高壓氧對缺氧缺血性腦損傷新生大鼠腦皮質線粒體生物合成的影響

荊翠翠，張 英，周 茉，劉媛媛，張紅英

中樞神經系統高度依賴線粒體氧化磷酸化產能，因而線粒體成為腦組織缺血缺氧主要受累細胞器。研究表明，缺血缺氧導致線粒體呼吸鏈電子傳遞過程中電子漏增加，大量氧自由基產生超過了抗氧化酶清除能力，導致線粒體功能受損[3]。張小燕等[4]證明，高壓氧可改善新生大鼠缺血缺氧后腦皮質細胞線粒體膜電位。值得注意的是，細胞能量水平由線粒體質量和數量共同決定，后者受到線粒體生物合成(mitochondrial biogenesis)的調控，是線粒體質量控制的關鍵環節[5]。本研究擬觀察高壓氧是否可通過改善線粒體生物合成提高新生大鼠大腦皮質對缺氧缺血的抵抗力，并探討相關機制。

1 材料與方法

1.1 材料 新生7日齡健康雄性Wistar大鼠48只，體重11～18 g，由北京維通利華實驗動物技術公司提供。隨機分為三組，假手術組(Sham)，HIBD模型組(HIBD)和高壓氧治療HIBD組(HBO+HIBD)，每組16只。

1.2 HIBD模型制備 HIBD和HBO+HIBD兩組動物參照文獻制備HIBD模型。大鼠乙醚麻醉，仰臥位固定，頸部正中線切開，游離左側頸總動脈，雙線結扎后在中間剪斷，關閉切口。術后1 h將大鼠放入37 ℃恒溫缺氧密閉箱，箱內持續通氮氧混合氣體(92% 氮氣和8%氧氣)。缺氧2 h后取出，由母鼠喂養，直至21日齡。Sham組大鼠不結扎和剪斷左側頸總動脈，其余操作同HIBD模型。

1.3 高壓氧治療 HBO+HIBD組動物在HIBD建模后30 min放入高壓氧艙(氧濃度85%～90%，壓力為2個標準大氣壓)內吸氧90 min。每隔24 h入艙治療一次，連續治療7次。HBO治療后24 h，每組動物隨機抽取8只，斷頭處死，冰面上快速分離雙側腦皮質，凍存于-80 ℃用于Western檢測。……