酵母多糖對斷奶仔豬生長性能、免疫功能和腸道菌群的影響

張金寶，銀 花，舍 旺

（扎蘭屯職業學院，內蒙古呼倫貝爾 162650）

斷奶仔豬的飼養是養豬生產中的關鍵階段。如今集約化養殖過程中，一般會對仔豬進行早期斷奶，以提高母豬繁殖效率，進而改善企業經濟效益。但由于仔豬各方面發育都還不完善，過早斷奶會帶來一系列應激反應，引起仔豬持續性腹瀉、食欲減退，造成其生長緩慢，嚴重時還會導致其死亡，給企業帶來很大的經濟損失（鄭文金，2017）。抗生素可以抑制病原菌生長，具有顯著的抗菌效果，在畜禽飼料中添加抗生素可以起到預防疾病、促進生長等功效，在畜牧生產中具有廣泛應用（曹麗萍等，2009）。但在畜牧生產中，對抗生素添加劑的應用很不規范，長期過量使用抗生素帶來嚴重問題，包括抗生素在畜產品和環境中的殘留，細菌多重耐藥性的產生、環境污染等（鞏霞等，2007；趙青等，2005）。歐美等發達國家已陸續禁止飼用抗生素的使用，我國農業部也規定從2016年11月1日起禁止硫酸粘桿菌素作為飼料添加劑的使用，尋找合適的抗生素替代品是當前研究的熱點。

酵母多糖是一類功能性多糖復合物，主要成分是β-葡聚糖和甘露寡糖，由酵母細胞發酵培養的菌體經自溶、酶解等生物破壁技術分離制得（崔藝燕等，2018）。已有許多研究表明，寡糖類物質作為飼料添加劑使用，有調節動物腸道菌群的作用，并能提高機體免疫功能（黃鑫瑋等，2015；李夢云等，2015；郭芳等，2009）。酵母多糖作為一種天然高效的生物活性物質，在畜牧生產中應用得到研究者的極大關注。本試驗旨在研究酵母多糖在日糧中的添加效果，重點關注其對仔豬生長性能、免疫功能和腸道菌群的影響，探討酵母多糖替代抗生素的應用效果，為尋找可靠的替抗產品提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 試驗材料 酵母多糖：主要成分為β-葡聚糖（39%）和甘露寡糖（23%），購自拓普生物科技有限公司；抗生素（金霉素）為獸用藥，試驗豬場自備。

1.2 試驗設計 選取胎次、體重、健康狀況相近，21日齡斷奶的斷奶仔豬（杜×長×大）72頭，隨機分為3組，每組24頭仔豬，分4個豬圈飼養，每個豬圈6頭。對照組（CT）仔豬只飼喂基礎日糧，試驗1組（抗生素組，AT）在基礎日糧中添加100 mg/kg的金霉素，試驗2組（酵母多糖組，YT）在基礎日糧中添加0.3%的酵母多糖。整個試驗為期28 d。

1.3 試驗日糧 參照美國NRC（2012）豬的營養需要配制斷奶仔豬基礎日糧，采用玉米-豆粕型日糧，其原料組成和營養水平見表1。

表1 基礎日糧組成及營養水平

1.4 飼養管理 仔豬飼養在保育舍內，豬圈配有乳頭式飲水器、采用半漏縫地板。試驗過程中采用少喂勤添的策略，每天上午和下午各飼喂2次，保證仔豬自由采食和飲水。仔豬圈舍的清潔、免疫接種程序等按照試驗所在豬場的常規管理進行。

1.5 測定指標和方法

1.5.1 生長性能測定 試驗開始后認真觀察仔豬每天的采食、活動及腹瀉情況。仔豬腹瀉情況根據以下公式進行計算：

腹瀉率/%=腹瀉仔豬頭次/試驗仔豬總頭次×100。

試驗開始（第1天）和結束時（第28天）對仔豬稱重，并記錄飼料消耗情況。分別計算斷奶仔豬的平均日增重（ADG）、平均日采食量（ADFI）和料重比（F/G）。

1.5.2 免疫功能指標測定 試驗結束時（第28天），每個豬圈隨機選取2頭仔豬，保定后經前腔靜脈采血，制得血清后進行免疫指標測定。血清中總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）用相應的檢測試劑盒測定，免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白M（IgM）和免疫球蛋白A（IgA）均采用雙抗體夾心法，用豬的ELISA試劑盒測定。

1.5.3 腸道菌群計數 試驗結束時，每個重復隨機挑取1頭健康仔豬屠宰，取盲腸內容物樣品冷凍保存。稱取1 g盲腸內容物，加入9 mL滅菌后預冷的生理鹽水，混合均勻，配成10-1稀釋液；之后，再吸取1 mL 10-1的稀釋液，加入9 mL滅菌后預冷的生理鹽水均勻混合，配成10-2稀釋液；據此依次進行10-3～10-7稀釋液的配制。

將配置好的梯度稀釋液（10-1～10-7）按照需要檢測的菌種分別接種于相應培養基中，進行腸道菌群計數。（大腸桿菌用伊紅美藍培養基，乳酸桿菌用MRS培養基，沙門氏菌用HE培養基，雙歧桿菌用BBL培養基）。大腸桿菌和沙門氏菌的培養條件是37℃有氧培養24 h；乳酸桿菌和雙歧桿菌的培養條件是37℃厭氧培養48 h（王繼成等，2006）。每個梯度稀釋液進行3次細菌培養試驗，結果取3次計數的平均值，用每克腸道內容中所含菌落總數的對數表示（張旭暉等，2012）。1.6 數據處理與分析 試驗所得結果用Excel軟件進行初步整理，采用SPSS軟件的 One-way ANOVA進行統計分析，多重比較采用Duncan’s檢驗，P＜0.05為差異顯著，P＜0.10被認為有顯著性趨勢。

2 結果

2.1 酵母多糖對斷奶仔豬生長性能的影響 由表2可知，日糧中添加抗生素和酵母多糖顯著提高了斷奶仔豬試驗末期的體重（P＜0.05）。相應的，抗生素和酵母多糖組斷奶仔豬的平均日增重和平均日采食量也顯著高于對照組（P＜0.05），但抗生素和酵母多糖兩個處理組間差異不顯著（P＞0.05）。料重比在3個試驗組間無顯著性差異（P＞0.05）；與對照組相比，抗生素組斷奶仔豬腹瀉率降低了49.9%，酵母多糖組斷奶仔豬腹瀉率降低了74.9%，兩者都具有降低仔豬腹瀉率的趨勢（P=0.062），但未達到差異顯著性水平（P＞ 0.05）。

表2 酵母多糖對斷奶仔豬生長性能的影響

2.2 酵母多糖對斷奶仔豬免疫功能的影響 由表3可知，對照組、抗生素和酵母多糖組斷奶仔豬血清中總蛋白、白蛋白水平間無顯著性差異（P＞0.05）。各試驗組斷奶仔豬血清中IgA和IgG水平也無明顯變化（P＞0.05），但與對照組和抗生素組相比，日糧中添加酵母多糖顯著提高了斷奶仔豬血清中IgM水平（P＜0.05）。

表3 酵母多糖對斷奶仔豬血清免疫指標的影響???????????????????????????????????g/L

2.3 酵母多糖對斷奶仔豬盲腸微生物菌群的影響 由表4可知，日糧中添加抗生素和酵母多糖顯著降低了斷奶仔豬盲腸中大腸桿菌和沙門氏菌的數量（P＜0.05）；與對照組相比，日糧中添加抗生素顯著降低了盲腸中雙歧桿菌和乳酸桿菌的數量（P＜0.05），但添加酵母多糖與對照組相比差異不顯著（P＞0.05）。

表4 酵母多糖對斷奶仔豬盲腸微生物的影響???????????????????????????????lg?CFU/g

3 討論

由于母乳富含的免疫球蛋白、抗體及其他生長因子等成分，可以補充哺乳階段仔豬自身免疫力的不足，有效抑制病原微生物的生長，因而，哺乳仔豬的發病率相對較低。仔豬斷奶以后，腸道發育尚未完善，難以有效消化飼料中的各種養分，此外，仔豬的免疫系統也不完善，缺乏對疾病和不良環境的抵抗力（陳云等，2015）。此外，飼料原料中常常含有一些抗原物質，容易損傷仔豬腸道，引起嚴重的過敏反應；某些病毒（流行性腹瀉病毒、輪狀病毒等）還會引起繼發性感染，損害腸道組織結構的完整性，降低對營養物質的吸收能力，造成仔豬持續性的腹瀉，從而嚴重影響仔豬生長（吳錫愛，2017）。抗生素可以有效殺滅腸道病原菌，在仔豬飼料中添加抗生素可以有效改善仔豬腹瀉狀況，提高飼料營養物質的消化吸收，促進仔豬生長（尹富貴等，2007）。

已有大量的研究證實，在豬日糧中添加酵母多糖可以減少仔豬腹瀉、降低發病率、提高生長性能。游金明等（2010）研究表明，斷奶仔豬日糧中添加甘露寡糖可以顯著提高平均日增重和平均日采食量，降低料重比；許龍飛等（2016）研究表明，日糧中添加0.1%酵母細胞壁多糖可以提高斷奶仔豬的日增重，并降低試驗期間仔豬的死亡率；劉寧等（2017）研究表明，霉變飼料中添加0.1%酵母細胞壁可以顯著提高仔豬飼料消化率、腸道淀粉酶、蛋白酶和脂肪酶的活性。在本試驗中，與對照組相比，斷奶仔豬飼料中添加抗生素和酵母多糖顯著提高了平均日增重和平均日采食量，并降低仔豬的腹瀉率，這與賀琴等（2016）的研究結果一致，表明酵母多糖具有與抗生素類似的促生長效果，顯示出良好的替抗前景。

在本試驗中，添加酵母多糖對斷奶仔豬免疫性能指標的影響并不明顯，但可以觀察到血清IgM水平的顯著提高，這與徐杰等（2018）的結果比較相似。血清免疫球蛋白（IgA、IgG、IgM）是動物體內體液免疫應答的主要信號分子，其濃度可以反映機體體液免疫功能。本試驗結果表明，酵母多糖有提高仔豬免疫功能的作用，但效果不理想，這可能與試驗條件、添加劑量及仔豬狀況有關，有待于進一步研究。

仔豬早期斷奶時，腸道發育還未完善，面臨眾多應激，不僅會對腸道物理結構造成損失，還會引起腸道微生物紊亂，從而影響仔豬健康生長（董曉麗等，2013）。酵母多糖的主要成分包括甘露寡糖和β-葡聚糖，它們作為生物活性物質是酵母多糖功能的體現。有研究表明，甘露寡糖抑制大腸桿菌、沙門氏菌等病原菌的增殖，主要是通過競爭性吸附作用，但同時還可以促進乳酸桿菌、雙歧桿菌等有益菌的增殖（黃鑫等，2014）。在本試驗中，日糧添加抗生素和酵母多糖均可以顯著降低斷奶仔豬盲腸中有害菌大腸桿菌和沙門氏菌的數量，但抗生素還顯著降低了有益菌雙歧桿菌和乳酸桿菌的數量，而酵母多糖則不影響這兩種有益菌的生長，這表明酵母多糖在調節腸道微生物菌群方面具有一定優勢。

4 小結

日糧中添加酵母多糖可以顯著提高斷奶仔豬的平均日增重和平均日采食量，降低仔豬腹瀉率，并能在一定程度上改善仔豬免疫功能；與抗生素相比，酵母多糖可以抑制腸道中有害菌大腸桿菌、沙門氏菌的增殖，卻不會影響有益菌雙歧桿菌、乳酸桿菌的生長，具有更好的調節腸道微生物菌群的作用，是一類具有較大潛力的抗生素替代品。