血小板反應蛋白-1和血小板活化因子在川崎病中的變化及意義

王楊記， 史衛群， 王騫， 王艷， 呂進泉

(江蘇大學附屬醫院兒科， 江蘇 鎮江 212001)

川崎病是一種可累及多器官和系統的血管炎，發病原因目前仍不明確，高發年齡為5歲以下兒童。心血管系統損害是川畸病的嚴重并發癥，部分可發展為心肌梗死[1]，目前已成為嬰幼兒后天性心臟病的常見原因，并有逐年上升趨勢[2]。血小板增高為川崎病的顯著特征，但目前有關血小板反應蛋白-1(thrombospondin-1，TSP-1)、血小板活化因子(platelet activating factor，PAF)與川崎病關系的研究報道尚少，因此本文檢測了川崎病患兒血漿TSP-1、PAF的變化，現報告如下。

1 對象與方法

1.1 一般資料

選取2014年10月至2017年4月在本院確診并進行治療的川崎病患兒53例作為川崎病組，入組時按美國心臟協會2017年川崎病診斷標準[3]重新確認診斷。其中男34例，女19例；年齡11月～7歲，平均2.6歲，確診時熱程4～8 d。急性期(起病1周內)血小板數量平均為402.6×109/L，恢復期(起病后5～6周)為602.6×109/L。確診后在病程第4～9天予人血丙種球蛋白1 g/(kg·d)靜脈滴注，連續使用2 d；同時口服阿司匹林。采用心臟超聲檢測患兒冠狀動脈內徑，根據冠狀動脈有無擴張分成冠狀動脈損傷組32例，非冠狀動脈損傷組21例。冠狀動脈損傷的診斷標準：≤5歲的嬰幼兒最大絕對管腔內徑>3 mm及5歲以上最大絕對管腔內徑>4 mm定義為冠狀動脈擴張，任何節段冠狀動脈管腔內徑大于毗鄰節段的1.5倍定義為冠狀動脈瘤[4]。冠狀動脈損傷組中，29例為冠狀動脈擴張，3例為小的冠狀動脈瘤。選取20例健康兒童作為對照組，其中男13例，女7例, 年齡9月～8歲，平均2.4歲。川崎病組與對照組年齡及性別間差異均無統計學意義(P均>0.05)。

1.2 方法

53例川崎病患兒于急性期和恢復期抽取清晨空腹靜脈血，20例健康兒童在體檢當天空腹抽取靜脈血。留取靜脈血3 mL，用枸櫞酸鈉抗凝，低速離心15 min，留取血漿置于-80 ℃冰箱備檢。按照ELISA試劑盒(武漢純度生物科技有限公司)說明書分別檢測TSP-1、PAF含量。

1.3 統計學分析

2 結果

ELISA檢測結果經分析顯示，川崎病患兒急性期TSP-1濃度比對照組明顯升高(P<0.05)；恢復期較急性期顯著下降(P<0.05)，與對照組比較差異無統計學意義(P>0.05)。川崎病患兒急性期PAF含量顯著高于恢復期及對照組(P均<0.05)，恢復期血漿PAF含量亦顯著高于對照組(P<0.05)。見表1。

冠狀動脈損傷組患兒血漿TSP-1、PAF的含量見表2。無論是急性期還是恢復期，冠狀動脈損傷組的TSP-1濃度與非損傷組間差異均無統計學意義(P均>0.05)。急性期冠狀動脈損傷組PAF明顯高于非損傷組(P<0.05)；恢復期冠狀動脈損傷組的PAF含量與非損傷組間的差異無統計學意義(P>0.05)。

組別nTSP-1(μg/L)PAF(mU/mL)急性期53186.72±76.56a,b406.20±70.27a,b恢復期53124.98±17.89262.32±65.06a對照組20112.83±17.67189.36±37.16F值24.82110.24P值<0.05<0.05

a:P<0.05，與對照組比較；b:P<0.05，與恢復期比較

組別nTSP-1(μg/L)PAF(mU/mL)急性期恢復期急性期恢復期冠狀動脈損傷組32191.50±81.75126.35±20.47443.36±51.69273.41±64.79非冠狀動脈損傷組21179.42±69.19122.90±13.23349.57±55.84245.43±63.27t值0.560.686.261.55P值>0.05>0.05<0.05>0.05

3 討論

川崎病的發病機制雖仍未確定，但普遍認為是由感染導致免疫系統過度激活，引發全身炎癥反應[5]，其中冠狀動脈損害是影響預后的最重要因素。冠狀動脈損害早期表現為冠狀動脈擴張或冠狀動脈瘤形成，發生率各家報道不一，從15%至65%不等，可能與種族、人群、檢測時間、檢測方法及判斷標準等的差異有關。本組資料中以超聲于急性期檢測冠狀動脈內徑來判斷冠狀動脈損害，其發生率為60.4%(32/53)，均表現為冠狀動脈擴張及小的冠狀動脈瘤，并未出現嚴重的大冠狀動脈瘤及冠狀動脈血栓。川崎病的炎性病變與眾多細胞因子的參與有關，其中TSP-1及PAF是與血小板有關的兩個重要細胞因子。TSP-1是一種細胞基質蛋白，最先在活化的血小板中被發現，另外內皮細胞及平滑肌細胞在炎癥反應中亦會分泌TSP-1[6]。有研究表明，正常血管壁中TSP-1低水平表達，但在血管炎性病癥如動脈粥樣硬化處，TSP-1水平異常升高[7]。本研究結果表明，川崎病患兒血漿TSP-1含量在急性期顯著增高，恢復期降至正常水平，提示血漿中TSP-1可能與急性期炎癥反應有關。TSP-1增高可能是對免疫反應和組織過度損害的代償。TSP-1可調節其他細胞因子共同參與血管炎癥反應。有研究表明，在導致動脈粥樣硬化的炎性過程中，TSP-1缺陷的小鼠通過加速斑塊成熟和壞死來增強炎癥反應，表現為金屬基質蛋白酶-9(MMP-9)表達上升[7]。川崎病患兒血管內皮細胞MMP-9大量表達，增加血管彈性蛋白的分解和炎性細胞浸潤，從而促進血管炎發生。一氧化氮在心血管生理學中起抗炎劑的作用，能抑制血小板聚集和炎性細胞黏附，TSP-1通過調控一氧化氮水平抑制心血管的炎癥反應[6]。T細胞異常活化是川崎病免疫系統激活并最終導致以小血管炎為主的全身炎癥反應的開始環節，TSP-1通過其受體CD47可有效抑制T細胞活化[8]。因此推測TSP-1通過抑制免疫反應和調控淋巴細胞、MMP-9、一氧化氮等多種途徑減輕川崎病炎癥反應。

血管內皮功能障礙和血小板代謝異常活躍與川崎病冠狀動脈損傷有非常緊密的聯系[9]。近年發現，PAF是一種具有多種生物效應的脂類物質，不僅是最有效的血小板聚集誘導劑，還是重要的炎癥因子，在血管炎癥性疾病的發病機制中起關鍵作用[10]。PAF通過與血小板表面的相應受體結合，誘導血小板激活，使血小板變形、聚集和釋放炎性遞質[11]。PAF可引起血管內皮細胞損傷和血管的通透性增加，促進血管炎的發生[12]，內皮細胞損傷可促進血小板激活，進而引起PAF大量合成與釋放。PAF大量釋放進一步促進血小板聚集、釋放。血小板聚集、血管炎性反應和血管內皮嚴重受損可使冠狀動脈全層受到嚴重損害，動脈壁完整性被破壞，進而導致冠狀動脈擴張或冠狀動脈瘤[13]。本研究結果顯示，川崎病患兒PAF含量明顯高于健康兒童，且急性期冠狀動脈損傷組PAF含量高于非損傷組，提示PAF不僅與川崎病的病理變化有關，還與川崎病的冠狀動脈損傷相關。

綜上所述，血漿TSP-1和PAF含量改變與川崎病急性期炎癥反應有關，PAF可作為川崎病患兒冠狀動脈早期損傷的一項預測指標，對此尚需在臨床上通過更大樣本的分析和通過基礎實驗研究進一步驗證。