器、試劑包括：微柱凝膠試劑卡（北京中山金橋）、專用離心機和孵育器（福州邁新）、篩選細胞儀和鑒定譜細胞（上海血液生物）、聚凝胺試劑卡（福州邁新）、數字顯示式恒溫水浴箱（上海一恒）、全自動血庫系統（深圳愛康Metis 200）等。

1．4 方法 輸血前分別采用微柱凝膠法和聚凝胺法對患者紅細胞血型不規則抗體進行測定；通過血小板血型配型實驗中紅細胞血型不規則抗體影響因素進行多因素Logistic回歸分析。⑴紅細胞血型不規則抗體篩選。篩選前盡可能將干膠、氣泡等排除，選擇合格的試劑卡，將選定好的試劑卡放于18℃～25℃下，采用專用離心機對標本進行5min離心，速度為1900rpm。對于需要輸血治療患者輸血前空腹下采集靜脈血2ml，提取壓積紅細胞10μl、紅細胞稀釋液1．2ml，混合均勻后向微柱孔中加入50μl和25μl混合懸液，然后放置在專用孵育器中進行15min孵育，孵育完畢后利用專用離心機完成 10min 離心，速度為 9000rpm[7，8]。⑵判讀方法。陰性：紅細胞沉在微柱底部，滯留在中、上部為陽性。⑶影響因素分析。通過血小板血型配型實驗中紅細胞血型不規則抗體影響因素（包括：性別、輸血史及妊娠史等）進行多因素Logistic回歸分析[9]。

1．5 統計分析 采用SPSS 18．0軟件處理， 計數資料行χ2檢驗，采用n（%）表示，計量資料行t檢驗，采用（±s）表示，P＜0．05 差異有統計學意義。

2 結果

2．1 微柱凝膠法和聚凝胺法不規則抗體篩選率比較 微柱凝膠法血小板血型配型實驗中紅細胞血型不規則抗體篩選率為4．86%，高于聚凝胺法3．17%（P＜0．05），見表 2。

表2 微柱凝膠法和聚凝胺法不規則抗體篩選率比較

2．2 微柱凝膠法和聚凝胺法不規則抗體陽性構成比較 微柱凝膠法和聚凝胺法不規則抗體抗c、抗－Mur、抗－M、抗－N、抗－JKb、抗－P1 及自身抗體比較差異無統計學意義 （P＞0．05）； 微柱凝膠法抗－D、抗－E、抗 Ec、抗－Lea、抗－Leb、冷抗體，均高于聚凝胺法（P＜0．05），見表 3。

2．3 微柱凝膠法檢測紅細胞血型不規則抗體影響單因素分析 單因素結果顯示：微柱凝膠法檢測紅細胞血型不規則抗體與性別、輸血史及妊娠史關系密切（P＜0．05），見表 4。

2．4 微柱凝膠法檢測紅細胞血型不規則抗體影響多因素Logistic回歸分析 多因素Logistic回歸分析顯示：微柱凝膠法檢測紅細胞血型不規則抗體與性別、輸血史及妊娠史關系密切（P＜0．05），見表5。

3 討論

輸血是臨床上常用的搶救、治療危急重癥患者的治療方法，臨床上如何提高輸血安全性，降低輸血不良反應發生率成為研究的熱點。文獻報道顯示：交叉配血是提高輸血安全性的重要方法[10]。目前，臨床上使用的配血方法相對較多，但是不同方法各有優缺點，篩選準確度受到的影響因素較多。根據國家規定：對于伴有輸血史、妊娠史或短時間內需要進行多次輸血者必須進行不規則抗體篩查[11]。常用篩查方法以聚凝胺法為主，該方法雖然能實現輸血前不規則抗體的篩查，但是診斷敏感度、特異度相對較低，導致患者預后較差[12]。

表3 微柱凝膠法和聚凝胺法不規則抗體陽性構成比較[n（%）]

表4 微柱凝膠法檢測紅細胞血型不規則抗體影響單因素分析（n=23）

表5 微柱凝膠法檢測紅細胞血型不規則抗體影響多因素Logistic回歸分析

近年來，聚凝胺法在血小板血型配型實驗中紅細胞血型不規則抗體中得到應用，且效果理想[13]。本研究中，微柱凝膠法血小板血型配型實驗中紅細胞血型不規則抗體篩選率為4．86%，高于聚凝胺法 3．17%（P＜0．05）。 由此看出：將微柱凝膠法用于輸血前不規則抗體篩查中有助于提高篩查率，有助于指導臨床治療。微柱凝膠法完成不規則抗體篩選時主要根據紅細胞抗原與測定抗體聚集反應判斷，當二者反應后將會造成紅細胞阻滯在凝膠中[14]。而對于未見不規則抗體的紅細胞則會沉淀在微柱的底部。因此，通過觀察紅細胞的位置能判斷血液中是否存在不規則抗體[15]。本結果中，微柱凝膠法和聚凝胺法不規則抗體抗c、抗－Mur、抗－M、抗－N、抗－JKb、抗－P1及自身抗體比較差異無統計學意義 （P＞0．05）； 微柱凝膠法抗－D、 抗－E、抗Ec、抗－Lea、抗－Leb、冷抗體，均高于聚凝胺法（P＜0．05）。提示：利用微柱凝膠法有助于提高不規則抗體篩查率。文獻報道顯示：微柱凝膠技術是在抗人蛋白試驗基礎上演變而來的新型的篩選方法，在交叉配血、不規則抗體的篩查及血型的鑒定中均發揮了重要的作用。數據報道顯示：微柱凝膠法在紅細胞不規則抗體檢測中靈敏度較高、特異性強，并且該篩選方法操作相對簡單，臨床漏診率、誤診率僅為 0．01%－0．1%。

文獻報道顯示[16]：血小板血型配型實驗中紅細胞血型不規則抗體的數量、質量受到的影響因素較多，與B細胞、T細胞等存在緊密的聯系。當機體受到抗原刺激后，將會使得B細胞發生增殖、分化為記憶細胞。因此，臨床上，將微柱凝膠法用于血小板血型配型實驗中紅細胞血型不規則抗體篩選中受到的影響因素相對較多，不同影響因素之間相互作用，影響篩選結果。本結果中，單因素及多因素Logistic回歸分析顯示：微柱凝膠法檢測紅細胞血型不規則抗體與性別、輸血史及妊娠史關系密切（P＜0．05）。為了提高微柱凝膠法篩查血小板血型配型實驗中紅細胞血型不規則抗體效果，臨床上應采取有效的措施進行干預處理。輸血前應加強輸血前宣傳教育，告知患者輸血治療的目的、治療過程中的注意事項，讓患者對輸血治療有一個全面的認識和了解。同時，不規則抗體篩選陽性者，則應該進一步明確不規則抗體的性質，在相關醫師指導下制定相應的方案，提高輸血安全性，最大限度降低輸血并發癥發生率。輸血過程中應密切觀察患者生命體征，對于出現異?；颊邞⒓赐Ｖ馆斞龠M患者早期恢復[17]。

綜上所述，將微柱凝膠法用于血小板血型配型實驗中紅細胞血型不規則抗體中效果理想，能消除假陽性反應。但是，微柱凝膠法紅細胞血型不規則抗體測定中影響因素較多，應采取有效的方法進行處理干預，提高輸血安全性。