雷公藤多苷片對纈沙坦在大鼠體內藥代動力學的影響

趙俊 徐業 石彥波 黃科 王力勇

[摘要] 目的 研究大鼠合用雷公藤多苷片和纈沙坦后，雷公藤多苷片對纈沙坦藥代動力學的影響。 方法 16只雄性SD大鼠，隨機分為單獨給藥組和聯合給藥組兩組，其中單獨給藥組灌胃纈沙坦（20 mg/kg），聯合給藥組灌胃雷公藤多苷片（10 mg/kg）和纈沙坦（20 mg/kg）。不同時間點取血并采用LC-MS測定纈沙坦的血藥濃度，計算藥代動力學參數。 結果 與單獨給藥組相比，聯合給藥組纈沙坦的最大血藥濃度[（1.57±0.32） vs （1.01±0.28）μg/mL]和血漿曲線下面積[（10.01±0.58） vs （6.82±0.77）mg·h/L]明顯增加（P<0.05），說明纈沙坦的代謝受到明顯抑制。 結論 雷公藤多苷片與纈沙坦聯用之后，會對纈沙坦的藥代動力學產生明顯的影響，本研究對纈沙坦和雷公藤多苷片聯合用藥具有一定的指導作用，可以避免臨床藥物不良相互作用的發生。

[關鍵詞] 纈沙坦；雷公藤多苷片；藥代動力學；藥物相互作用

[中圖分類號] R587.2；R692.9 [文獻標識碼] A [文章編號] 1673-9701（2018）14-0030-04

[Abstract] Objective To study the effect of tripterysium glycosides tablets on the pharmacokinetics of valsartan in rats combined with tripterysium glycosides tablets and valsartan. Methods 16 male Sprague-Dawley rats were randomly divided into two groups： the single administration group and the combined administration group. In the single administration group， the rats were given intragastric administration of valsartan （20 mg/kg） and the combined administered group was given intragastric administration of tripterysium glycosides tablets （10 mg/kg） and valsartan （20 mg/kg）. Blood samples were taken at different time points and plasma concentrations of valsartan were determined by LC-MS. Pharmacokinetic parameters were calculated. Results The maximum plasma concentration of valsartan was[（1.57±0.32） vs （1.01±0.28）μg/mL] and the plasma area under the curve was [（10.01±0.58） vs （6.82±0.77）mg·h/L]， which were significantly increased in the combined administration group combined with the single administration group（P<0.05）， indicating that valsartan metabolism was significantly inhibited. Conclusion Tripterysium glycosides tablets combined with valsartan has a significant effect on the pharmacokinetics of valsartan. This study plays a guiding role in the combined administration of valsartan and tripterygium glycosides tablets， which can avoid the occurrence of clinical adverse drug interactions.

[Key words] Valsartan； Tripterysium glycosides tablets； Pharmacokinetics； Drug interactions

纈沙坦是一種特異性的血管緊張素Ⅱ（AT1）受體拮抗劑，也是繼氯沙坦后又一個應用于臨床的非肽類AT1受體拮抗劑，在調節全身血壓、維持電解質體液平衡方面起關鍵作用[1]。

雷公藤多苷片（TGT）的主要活性成分是雷公藤多苷，藥理研究表明其具有免疫抑制、抗炎、抗腫瘤等活性[2-4]。臨床上雷公藤多苷片主要用于治療類風濕、腎病等多種自身免疫性疾病[5]，常與纈沙坦合用治療糖尿病腎病或腎移植后蛋白尿[6-8]，但雷公藤多苷片和纈沙坦共同服用之后是否會產生藥物-藥物相互作用目前并不清楚。

因此，本研究旨在觀察共同服用纈沙坦及雷公藤多苷片后，雷公藤多苷片對纈沙坦體內藥代動力學的影響，現報道如下。

1 材料與方法

1.1 試藥

纈沙坦（純度>98%）和厄貝沙坦（純度>98%）（中國藥品生物制品檢定所）。雷公藤多苷片（上海復旦復華藥業有限公司，10 mg，國藥準字Z31020415）。

1.2 纈沙坦血漿濃度測定

色譜柱：Waters Xbridge C18色譜柱（3.0×100 mm，3.5 μm，USA）。進樣量：5 μL，流動相：水（含0.1%的HCOOH）：甲醇（60：40，v：v），流速：0.6 mL/min。

采用SIM（Positive）模式進行離子監測。其中纈沙坦：m/z 436.1，厄貝沙坦：m/z 429.2。碎片電壓：110 V，干燥器流速：11.0 L/min，霧化器壓力：40 psi，干燥器溫度：350°C，毛細管電壓：3500 V。

1.3血漿樣品前處理方法

向100 μL血漿樣品中加入20 μL甲醇和180 μL含有內標厄貝沙坦（100 ng/mL）的乙腈溶液，渦旋30 s，12000 rpm離心10 min，取上清液進樣分析。

1.4標準曲線制備

精密稱量纈沙坦置于容量瓶中，加入適量的乙腈制成濃度為2 mg/mL的樣品溶液。精密稱取一定量的內標厄貝沙坦于容量瓶中，加入適量的乙腈配制濃度為200 ng/mL內標溶液。采用乙腈將纈沙坦稀釋成（50～10000）ng/mL濃度梯度的溶液，然后取20 μL加入到含有100 μL空白甲醇的EP管中，加入180 μL內標溶液，渦旋30 s，12000 rpm離心10 min，取上清進樣分析。按上述方法配制質控樣品溶液，其中纈沙坦為20、200、1600 ng/mL。樣品于-4°C保存備用。

1.5方法學考察

1.5.1 選擇性 將含有纈沙坦的待分析血漿樣本與來源于不同大鼠的6批血漿樣本的色譜圖進行比對，以觀察血漿樣本中是否有其他成分存在干擾纈沙坦的檢測。

1.5.2 標準曲線及最低檢測限 采用纈沙坦的峰面積與厄貝沙坦峰面積之比對應濃度作圖，計算線性回歸方程（最小二乘法）。將纈沙坦的信噪比為10定為最低定量限（準確度和精密度≤20%）。

1.5.3 準確度和精密度 日內精密度和準確度采用24 h內連續五次進樣的樣品進行計算；日間精密度和準確度采用在連續3 d內進樣質控樣品進行計算。

1.5.4 提取回收率和基質效應 提取回收率通過比較加纈沙坦血漿經過前處理之后所得的峰面積與前處理之后血漿加纈沙坦測定的峰面積的比值來計算；基質效應通過比較前處理之后血漿加纈沙坦測定的峰面積與同濃度的乙腈樣品溶液的峰面積比值來計算。

1.5.5 穩定性 穩定性進行如下考察：短期穩定性（室溫放置4 h）、進樣器穩定性（進樣器放置24 h）、三次凍融循環（-40°C凍存，室溫下融化）及長期穩定性（-40°C凍存15 d）。

1.6動物實驗

雄性SD大鼠16只，體重（250±20） g，由浙江中醫藥大學實驗動物中心提供[合格證號：SCXK（滬）2012-000]。大鼠自由攝食飲水，適應性飼養1周[25℃、（60±5）%濕度]。實驗前禁食。實驗前將大鼠隨機分為單獨給藥組和聯合給藥組兩組，每組8只，其中單獨給藥組灌胃纈沙坦20 mg/kg；聯合給藥組灌胃雷公藤多苷片（10 mg/kg）和纈沙坦（20 mg/kg）。

于不同時間點（0.083、0.25、0.5、1、2、3、4、6、8、10、24 h）眼眶取血（250 μL）置于涂有肝素的EP管中，離心（3500 rpm、5 min）取上清，-40°C保存。

1.7 統計學方法

采用Das 3.0軟件計算藥代動力學參數。采用t檢驗進行分析，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1選擇性

如圖1所示，為空白血漿及含有纈沙坦及內標厄貝沙坦的血漿樣品色譜圖，結果表明，在待測樣品出峰位置沒有其他成分干擾樣品的檢測，表明本方法具有良好的選擇性。

2.2校正曲線及最低檢測限

纈沙坦的標準曲線方程為y=0.0025x-0.0358（y為濃度，x為峰面積），其相關系數大于0.999，顯示在50-1000 ng/mL濃度范圍內，纈沙坦線性關系良好，最低定量限為10 ng/mL。

2.3精密度和準確度

如表1所示，纈沙坦的精密度不超過10%，而纈沙坦的準確度在-9.28%到8.39%范圍內。上述結果表明本方法的精密度和準確度滿足要求。

2.4提取回收率和基質效應

纈沙坦的基質效應在91.5%～96.7%范圍之內，表明本方法無明顯的基質效應干擾。纈沙坦提取回收率在88.64%～92.5%范圍之內（RSD<15%），結果表明提取回收率良好。

2.5穩定性

穩定性結果表明所有質控樣品的穩定性在85%～115%范圍之內。

2.6藥代動力學研究

本研究考察了同時口服雷公藤多苷片和纈沙坦之后，雷公藤多苷片對纈沙坦的體內藥代動力學的影響。如圖2所示，為纈沙坦的藥時曲線。

纈沙坦的藥代動力學參數采用Das 3.0軟件進行計算。如表2所示，為纈沙坦的藥代動力學參數。從表2可以看出，同時服用兩藥后，其藥代動力學參數發生明顯變化。其中兩藥聯用組纈沙坦的Cmax[（1.57±0.32） vs （1.01±0.28）μg/mL]和AUC（0-t）[（10.01±0.58） vs （6.82±0.77）mg·h/L]明顯增加（P<0.05），說明同時服用兩藥后，雷公藤多苷片會對纈沙坦的藥代動力學參數發生明顯影響。

3 討論

目前，隨著中草藥的廣泛應用，中藥-西藥之間的相互作用問題日益凸顯，而代謝酶和轉運體是影響藥物體內處置過程的重要因素，其表達和功能的改變常常引起藥代動力學的變化，是藥物-藥物相互作用的主要靶點[9]。

細胞色素P450（CYP450）位于胞漿內質網膜上，主要存在于肝臟中，此外，在胃腸道（特別是小腸中）、肺、腎和胎盤也有表達。CYP450是重要的藥物Ⅰ相代謝酶，可以催化多種外源性化合物的氧化和還原代謝，人體內約有75%的藥物代謝通過CYP450酶進行，對解釋藥物在機體內的清除過程有著非常重要的意義。CYP3A4是表達量最大的異構體，約占人體肝臟CYP450的30%～40%，有近50%的藥物通過CYP3A4進行代謝。

上述實驗結果表明，同時服用兩藥后，雷公藤多苷片會對纈沙坦藥代動力學行為產生明顯的影響，主要表現在抑制纈沙坦的體內代謝，從而增加其血藥濃度，增加其系統暴露。纈沙坦為肝臟代謝酶CYP3A4的代謝底物[10]，而雷公藤多苷片中的主要活性成分雷公藤甲素和雷公藤紅素會抑制CYP3A4的活性[11-12]。因此，共同服用雷公藤多苷片和纈沙坦之后，雷公藤多苷片中的主要活性成分可能會抑制纈沙坦在肝臟內的代謝，導致纈沙坦代謝清除減慢，導致其在體內的血藥濃度升高。

多篇文獻報道，雷公藤多苷片與一些臨床常用藥物聯用之后，會導致藥物-藥物相互作用的產生[13，14]。主要原因是雷公藤多苷片中的主要活性成分會對肝臟藥物代謝酶的活性產生抑制作用，導致聯用藥物代謝緩慢，血藥濃度增加，對于治療窗較寬的藥物其療效會增加，但對于治療窗狹窄，有一定毒性藥物，需注意密切監視治療藥物濃度，以防止毒性反應的發生。

前期研究者對纈沙坦與中藥之間可能產生的藥物-藥物相互作用進行了大量研究[15， 16]。槲皮素、丹參片等常用中藥與纈沙坦同時服用會對纈沙坦的體內藥代動力學產生明顯的影響。因此當纈沙坦與中藥聯用時，一定要注意兩種藥物之間可能產生的相互作用，以避免不良藥物-藥物相互作用的發生。

總之，同時服用雷公藤多苷片和纈沙坦之后，會導致纈沙坦在體內的血藥濃度增加，從而能增強其臨床療效，但是臨床醫生應根據病情需要適當調整給藥劑量，以免導致藥物血藥濃度過高，造成毒性反應的發生。

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（收稿日期：2018-01-22）