頭孢呋辛酯片出曲線一致性評價研究

陳洪波

摘 要：建立反相高效液相色譜法測定頭孢呋辛酯片中頭孢呋辛酯的體外溶出度并繪制溶出曲線。方法：采用奧泰公司 C18 色譜柱（284 mm×4.6mm，5μm），0.2mol/L磷酸二氫銨溶液-乙腈-甲醇（60∶5∶35）為流動相，檢測波長為278nm，流速為1.0ml/min，柱溫為30℃。頭孢呋辛酯在0.17～1.02mg·mL-1范圍內呈良好的線性關系。頭孢呋辛酯平均回收率分別為99.1%。結論：本法簡便、準確，可用于頭孢呋辛酯片中頭孢呋辛酯的溶出度測定。

關鍵詞：頭孢呋辛酯片；含量；測定

第二代頭孢菌素類抗生素，適用于兒童咽炎或扁桃體炎，急性中耳炎及膿皰病等[1-3]。溶出度：是指藥物從片劑等固體制劑在規定溶劑中溶出的速度和程度。溶出度是片劑質量控制的一個重要指標，對難溶性的藥物一般都應作溶出度的檢查。本實驗采用反相高效液相色譜法測定頭孢呋辛酯片中頭孢呋辛酯的體外溶出度并繪制溶出曲線。

1儀器與試藥

1.1儀器：LU230四元低壓梯度液相色譜分析系統（大連依利特分析儀器有限公司）；電子天平FA1004型（南京華欣分析儀器制造有限公司）；恒信C-1000柱溫箱（武漢恒信世紀科技有限公司）；IKA RV10數顯型旋轉蒸發儀（上海泰坦科技股份有限公司）；RC806溶出試驗儀（北京中西遠大科技有限公司）；600220液相保護柱（天津琛航科苑科技發展有限公司）；BT-V20A/B高精度恒溫水槽（上海百典儀器設備有限公司）；優普ULUP-I微量分析型超純水器（四川優普超純科技有限公司）；Edwards nXDS10i渦旋式干泵（北京帥恩科技有限責任公司）；JASCO V-7000系列紫外可見近紅外分光光度計（沈陽佳士科商貿有限公司）。

1.2色譜柱：奧泰公司 C18 色譜柱（284 mm×4.6mm，5μm）。

1.3對照品：頭孢呋辛酯 購自中國藥品生物制品檢定所。

1.4試劑：三乙胺（昆山諾普森實驗室用品科技有限公司）、磷酸（昆山諾普森實驗室用品科技有限公司）、叔丁基甲醚（杭州蕭山創益化工儀器有限公司）、乙腈（杭州蕭山創益化工儀器有限公司）、氨水（昆山諾普森實驗室用品科技有限公司）、甲酸（昆山諾普森實驗室用品科技有限公司）、磷酸二氫鉀（昆山諾普森實驗室用品科技有限公司）、磷酸二氫銨（昆山諾普森實驗室用品科技有限公司）、甲醇（昆山諾普森實驗室用品科技有限公司）。

1.5試藥：頭孢呋辛酯片

2測定方法確定

2.1色譜條件

依據查閱文獻及考查的結果，確定色譜條件如下[4-7]。流動相：0.2mol/L磷酸二氫銨溶液-乙腈-甲醇（60∶5∶35）為流動相，檢測波長：278nm，流速：1.0m·min-1。柱溫：30℃。理論板數按頭孢呋辛酯峰計算應不得低于3000。

2.2對照品溶液的制備

精密稱取頭孢呋辛酯對照品適量，置容量瓶中，加流動相制成每1mL含0.5mg的溶液，即得。

2.3頭孢呋辛酯溶出度測定方法

取本品，照溶出度測定法（中國藥典2015版附錄），分別以四種溶劑900毫升為溶出介質，轉速為55r/min，依法操作，經5分鐘時，取溶液2mL，置10mL量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，過濾，按2.1項下的色譜條件，取續濾液10μl，注入液相色譜儀。

2.4精密度試驗

精密稱取頭孢呋辛酯對照品適量，加流動相使溶解，制成濃度為0.5mg·mL-1的供試品溶液。照上述色譜條件，精密吸取10μl，連續進樣6次，記錄峰面積。結果，RSD=0.79%，表明本方法精密度良好。

2.5對照品的線性考察

精密稱取頭孢呋辛酯對照品85mg，置5ml容量瓶中，加入流動相使溶解并稀釋至刻度，搖勻，分別精密吸取0.5、1.5、2.0、2.5、3.0mL，置于5mL量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻。分別精密上述溶液吸取10μL，注人液相色譜儀，依照2.1項下的色譜條件測定，記錄色譜峰。以峰面積（Y）為縱坐標，對照品進樣量（X）為橫坐標，繪制標準曲線，計算回歸方程。結果表明，頭孢呋辛酯在0.17～1.02mg·mL-1范圍內呈良好的線性關系。

3討論

分別考察甲醇-水-三乙胺（18∶85：0.1），乙腈-0.02%甲酸（用氨水調pH至4.0）（30∶70，V/V），0.2%三乙胺溶液（用磷酸調p H至5.3）-乙腈（65∶35），0.01mol/L磷酸鹽緩沖液（pH2.0）—乙腈—叔丁基甲醚（70∶25∶5），，0.2mol/L磷酸二氫銨溶液-甲醇（62∶38），甲醇-乙腈-甲酸-水（30：10：1：59），甲醇-0.067mol.L-1磷酸二氫鉀緩沖溶液（600∶400）（用磷酸調節pH值至4.0），0.2mol/L磷酸二氫銨溶液-乙腈-甲醇（60∶5∶35），0.05mol/L磷酸二氫鉀—乙腈—三乙胺（60∶40：0.01）不同比例的流動相，結果以0.2mol/L磷酸二氫銨溶液-乙腈-甲醇（60∶5∶35）為流動相，供試品各峰分離效果最好，故選用0.2mol/L磷酸二氫銨溶液-乙腈-甲醇（60∶5∶35）為流動相。本實驗表明此方法可用于頭孢呋辛酯片中頭孢呋辛酯的溶出度測定。頭孢呋辛酯片中頭孢呋辛酯的溶出度與參比制劑相當，溶出曲線相似。本法操作簡便，結果準確可靠，可用于本品中頭孢呋辛酯一致性評價。

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