5—羥色胺1A/2A受體基因多態(tài)性與SSRIs抗抑郁療效的相關性研究

斯日古楞 劉相辰 楊帆 楊宏昕

中圖分類號 R971+.43；R749.4+1 文獻標志碼 A 文章編號 1001-0408（2018）17-2394-05

DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2018.17.21

摘 要 目的：研究患者5-羥色胺1A/2A（5-HTR1A/2A）基因多態(tài)性與選擇性5-羥色胺再攝取抑制劑（SSRI）類藥物（SSRIs）抗抑郁療效的相關性，為SSRIs的合理使用提供參考。方法：采用前瞻性研究方法，選取2016年10月-2017年10月內蒙古自治區(qū)人民醫(yī)院精神專科符合入組標準的85例抑郁癥住院患者，隨機口服SSRIs帕羅西汀或舍曲林或艾司西酞普蘭中的任意一種進行治療，治療周期為8周。以漢密爾頓焦慮量表（HAMD）評分計算所得患者治療后的HAMD減分率為標準，分為有效組（HAMD減分率≥50%）和無效組（HAMD減分率<50%）。采用χ2檢驗分析兩組患者5-HTR1A（rs6295）、5-HTR2A（rs6313、rs6311）的基因型分布和基因分布頻率的差異，t檢驗比較有顯著影響基因型對HAMD減分率的影響。結果：有效組患者45例，無效組患者40例，兩組患者間民族、性別、年齡差異均無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。兩組患者5-HTR1A（rs6295）等位基因G、C的分布頻率差異有統(tǒng)計學意義（χ2=13.75，P<0.001），基因型分布差異無統(tǒng)計學意義（χ2=4.72，P=0.09）；5-HTR2A（rs6313）等位基因G、A和5-HTR2A（rs6311）等位基因C、T的分布頻率差異均有統(tǒng)計學意義（χ2=15.20、15.20，P<0.001），基因型分布差異也均有統(tǒng)計學意義（χ2=23.68、23.68，P<0.001）。5-HTR2A（rs6313）G/A、G/G、A/A 3種基因型患者間HAMD減分率差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。5-HTR2A（rs6311）T/T與C/C、T/T與C/T基因型患者間HAMD減分率差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05），僅C/C基因型患者HAMD減分率明顯高于C/T基因型患者（P=0.02）。結論：5-HTR2A（rs6313、rs6311）基因多態(tài)性可能與SSRIs治療抑郁癥的臨床療效有關，其中5-HTR2A（rs6311）C/C基因型有希望作為SSRIs治療抑郁癥時判別療效的預測因子。

關鍵詞 抑郁癥；選擇性5-羥色胺再攝取抑制劑；5-羥色胺1A 受體；5-羥色胺2A受體；基因多態(tài)性

ABSTRACT OBJECTIVE： To study the association of 5-HTR1A/2A receptor gene polymorphism with antidepressant efficacy of selective 5-serotonin reuptake inhibitors （SSRIs）， and to provide reference for rational use of SSRIs. METHODS： In perspective study， 85 depressive inpatients met inclusion criteria were selected from Inner Mongolia Autonomous Region Peoples Hospital during Oct. 2016-Oct. 2017. They were randomly given one kind of SSRIs as paroxetine， sertraline or escitalopram oxalate， for 8 weeks. They were divided into valid group （HAMD reduction rate≥50%） and invalid group （HAMD reduction rate<50%） according to HAMD reduction rate calculated by HAMD score after treatment. Difference of genotype distribution and genotype distribution frequency of 5-HTR1A （rs6295） and 5-HTR2A （rs6313， rs6311） were analyzed by χ2-test in 2 groups. t-test comparison significantly influenced the effects of genotype on HAMD reduction rate. RESULTS： There were 45 patients in valid group and 40 patients in invalid group； there was no statistical significance in the difference in nationality， gender or age between 2 groups （P>0.05）. There was statistical significance in the distribution frequency of 5-HTR1A（rs6295） allele G and C between 2 groups （χ2=13.75，P<0.001）； there was no statistical significance in genotype distribution （χ2=4.72，P=0.09）. There was statistical significance in the distribution frequency of 5-HTR2A（rs6313） allele G and A with 5-HTR2A（rs6311） allele C and T （χ2=15.20， 15.20， P<0.001）. There was statistical significance in difference of genotype distribution （χ2=23.68， 23.68， P<0.001）. There was no statistical significance in HAMD reduction rate among 5-HTR2A（rs6313）G/A， G/G， A/A genotypes （P>0.05）. There was no statistical significance in HAMD reduction rate between 5-HTR2A（rs6311）T/T genotype and C/C genotype， between 5-HTR2A（rs6311）T/T genotype and C/T genotype （P>0.05）. HAMD reduction rate of C/C genotype was significantly higher than that of C/T genotype （P=0.02）. CONCLUSIONS： 5-HTR2A （rs6313， rs6311） gene polymorphism may be associated with clinical efficacy of SSRIs for depression. 5-HTR2A（rs6311） C/C genotype is hopeful as a efficacy predictor of SSRIs in the treatment of depression.

KEYWORDS Depression； Selective 5-serotonin reuptake inhibitor； 5-HTR1A receptor； 5-HTR2A receptor； Gene polymorphism

抑郁癥（Major depressive disorder，MDD）是常以抑郁為主要癥狀的一種心境障礙或情感性疾病，發(fā)病率較高。根據(jù)研究顯示，抑郁癥在全球的發(fā)病率可達5%～12%，每年將近有15%的抑郁癥患者因自殺而失去生命，隨著社會的發(fā)展，抑郁癥的發(fā)病率仍然不斷上升，根據(jù)國際衛(wèi)生組織（WHO）相關報道，抑郁癥已經成為影響人體健康的主要疾病，其影響性僅次于心臟疾病[1-2]。

人類5-羥色胺1A受體（5-HTR1A）遺傳基因位于第5號染色體q11.2～q13區(qū)域，5-HTR1A為分布于突觸前或突觸后樹突部的G蛋白偶聯(lián)受體，其有作為突觸前自主受體和突觸后受體這兩種作用。5-HTR1A的激活將引起細胞膜的超極化，從而減弱神經元的興奮性，是5-羥色胺（5-HT）系統(tǒng)神經傳遞的重要調節(jié)因素之一[3]。5-HTR2A遺傳基因位于第13號染色體q14～q21區(qū)域，包含20 kbp，主要含有3個外顯子和2個內含子。已有研究發(fā)現(xiàn)，5-HTR1A/2A基因多態(tài)性與臨床常見厭食癥以及情感障礙等均存在著密切關聯(lián)[4-5]，且大多數(shù)研究集中在5-HTR1A/2A 基因多態(tài)性與抑郁癥易感性和認知功能等方面，針對5-HTR1A/2A基因多態(tài)性與選擇性5-羥色胺再攝取抑制劑（SSRI）類藥物（SSRIs）抗抑郁療效的相關性研究報道的數(shù)量屈指可數(shù)且研究結果不一[6-7]。

因此，筆者采用前瞻性研究方法，就抑郁癥患者5-HTR1A基因的1個單核苷酸多態(tài)性（SNP）位點rs6295（C/G），5-HTR2A基因的2個SNP 位點rs6313（T/C）和rs6311（A/G） 的多態(tài)性與帕羅西汀、舍曲林、艾司西酞普蘭3種臨床常用SSRIs抗抑郁療效之間的相關性進行分析，試圖發(fā)現(xiàn)基因多態(tài)性與SSRIs抗抑郁療效的良好預測因子，為提高SSRIs臨床使用后的抗抑郁療效提供參考，也為個體化用藥的實施提供有效依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 納入與排除標準

研究對象為2016年10月-2017年10月在內蒙古自治區(qū)人民醫(yī)院精神專科住院的抑郁癥患者。納入標準：診斷被2名或2名以上精神科主治醫(yī)師認可，要求達到中國精神障礙分類與診斷標準第3版（CCMD-3）[8]關于抑郁癥的診斷標準，漢密頓抑郁量表 （Hamilton depression scale，HAMD）評分≥20分（24項）；年齡30～60歲；性別不限。排除標準：抑郁發(fā)作繼發(fā)于腦器質性精神障礙、使用精神活性物質、嚴重軀體疾病及其他精神障礙；伴有精神活性物質濫用、嚴重器質性疾病、酒精和藥物依賴、妊娠哺乳者；有雙相情感障礙陽性家族史；入組前1個月內曾接受抗精神病藥物、抗抑郁藥物治療或電抽搖治療。所有入選患者或其監(jiān)護人均書面簽署使用SSRIs治療及入組試驗的知情同意書，本研究獲內蒙古自治區(qū)人民醫(yī)院倫理委員會批準同意。

1.2 研究對象

入選患者共85例，HAMD評分均≥20分，均未使用任何精神類藥物或停藥已4周以上，學歷為小學及以上文化程度。其中，男性50例，女性35例；漢族70例，蒙古族15例；平均年齡（32.71±11.06）歲；病程1～45個月，平均病程（10.8±9.7）個月。

1.3 臨床治療和療效評定

SSRIs屬第二代抗抑郁藥，已被證實是安全、有效和易于耐受的藥物。因為SSRIs是通過阻滯細胞膜上載體對5-HT再攝取的轉運而發(fā)揮作用，各SSRIs間在療效方面沒有顯著差異。因此，入選患者根據(jù)入院就診順序在住院過程中隨機使用SSRIs中的一種進行治療。本研究主要使用鹽酸帕羅西汀片（北京萬生藥業(yè)責任有限公司，批準文號：國藥準字H20133084，規(guī)格：20 mg/片）、鹽酸舍曲林片（輝瑞制藥有限公司，批準文號：國藥準字H10980141，規(guī)格：50 mg/片）、草酸艾司西酞普蘭片（西安楊森制藥有限公司，批準文號：國藥準字J20150119，規(guī)格：每片10 mg）3種臨床常用的SSRIs。給藥劑量在患者治療過程中根據(jù)個人情況而定，在治療過程中始終保持患者的個人最適劑量，治療周期均為8周。入選患者在治療過程中嚴禁服用其他抗抑郁癥藥物，但可根據(jù)病情需要酌情使用苯二氮 類藥物和治療本研究藥品不良反應的藥物。為保證治療效果，避免患者漏服、少服治療藥品，筆者采取就診時囑咐家屬，針對治療期間出院患者2～3 d電話隨訪患者本人的方法進行監(jiān)督，排除人為因素干擾試驗結果。

1.4 臨床療效指標的選定與分組

分別對入選患者治療前和藥物治療8周后進行一次HAMD評定。HAMD評定由2名資深醫(yī)護人員開展，每檢查一次，共同討論每個獨立評分，以保障最終評分的準確性。以患者治療前后的HAMD減分率作為指標評定患者的臨床療效，HAMD減分率=（治療前評分-治療后評分）/（治療前評分）×100%，其中HAMD減分率≥50%為有效，<50%為無效。根據(jù)HAMD減分率將入選患者分為有效組和無效組，其中有效組45例，無效組40例。有效組患者中服用鹽酸帕羅西汀片17例（37.78%），鹽酸舍曲林片13例（28.89%），草酸艾司西酞普蘭片15例（33.34%）。無效組患者中服用鹽酸帕羅西汀片13例（32.5%），鹽酸舍曲林片9例（22.5%），草酸艾司西酞普蘭片18例（45%），兩組間比較服藥情況差異均無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。另外，兩組患者的性別、年齡、民族分布差異也均無統(tǒng)計學意義（P>0.05），結果見表1。

1.5 DNA提取和基因多態(tài)性測定

患者就診當天抽取外周靜脈血2 mL為樣本，加入乙二胺四乙酸 （EDTA） 抗凝，混勻，在-20 ℃ 的環(huán)境中保存。使用基因組DNA 提取試劑盒（美國Omega公司，型號：D2100） 對患者DNA進行提取，使用核酸蛋白分析儀（美國Thermo Scientific公司，型號：NanoDrop 2000C）檢測DNA濃度和純度。使用SNaPshot多重SNP分型技術（iMLDR?）對5-HTR1A（rs6295）和5-HTR2A（rs6313、rs6311）基因進行分析。主要步驟：（1）使用Premier 3.0引物設計軟件生成SNP 位點的上下游引物；（2）應用9600型聚合酶鏈式反應（PCR）儀（美國ABI公司）擴增每個SNP 位點；（3）使用SNaPshot多重SNP分型技術進行SNP分型，主要根據(jù)峰移動的膠位置找出該延伸產物對應的SNP 位點，原始數(shù)據(jù)文件用GeneMapper 4.1軟件分析位點信息。各基因型SNP位點的引物序列和片段長度見表2。

1.6 數(shù)據(jù)處理

使用SPSS 19.0軟件進行統(tǒng)計分析。采用吻合度檢驗考察基因型分布是否與哈迪-溫伯格平衡定律（H-W平衡定律）一致，吻合度檢驗是運用χ2檢驗來衡量基因型數(shù)目的觀察值（實際頻數(shù)）與該位點上全部基因型頻率分布在符合H-W平衡定律時的預期值（預計頻數(shù)）之間的吻合程度。再運用χ2檢驗比較各基因型及等位基因分布的差異，t檢驗比較有顯著影響基因型對患者HAMD減分率的影響。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 吻合度檢驗結果

結果顯示，入選患者基因rs6295、rs6313、rs6311位點基因型的實際頻數(shù)與H-W平衡定律下的預測頻數(shù)差異無統(tǒng)計學意義（P<0.05），表明本研究3個SNP位點基因型的頻數(shù)分布均符合H-W平衡定律，結果見表3。

2.2 基因多態(tài)性與SSRIs臨床療效的相關性

兩組患者5-HTR1A（rs6295）等位基因G、C的分布頻率差異有統(tǒng)計學意義（χ2=13.75，P<0.001），基因型分布差異無統(tǒng)計學意義（χ2=4.72，P=0.09）；5-HTR2A（rs6313）等位基因G、A和5-HTR2A（rs6311）等位基因C、T的分布頻率差異均有統(tǒng)計學意義（χ2=15.20、15.20，P<0.001），基因型分布差異也均有統(tǒng)計學意義（χ2=23.68、23.68，P<0.001）。由此說明，患者5-HTR2A（rs6313、rs6311）基因型分布及等位基因分布頻率與SSRIs臨床療效存在一定的相關性，是SSRIs抗抑郁的敏感基因型。兩組患者不同基因型分布與等位基因分布頻率比較見表4。

2.3 基因型對患者HAMD減分率的影響

比較患者經過SSRIs治療后HAMD減分率間差異發(fā)現(xiàn)，攜帶5-HTR2A（rs6313）G/A、G/G、A/A 3種基因型的患者間差異均無統(tǒng)計學意義（P>0.05）；攜帶5-HTR2A（rs6311）T/T基因型患者與C/C基因型患者間、攜帶5-HTR2A（rs6311）C/T基因型患者與T/T基因型患者間差異均無統(tǒng)計學意義（P>0.05），僅攜帶5-HTR2A（rs6311）C/C基因型患者與C/T基因型患者間差異有統(tǒng)計學意義（P=0.02），攜帶5-HTR2A（rs6311）C/C基因型患者經過SSRIs治療后HAMD減分率最高，表明其臨床療效最好。入選患者5-HTR2A（rs6313、rs6311）對HAMD減分率的影響見表5。

3 討論

5-HT是哺乳類動物體內重要的神經遞質，其突觸前后受體亞型種類繁多。有研究指出，抑郁癥患者腦內的突觸后5-HT受體數(shù)量較正常人有所升高。這證明抑郁癥患者突觸前5-HT能神經遞質活動的功能性下降可能是促使突觸后5-HT受體數(shù)量增加或功能上調的原因之一。還有研究表明，5-HTR2A基因啟動子區(qū)域多態(tài)性與常見抑郁癥存在著密切關聯(lián)[9]。5-HTR2A重要的分布區(qū)域為與精神分裂癥病因學強烈相關的額葉皮層，因此，對其相關基因多態(tài)性的研究引起了人們的高度關注。

5-HTR2A（rs6311）多態(tài)性可能與SSRIs療效存在關聯(lián)，C/T基因型患者的HAMD減分率顯著低于攜帶C/C基因型患者，提示攜帶rs6311位點T等位基因、C/T基因型的患者使用SSRIs后療效較差。5-HTR2A（rs6311）是唯一位于啟動子區(qū)域的多態(tài)性位點，其修飾啟動子活性，而啟動子的變異可能會有區(qū)別地改變轉錄，影響受體數(shù)目和結合功能，這可能是不同基因型患者療效差異的原因。本研究結果提示，5-HTR2A（rs6311）多態(tài)性可能與SSRIs療效有關，C/C基因型攜帶者比其他兩種基因型攜帶者使用SSRIs治療后的臨床療效更佳，提示5-HTR2A（rs6311）C/C基因型有希望作為SSRIs治療抑郁癥后判別療效的預測因子。

5-HTR2A（rs6313）由于位于該基因的外顯子區(qū)域，具有潛在的功能及影響藥物治療的效果而倍受關注。研究發(fā)現(xiàn)，5-HTR2A多態(tài)性可影響帕羅西汀和氟伏沙明的治療效果，G/G攜帶者接受治療后其痊愈程度較其他患者較好，G/A多態(tài)性同艾司西酞普蘭的治療效果有關，G/G攜帶者對艾司西酞普蘭的治療愈后效果較好，而G/A、A/A基因型攜帶者對其的治療效果不理想[10-11]。還有研究報道，在對66例日本重性抑郁癥患者用氟西汀治療6周后發(fā)現(xiàn)，有效組和無效組的5-HTR2A（rs6313）G/G、G/A、A/A基因型及等位基因頻率相差無幾[12]。由本次研究結果可知，5-HTR2A（rs6313）G等位基因攜帶者對SSRIs療效較A等位基因攜帶者更好，SSRIs對G/G基因型比A/A基因型患者療效更好，并具有統(tǒng)計學意義，這與國外一些研究結果[13]大致相似。

本研究結果還顯示，SSRIs對5-HTR1A（rs6295）3種基因型患者治療效果沒有顯著影響，這與文獻[14]結果并不一致。其可能是由于不同研究中涉及的人種不同。例如在中國和日本人中，G等位基因頻率高于C等位基因頻率，而在白種人中偏低。可能在白種人中，G等位基因會阻礙疾病的發(fā)展，而在亞洲人種中，C等位基因會阻礙疾病的發(fā)展[15]。由于本研究患者基本為城市人口，民族融合情況較為復雜，試驗原始數(shù)據(jù)有一定的局限性，試驗結果可能會有一定的偏倚。

綜上所述，5-HTR2A（rs6313、rs6311）基因多態(tài)性可能與SSRIs治療抑郁癥的臨床療效存在著密切關聯(lián)，5-HTR2A（rs6311）C/C基因型可能成為SSRIs治療療效的預測因子。在客觀條件的限制下，此次研究結果與國內外研究結果稍有出入，原因可能為不同學者所研究的病例各自具有不同特點，包括藥物耐藥性患者、初次就診的抑郁癥患者等；治療藥物種類及劑量的限制、判斷療效的標準不統(tǒng)一等[16]；由于實際治療情況限制，本研究收集病例只有85例，樣本量較少，可能導致研究結果偏差；另外，抑郁癥是一種多基因遺傳疾病，遺傳機制較為復雜，某個基因多態(tài)性可能通過一個或一些與此多態(tài)性連鎖不平衡的其他多態(tài)性聯(lián)合發(fā)揮作用，而某個基因位點的多態(tài)性只是構成抑郁癥的某一種或幾個臨床癥狀的危險因素，因此研究需進一步考慮多個基因間的相互作用。

參考文獻

[ 1 ] CASPI A，SUGDEN K，MOFFITT TE，et al. Influence of life stress on depression：moderation by a polymorphism in the 5-HTT gene[J]. Science，2003.DOI：10.1126/science.1083968.

[ 2 ] 劉文，李煥德.新型抗抑郁藥物的臨床應用及其作用機制研究進展[J].中國藥房，2007，18（1）：66-67.

[ 3 ] SUNG V. Probiotics to improve outcomes of colic in the community：protocol for the baby biotics randomized controlled trial[J]. BMC Pediatr，2012，12（4）：135-136.

[ 4 ] TAYLOR L，F(xiàn)ARAONE SV，TSUANG MT. Family，twin，and adoption studies of bipolar disease[J]. Curr Psychiatry Rep，2002，4（2）：130-133.

[ 5 ] 曹莉莎，葉云，羅文，等.抗抑郁藥物作用靶點的研究進展[J].中國藥房，2014，25（13）：1227-1231.

[ 6 ] YAAKOB N，MALONE DT，EXINTAIRA B，et al. Heterogeneity amongst 5-HT3 receptor submits：is this significant？[J]. Curr Mol Med，2011，11（1）：57-68.

[ 7 ] MITSUHIRO K，ALDHITO S，KEIZO Y，et al. Genetic polymorphism in the serotonergic system and sympom cluster of major depressive disorder[J]. J Affective Disoder，2011，15（5）：374-376.

[ 8 ] 陳彥方，崔玉華，吳文源，等.中國精神疾病分類方案與診斷標準[M].南京：東南大學出版社，1995：197-315.

[ 9 ] 張明園.精神科評定量表手冊[M].長沙：湖南科學技術出版社，1998：121-126.

[10] KATO T. Molecular genetics of bipolar disorder and depression[J]. Psychiatry Clin Neurosei，2007，61（1）：13-19.

[11] KATO M，F(xiàn)UKUDA T，WAKENO M，et al. Effects of the serotonin type 2A，3A and 3B receptor and the serotonin transporter genes on paroxetine and fluvoxamine efficacy and adverse drug reactions in depressed Japanese patients [J]. Neuropsychobiology，2006，53（4）：186-195.

[12] CHOI MJ，KANG RH，HAM BJ，et al. Serotonin receptor 2A gene polymorphism（1438A/G） and short-term treatment response to citalopram[J]. Neuropsychobiology，2005，52（3）：155-162.

[13] JUSTINE MG，LEANNE MW，PETE RS，et al. Impact of the HTR3A gene with early life trauma on emotional brain networks and depressed mood[J]. Depression and Anxiety，2010，27（6）：752-759.

[14] YANG Z，SENEVIRATNE C，WANG S，et al. Serotonin transporter and receptor genes significantly impact nicotine dependence through genetic interactions in both European American and African American smokers[J]. Drug Alcohol Depend，2013，129（3）：217-225.

[15] FRANCESCA D，MARY-ANNE E，QIAOPING Y，et al. HTR3B is associated with alcoholism with antisocial behavior and alpha EEG power：an intermediate phenotype for alcoholism and comorbid behaviors[J]. Alcohol，2009，43（1）：73-84.

[16] LASKY-SU JA，F(xiàn)ARAONE SV，GLATT SJ，et al. Meta analysis of the association between two polymorphisms in the serotonin transporter gene and affective disorders[J]. Genet，2005，133（8）：110-115.

（收稿日期：2018-03-19 修回日期：2018-07-22）

（編輯：鄒麗娟）