血小板及紅細胞參數聯合篩選地中海貧血基因攜帶者的價值分析

黃秀麗，張振洪，陳曉玲，梁春旭

(1.東莞市樟木頭醫院，廣東 東莞 523633；2.東莞市兒童醫院，廣東 東莞 523325)

地中海貧血(簡稱地貧)是由于珠蛋白基因異常，導致血紅蛋白的α鏈和β鏈珠蛋白的比例失衡，從而引起的一種慢性進行性溶血性貧血。平均紅細胞體積(mean corpuscular volume，MCV)和平均紅細胞血紅蛋白含量(mean corpuscular hemoglobin，MCH)是目前篩選地貧患者最常用的指標，但該病與缺鐵性貧血的鑒別存在困難[1]。研究表明，地貧兒童的血小板計數(platelet count，PLT)升高，而且其活性也升高[2]，但該研究未對平均血小板體積(mean platelet volume，MPV)和血小板分布寬度(platelet distribution width，PDW)等參數進行分析。本文通過分析學齡前非重型地貧兒童的紅細胞及血小板參數，探討這些參數在篩選地貧基因攜帶者中的意義，現報道如下。

1研究對象與方法

1.1研究對象

選擇2018年6月至2019年10月期間在東莞市樟木頭醫院體檢的3～6歲健康兒童作為研究對象，排除標準：①急、慢性感染性疾病患兒；②既往有血液系統疾病病史者；③因疾病需要正在服用鐵劑及維生素制劑者；④患有遺傳代謝性疾病者。共585例符合上述標準的研究對象完成檢測。為避免缺鐵對紅細胞參數的影響，本研究排除38例血清鐵蛋白<30μg/L的兒童[3]。最終共有547例兒童的數據納入統計學分析，其中男310例，女237例，平均年齡(4.54±1.02)歲，按是否攜帶地貧基因分為研究組(124例)和對照組(423例)。所有研究對象的監護人簽署了書面知情同意書，并且該研究已通過東莞市樟木頭醫院倫理委員會審核并批準實施。

1.2檢測方法

所有兒童均抽取空腹靜脈血，分別送檢血常規、血清鐵蛋白和地貧基因檢測。五分類血常規采用全自動血細胞分析儀檢測；血清鐵蛋白采用羅氏602電化學發光儀檢測；采用跨越斷裂點聚合酶鏈反應(gap-PCR)技術和DNA反向點雜交芯片技術(reverse dot blot,RDB)檢測常見的α和β地貧基因突變或缺失[4]。

1.3統計學方法

2結果

2.1一般情況分析

最終納入547例兒童，共篩選出地貧基因攜帶者124例，攜帶率為22.67%。按是否攜帶地貧基因分為研究組(124例)和對照組(423例)，兩組兒童的性別構成、年齡及血清鐵蛋白(serum ferritin，SF)等資料比較差異均無統計學意義(均P>0.05)，見表1。

表1 兩組兒童性別構成、年齡和血清鐵蛋白比較

2.2兩組兒童紅細胞參數及血小板參數比較

研究組兒童的紅細胞壓積(hematocrit，HCT)、血紅蛋白濃度(hemoglobin，HGB)、MCV、MCH、平均紅細胞血紅蛋白濃度(mean corpuscular-hemoglobin concentration，MCHC)均低于對照組，紅細胞計數(red blood cell count,RBC)、PLT、PDW均高于對照組，差異均有統計學意義(均P<0.05)，而兩組兒童的MPV比較差異無統計學意義(P>0.05)，見表2。

表2 兩組兒童紅細胞及血小板參數的比較

2.3單因素篩選地貧基因攜帶者的ROC曲線分析

MCV和MCH下降篩選地貧基因攜帶者的準確性較高(AUC分別為0.924、0.949，均>0.900)，而RBC升高、HGB及MCHC下降篩選地貧基因攜帶者的準確性一般(AUC分別為0.877、0.752、0.784，0.7000.05)。各指標聯合預測的AUC為0.939，見表3。

表3 各參數篩選地貧基因攜帶者的ROC曲線參數

3討論

地貧是最常見的遺傳性溶血性貧血，我國東南部也是高發地區之一。通過對地貧高危夫婦進行婚檢、產檢及胎兒的產前基因檢測，已經很大程度地降低了重型地貧患兒的出生率[5]。近年的研究表明，非輸血依賴型的地貧、鐵過載相關的各種疾病[6]，包括內分泌疾病的發病率[7]也會明顯高于正常人群，因此，有必要篩查地貧基因攜帶者，以便早期進行指導和干預[8]。有研究顯示血常規檢測結果中如MCV<80fL或(和)MCH<27pg，是目前篩選地貧基因攜帶者的可疑篩選指標，而地貧基因檢測是診斷地貧基因攜帶者及其類型的“金標準”[9]。

3.1地貧基因攜帶者紅細胞及血小板參數變化

本研究結果顯示，地貧基因攜帶者的HGB、HCT、MCV、MCH、MCHC均低于正常兒童，而RBC則高于正常兒童，這些均符合地貧患兒紅細胞參數異常的表現。另外，因為地貧是一種遺傳性溶血性貧血，紅細胞體積減小，同時可能存在部分紅細胞碎片，而自動血液分析儀是根據電阻抗原理來進行血細胞分類和計數，因此很容易將體積與血小板相近的小紅細胞或者紅細胞碎片誤認為“體積較大的血小板”而進行計數，從而導致PLT升高，同時PDW也隨之增大。采用熒光染色或直接鏡檢等方法，能有效排除小紅細胞和紅細胞碎片對PLT的干擾[10]。

3.2紅細胞及血小板參數單獨及聯合篩查地貧基因攜帶者的價值

受試者工作特征(receiver operating characteristic，ROC)曲線下面積(area under the ROC curve，AUC)是目前公認的連續值醫學診斷試驗評價指標之一，已被廣泛應用于確定地貧的篩查指標[11]。本研究表明，RBC、HGB、HCT、MCV、MCH、MCHC、PLT和PDW等參數篩查地貧基因攜帶者的AUC均大于0.600，均可用于篩查地貧基因攜帶者，這些指標的優越性排序：MCH>MCV>RBC>MCHC>HGB>PDW>HCT>PLT，而聯合預測的AUC為0.939，介于MCH和MCV之間，因此，我們認為使用MCH和(或)MCV進行篩查已經足夠，沒有必要聯合血小板及紅細胞參數進行預測和篩查。

3.3 MCV和MCH篩查學齡前地貧基因攜帶者的界值

本研究還發現，MCV和MCH篩查學齡期兒童地貧攜帶者的最優截斷值分別是80.35μL和25.15pg，與目前推薦的指標不同，可能是由于兒童紅細胞的正常參考范圍存在年齡、性別、種族甚至地域差別[12]。在此截斷值水平上，MCV和MCH篩選地貧基因攜帶者的靈敏度分別84.70%、86.30%，特異度分別為90.30%、98.10%，準確率分別為90.30%、95.60%，是優良的篩查指標。

綜上所述，血小板及紅細胞參數均可用于篩查地貧基因攜帶者，MCV或MCH單獨篩查地貧基因攜帶者的效能較好，與聯合預測的結果相似。如果篩選前排除缺鐵性貧血，那么MCV<80.35μL及MCH<25.15pg可能是更適合于學齡前地貧基因攜帶者的篩查指標。但是本研究是單中心研究，樣本量較小，仍需要進行大樣本多中心的研究進行驗證。