液相色譜-串聯質譜法快速測定蛇足石杉中的石杉堿甲

李東芹，孫 玲

(華中農業大學作物遺傳改良國家重點實驗室，湖北武漢 430070)

蛇足石杉，又名千層塔，為石杉科多年生蕨類植物，民間多用來治療跌打損傷、毒蛇咬傷和燒燙傷等。20世紀80年代，中國醫藥研究工作者從蛇足石杉中分離出強生物活性的石杉堿甲，并引發其藥用價值的研究高潮[1]。石杉堿甲是一種高效乙酰膽堿酯酶抑制劑，具有開發記憶效率的功能。臨床用于治療老年癡呆癥具有確切的療效[2-3]，還有文獻報道可用于重癥肌無力的治療[4-5]。由于人工合成很難得到純化學活性的石杉堿甲，因此從石杉科植物中提取還是其主要來源。目前為止，石杉中石杉堿甲基本都是用高效液相色譜法[6-8]來測定，液質聯用法鮮見報道，有少量血槳中石杉堿甲液質分析的報道[9-10]。液相色譜法耗時長、試劑用量大、靈敏度低、易受其他物質干擾，對前處理工作要求較高，分析誤差大。受前人研究的啟發[11-12]，筆者建立了蛇足石杉中石杉堿甲的液相色譜-串聯質譜方法，樣品經液相色譜分離后進入質譜儀，用石杉堿甲的特征離子對243.2 > 210.1來進行定量測定，為批量定量分析石杉堿甲提供了更好的選擇。

1 材料與方法

1.1儀器API 4000 Qtrap 串聯三重四級桿線性離子阱質譜儀(美國AB Sciex公司)；LC-20AD高效液相色譜儀(日本Shimadzu公司)；氮吹儀(OA-SYS，N-EVPTM111型)；Milli-pore 超純水儀(美國Millipore公司)。

1.2試材甲醇(色譜純)；超純水；石杉堿甲(含量≥98%，Mw=242.3)；乙酸(色譜純)；1 mL醫用注射器；0.22 μm微孔濾頭(上海安普)。蛇足石杉采自安徽，為華中農業大學植科院姚明鏡老師提供。