HPLC—CDD法測定以碳酸鈉為助溶劑的頭孢類產品中碳酸鈉的含量

程沫仁

摘 要：方法：采用羧酸基鍵合硅膠為填充劑色譜柱，1.7mmol/L硝酸一0.7rnmol/L吡啶二羧酸溶液一甲醇（59.5：24.5：16）為流動相，非抑制型電導檢測器，流速為1.0ml/min，柱溫為30℃。結論：本法簡便、準確，可用于碳酸鈉為助溶劑的頭孢類產品中碳酸鈉的含量測定。

關鍵詞：頭孢類產品；含量；測定

碳酸鈉是一種易溶于水的白色粉末，溶液呈堿性（能使酚酞溶液變淺紅），但分類屬于鹽，不屬于堿。碳酸鈉是一種重要的有機化工原料，主要用于醫藥、造紙、冶金、玻璃、紡織、染料等工業。國際貿易中又名蘇打或堿灰，廣泛用于生活洗滌、酸類中和以及食品加工等。由于部分頭孢類原料難溶于水，需加碳酸鈉做助溶劑或pH調節劑。目前測定碳酸鈉的方法主要有離子選擇電極、酸堿滴定法與電感耦合等離子體原子發射光譜法、原子吸收分光光度法[1-5]。本實驗采用高效液相色譜法對碳酸鈉為助溶劑的頭孢類產品中的碳酸鈉的進行了含量測定。高效液相-電導法和高效液相-蒸發光散射測定結果基本一致。

1儀器與試藥

1.1儀器：電子天平FA1004型（南京華欣分析儀器制造有限公司）；721可見光分光光度計（四川賽恩思儀器有限公司）；LU230四元低壓梯度液相色譜分析系統（大連依利特分析儀器有限公司）；CO-Ⅳ色譜柱溫箱（恒溫柱箱）（天津琛航科苑科技發展有限公司）；MPC-K6s 加熱制冷型恒溫水浴油浴（北京賽美思儀器設備有限公司）；Genser大型旋轉蒸發儀（北京賽美思儀器設備有限公司）；TH-UP實驗室專用高純水機（滕州市滕海分析儀器有限公司）；ILMVAC真空泵--德國伊爾姆抗化學腐蝕隔膜泵（上海泰坦科技股份有限公司）；BILON-1000C多用途恒溫超聲提取機（上海比朗儀器制造有限公司） ；JASCO V-7000系列紫外可見近紅外分光光度計（沈陽佳士科商貿有限公司）；Waters VanGuard保護柱（沃特世科技（上海）有限公司）。

1.2色譜柱：羧酸基鍵合硅膠為填充劑色譜柱。

1.3對照品：碳酸鈉購自中國藥品生物制品檢定所。

1.4試劑：甲醇（昆山諾普森實驗室用品科技有限公司）、乙腈（昆山諾普森實驗室用品科技有限公司）、冰醋酸（青島雅各化學試劑銷售有限公司）、磷酸二氫鈉（杭州蕭山創益化工儀器有限公司）、三乙胺（濟南匯豐達化工有限公司）、氫氧化鉀（昆山諾普森實驗室用品科技有限公司）、磷酸（杭州蕭山創益化工儀器有限公司）、硝酸（昆山諾普森實驗室用品科技有限公司）、吡啶二羧酸（昆山諾普森實驗室用品科技有限公司）。

1.5試藥：注射用鹽酸頭孢甲肟、注射用硫酸頭孢匹羅、注射用頭孢他啶、注射用鹽酸頭孢替安、注射用頭孢匹胺。

2測定方法確定

2.1色譜條件

依據查閱文獻及考查的結果，確定色譜條件如下。流動相：1.7mmol/L硝酸一0.7rnmol/L吡啶二羧酸溶液一甲醇（59.5：24.5：16），非抑制型電導檢測器，流速：1.0m·min-1。柱溫：30℃。

2.2對照品溶液的制備

精密稱取氯化鈉對照品適量，置容量瓶中，加流動相溶解稀釋，即得。

2.3供試品溶液的制備

注射用鹽酸頭孢甲肟、注射用硫酸頭孢匹羅、注射用頭孢他啶、注射用鹽酸頭孢替安、注射用頭孢匹胺適量，精密稱取，加5毫升流動相，超聲2分鐘，過濾，濾液轉移至10毫升容量瓶內，流動相定容，即得。

2.4專屬性試驗

分別鹽酸頭孢甲肟、硫酸頭孢匹羅、頭孢他啶、鹽酸頭孢替安、頭孢匹胺原料制成陰性樣品，依上述方法測定，結果在碳酸鈉出峰處陰性液無色譜峰，結果陰性試驗沒有干擾，表明本方法專屬性良好。

2.5對照品的線性考察

精密稱取氯化鈉對照品，分別配置濃度為0.01微克/毫升、0.015微克/毫升、0.03微克/毫升、0.035微克/毫升0.04微克/毫升、0.045微克/毫升、0.05微克/毫升、0.055微克/毫升、0.06微克/毫升溶液。分別按照實驗條件測定，記錄色譜峰。以鈉離子峰面積峰面積（Y）為縱坐標，鈉離子濃度（X）為橫坐標，繪制標準曲線，計算回歸方程。結果表明，鈉離子呈良好的線性關系。

2.6準確度試驗

精密稱取已知含量的樣品6份，分別加入一定量的碳酸鈉對照品，上述方法進行測定，計算回收率，平均回收率為99.1%，RSD=0.93%。結果表明此方法的回收率良好。

2.7與高效液相-蒸發光散射檢測法對比

以0.02mol·L-1醋酸銨溶液（用冰醋酸調節pH至4.8）-乙腈（70：30）為流動相，流速為1.5mL·min-1，蒸發光散射檢測，檢測器溫度：40℃，霧化氣體（空氣）壓力：0.35 MPa。

3結論

分別考察乙腈-0.1%冰醋酸（27：73），乙腈-0.02 mol/L磷酸二氫鉀溶液 （pH 6.5）（36：64），磷酸鹽緩沖液（pH4.5）-甲醇-乙腈（80：10：10），乙腈-0.2%（質量分數）磷酸（體積比25：75），甲醇-0.1%磷酸溶液（30：70）；甲醇-0.2%磷酸溶液（40：60），甲醇-異丙醇-乙腈（37∶61∶2）；0.05 mol.L-1磷酸鹽緩沖液-乙腈（體積比為50∶50），0.2%三乙胺溶液（用磷酸調p H至5.3）-乙腈（65∶35），1.7mmol/L硝酸一0.7rnmol/L吡啶二羧酸溶液一甲醇（59.5：24.5：16）不同比例的流動相，結果以1.7mmol/L硝酸一0.7rnmol/L吡啶二羧酸溶液一甲醇（59.5：24.5：16）為流動相，供試品各峰分離效果最好，故選用1.7mmol/L硝酸一0.7rnmol/L吡啶二羧酸溶液一甲醇（59.5：24.5：16）為流動相。本實驗表明此方法可用于碳酸鈉為助溶劑的頭孢類產品中碳酸鈉的含量測定。高效液相-電導法和高效液相-蒸發光散射測定結果基本一致。

參考文獻：

[1]劉英，戴紅，王巨才，胡昌勤.離子選擇電極測定注射用頭孢他啶中碳酸鈉的含量[J].中國抗生素雜志.2001（05）

[2]姚小紅，張滌，柳莉，汪新，張湘英.用電位滴定法測定工業用氫氧化鈉中氫氧化鈉和碳酸鈉的含量[J].現代科學儀器. 2006（04）

[3]晏菊姣，付麗娟.離子色譜法測定注射用頭孢他啶中碳酸鈉的含量[J].藥物分析雜志.2010（07）

[4段旭川.]酸堿滴定法與電感耦合等離子體原子發射光譜法聯合測定混合堿中碳酸鈉和碳酸氫鈉[J].冶金分析.2009（09）

[5]張冬，赫曉軍，苑華，付焱.原子吸收分光光度法測定注射用頭孢他啶中助溶劑碳酸鈉的含量[J].中國藥房. 2011（05）