不孕類型和不孕年限與常規體外受精結局的相關性分析*

(內蒙古醫科大學附屬醫院，內蒙古 呼和浩特 010050)

近年來，輔助生殖技術(assist reproduction technology,ART)無論是受精率還是妊娠率均取得很大的提高，但仍無法避免受精失敗事件的發生，其發生率為5%～10%[1]。為提高卵子利用率，及時避免受精失敗的發生，本文回顧性分析2014年3月-2016年10月在內蒙古醫科大學附屬醫院生殖醫學中心因女方因素接受體外受精-胚胎移植(in vitro fertilization and embryo transfer,IVF-ET)治療(排除男方因素)1 128個周期，從不孕類型和不孕年限分析臨床及實驗室數據，旨在尋找受精失敗發生的高危因素，為進一步選擇合適的授精方式，提高卵子的利用率，提高受精率及周期妊娠率提供參考。

1 資料與方法

1.1 資料

回顧性分析因女方因素接受IVF-ET治療1 128個周期，根據不孕類型分為原發不孕組591個周期和繼發不孕組537個周期；其中受精正常1 063個周期和受精失敗行早期補救卵胞漿內單精子注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)65個周期。

1.2 方法

1.2.1 控制性超促排卵 根據患者個體因素采用不同的促排卵方案，當2個主導卵泡≥18 mm時，注射絨毛膜促性腺激素(hCG,麗珠制藥)5 000～10 000 u，35～37 h后穿刺取卵。

1.2.2 受精、受精后觀察及胚胎評級 手淫法取精，采用密度梯度離心法+上游法處理精液，取卵后3～4 h受精，根據精子活力每個卵子添加精子1～1.5萬條。受精后4～5 h去除卵母細胞周圍的卵丘顆粒細胞，觀察第二極體，推斷卵子受精情況，第二極體排出少者繼續培養至6 h；若第二極體排出卵子數占總卵子數比例＜30%，則行補救ICSI。受精后20 h觀察原核，并于采卵后48和72 h分別進行胚胎形態學評價。評級為Ⅰ～Ⅲ級者為可移植胚胎[2]。

1.3 妊娠及隨訪

移植后14 d測血hCG，3～4周后B超檢查孕囊確定臨床妊娠。

1.4 統計學方法

數據分析采用SPSS 19.0統計軟件，計量資料采用均數±標準差(±s)表示，符合正態分布采用獨立樣本t檢驗，計數資料采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組不孕基本情況比較

原發不孕組共591個周期，繼發不孕組537個周期，兩組在體重指數、年齡、基礎內分泌、促性腺激素(Gonadotropins,Gn)總數、Gn天數與繼發不孕組比較，差異無統計學意義(P＞0.05)，兩組不孕年限比較，差異有統計學意義(t=0.531，P=0.000)，原發不孕組的不孕年限高于繼發不孕組。見表1。

表1 兩組基本情況比較 (±s)

表1 兩組基本情況比較 (±s)

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2.2 兩組不孕妊娠結局情況比較

兩組受精率、正常受精率、卵裂率、受精失敗補救ICSI率比較，經χ2檢驗，差異有統計學意義(P＜0.05)；兩組妊娠率、胚胎種植率比較，經χ2檢驗，差異無統計學意義(P＞0.05)。見表2。

2.3 兩組不孕年限對受精結局的影響分析

將原發不孕組和繼發不孕組的不孕年限分為4個時間段進行受精結局比較，兩組在不孕年限達4～6年和＞6年補救ICSI比較，經χ2檢驗，差異有統計學意義(χ2=4.528和4.580，P=0.034和0.049)。見表3。

表2 兩組妊娠結局比較 %

表3 兩組不孕年限對補救ICSI影響比較 例

3 討論

在進行常規IVF助孕之前，受精情況是無法準確預測。若能從臨床資料中初步預測IVF受精情況從而選擇合適的受精方式避免受精失敗是改善IVF結局的重要環節。受精失敗主要與不孕年限、精子的質量、外界條件等因素有關，本研究較準確的分析不孕類型及年限與受精結局的相關性，特將納入者排除男方精子因素，單純因女方因素行ART者，結果顯示:原發和繼發不孕兩組在不孕年限達4年以上者，原發組受精失敗率高于繼發組，可見原發不孕且不孕年限長的患者，受精失敗的風險更大[3-4]，受精方式的選擇和應用至關重要。原發不孕者不孕年限越長，患者體內存在的精卵結合障礙可能越嚴重[5]，且隨著患者年齡增大，卵子質量降低，自然受精能力降低，因此，部分學者把原發性不孕患者作為直接ICSI或Half-ICSI的指征，雖然受精率可以達到20%～60%[6]，但是卵裂率及優質胚胎率降低，妊娠率及胎兒出生率仍偏低。2003年CHEN等[7]首次提出短時受精聯合早期補救ICSI，可減少受精失敗。但取卵時未成熟的卵母細胞在短時受精時由于脫離了受精環境而無法受精，從而造成短時受精組受精率低[8]，同時由于觀察極體剝除顆粒細胞的時間正是原核形成的關鍵時期，外界的過多刺激可能增加遺傳風險[9]。

綜上所述，對原發不孕(排除男方因素)行IVF助孕的患者中不孕年限達4年以上者，高度警惕有受精失敗的風險，在不影響正常受精率前提，并保證提高優質胚胎率的同時，該患者可以行短時受精結合早期補救ICSI，從而降低受精失敗的風險[10]，既可避免過度ICSI治療，又可選擇性降低受精失敗的風險。