血小板抗體篩查在多次輸血的白血病患者中的應(yīng)用分析

張振周

(濮陽市人民醫(yī)院，河南 濮陽457000)

白血病是一類造血干細胞惡性克隆性疾病，是臨床常見的惡性血液病，具有較高的發(fā)病率和死亡率[1]。由于白血病本身或化療等原因?qū)е鹿撬枰种疲庵苎“鍦p少，需要進行輸血治療。血小板輸注是臨床增加血小板的最直接方法[2]。但多次輸注血小板或其他血制品會刺激機體免疫系統(tǒng)，導(dǎo)致血小板相關(guān)抗體或特異性抗體產(chǎn)生，可能導(dǎo)致血制品輸注無效[3，4]。臨床血小板輸注效果與血小板抗體效價成反比關(guān)系，血小板抗體越多，血小板輸注療效越差。本研究對多次輸血的白血病患者體內(nèi)血小板抗體和輸血效果的關(guān)系進行了分析，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1．1 一般資料 選取我院 2016年 9月－2017年 9月間收治的白血病患者90例為觀察組，其中有男性患者48例，女性患者42例，患者年齡20～70歲，平均年齡（48．0±3．5）歲。 選擇同期來我院做健康體檢者40例為對照組，其中男性體檢者21例，女性體檢者19例，體檢者年齡20～65歲，平均年齡 47．6±4．0歲。 所有入組目標均自愿參與，其符合以下條件：①觀察組均為確診的白血病患者；②觀察組患者均多次紅細胞懸液、血小板等血液制品輸注史，且輸血次數(shù)至少1次以上；③健康體檢者排除有輸血史、妊娠史的研究對象。兩組患者年齡、性別等基礎(chǔ)資料間無明顯差異。觀察組根據(jù)輸血次數(shù)分為A、B、C三個亞組，其中有輸血次數(shù)≤3次的患者38例，設(shè)為A組；輸血次數(shù)3～6次的患者30例，為B組；輸血次數(shù)≥7次組的患者22例為C組。

1．2 試劑和儀器 本研究血小板抗體篩查試劑盒采用長春博德生物有限公司試劑盒 (固相凝集法，批號20160908)，血小板抗體檢測指示紅細胞和血小板抗體篩檢細胞也購買于長春博德生物有限公司。離心機采用TD－B型醫(yī)用離心機(長春博研)。交叉配型采用與患者ABO同型供血者血小板 (血站提供)。

1．3 血小板抗體檢測 抽取待檢者清晨空腹靜脈血 3～5ml，3000r/min離心 10min后采用固相凝集法進行檢測，具體操作步驟按血小板抗體檢查試劑盒說明書進行。血小板輸入指征，當(dāng)血小板低于20×109/L時，白血病患者需要輸注血小板。輸注前先進行ABO血型交叉配血，按照相同ABO血型制備血小板懸液。采用SEPSA技術(shù)和微量淋巴細胞毒法(CLT)做主次側(cè)交叉配血試驗。

1．4 輸注效果 檢測患者輸注血小板后1h和24h時外周血血小板計數(shù)，使用血小板計數(shù)增高指數(shù)(CCI)來評價血小板輸注的效果，以輸注24h后CCI低于 4．5×109/L 為無效。

1．5 統(tǒng)計學(xué)分析 所有數(shù)據(jù)均采用SPSS 17．0統(tǒng)計學(xué)軟件處理，計量資料均以平均值±標準差（±s），計數(shù)資料采用χ2檢驗，如有理論T值＜5則使用校正 χ2檢驗，計量資料采用 t檢驗，以 P＜0．05 表示有統(tǒng)計學(xué)差異。

2 結(jié)果

2．1 兩組間血小板抗體陽性率比較 見表1。

表1 兩組間血小板抗體陽性率比較

2．2 觀察組中三個亞組間血小板抗體陽性率比較見表2。

表2 三亞組間血小板抗體陽性率比較

2．3 觀察組血小板抗體對血小板輸注效果的影響見表3。

3 討論

血小板輸注是目前國內(nèi)治療白血病必不可少的治療手段。臨床上許多白血病患者往往經(jīng)歷過多次輸血治療，以減緩其因化療等原因?qū)е碌墓撬枰种啤⒀“鍦p少癥狀，但不幸的部分患者輸注血小板后血小板計數(shù)不升反降，甚至導(dǎo)致患者發(fā)生彌漫性血管內(nèi)凝血、顱內(nèi)出血等并發(fā)癥，直接威脅患者的生命安全[5，6]。

研究報道，導(dǎo)致血小板輸注無效的原因主要分兩類，①多次輸血、妊娠等原因?qū)е聶C體產(chǎn)生血小板抗體和(或)HLA抗體，引發(fā)免疫反應(yīng)并最終導(dǎo)致血小板輸注無效[7，8]；②其它非免疫因素，如出血、發(fā)熱、脾腫大、彌漫性溶血等導(dǎo)致的輸血無效[9，10]。 有文獻報道[11－14]，包括白血病在內(nèi)的血液病輸血患者中，30%～70%的反復(fù)輸血患者的血小板輸注無效，而導(dǎo)致輸血無效的抗體抗人類白細胞抗原和抗血小板特異性抗體共占17%左右。多次輸注血制品后易產(chǎn)生人類白細胞抗原和抗血小板特異性抗體[15]，并產(chǎn)生一系列血小板抗原抗體免疫反應(yīng)。目前，由于經(jīng)費、設(shè)備及血小板輸注的迫切性，我國大部分醫(yī)院采取的ABO同型隨機血小板輸注，這就直接導(dǎo)致了血小板特異性抗體存在的患者血小板輸注無效。

表3 觀察組患者血小板抗體對CCI和血小板輸注有效率的影響

本研究挑選了90例反復(fù)輸血的白血病患者(即觀察組)，抽取其靜脈血測定其血小板抗體陽性率，并和無輸血史的健康體檢者(即對照組)進行比較，研究發(fā)現(xiàn)觀察組患者中血小板抗體檢測陽性率為 21．1%，顯著高于對照組的陽性率(2．5%)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義；為了進一步研究輸血次數(shù)和血小板抗體產(chǎn)生之間的關(guān)系，我們將90例反復(fù)輸血白血病患者按輸血次數(shù)分為ABC三個亞組，進而發(fā)現(xiàn)輸血7次及以上的C組的血小板抗體陽性率高于其它兩組，而B組的陽性率雖然高于A組，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義，我們認為這可能和本次的樣本量不足有關(guān)，需進一步擴大研究。

由于健康體檢者不會進行輸血，本研究對觀察組中血小板抗體陽性和陰性者分別進行血小板輸注，然后測定其24后CCI，研究發(fā)現(xiàn)，血小板抗體陽性者平均 CCI僅為 2．4±1．3×109/L， 臨床判斷無效，而血小板抗體陰性者平均CCI符合有效標準。對陽性和陰性者進行具體分析時，血小板抗體陽性者血小板輸注有效率顯著低于血小板抗體陰性者。

綜上所述，反復(fù)大量輸注血制品會導(dǎo)致血小板抗體產(chǎn)生，且輸注血制品次數(shù)越多，血小板抗體陽性率越高，臨床血小板輸注療效越差。這要求我們臨床加強對血小板抗體的篩查，以預(yù)防血小板輸注無效，提高治療效果。