細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)存在的生物安全問題簡析

胡燕玲 高習(xí)文

摘要：動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)在生物技術(shù)和生物醫(yī)藥的相關(guān)研究領(lǐng)域中的應(yīng)用非常廣泛。隨著動物細(xì)胞培養(yǎng)在各個領(lǐng)域應(yīng)用的內(nèi)涵逐漸的深入，隨之也產(chǎn)生了相應(yīng)的生物安全問題，也就是生產(chǎn)中常說的生物健康和環(huán)境因素之間的風(fēng)險(xiǎn)性問題，而且此問題已經(jīng)受到相關(guān)領(lǐng)域?qū)I(yè)人士的廣泛關(guān)注。現(xiàn)主要分析動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中存在的生物安全問題，并且針對具體的問題及其風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行評估，以及更深入的探討和研究，以期為生物健康和環(huán)保提供更加可靠的理論基礎(chǔ)和相關(guān)的技術(shù)支持。

關(guān)鍵詞：動物細(xì)胞培養(yǎng)；生物安全；危險(xiǎn)評估

中圖分類號：R446.11+3

文獻(xiàn)標(biāo)識碼：B

文章編號：2095-9737（2018）07-0018-01

1 概述

目前，通常是通過動物細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，以作為培養(yǎng)基質(zhì)提供給病毒疫苗的生產(chǎn)所用，此外，許多生物藥品的生產(chǎn)過程中也不能缺少動物細(xì)胞的培養(yǎng)。隨著動物細(xì)胞培養(yǎng)的不斷深入應(yīng)用，相應(yīng)的生物安全問題隨機(jī)出現(xiàn)，愈來愈受到關(guān)注。然而，實(shí)際生產(chǎn)中如果想將風(fēng)險(xiǎn)在最大程度上加以控制，就需要采取比較全面的風(fēng)險(xiǎn)評估再進(jìn)行確定，還要考慮細(xì)胞培養(yǎng)操作的類型以及細(xì)胞培養(yǎng)潛在的生物危害等情況。

2 動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中存在的生物安全問題

2.1 細(xì)胞培養(yǎng)的特點(diǎn)

實(shí)際生產(chǎn)中針對動物細(xì)胞培養(yǎng)過程的風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行評估時(shí)，必須考慮的因素就是細(xì)胞培養(yǎng)的本質(zhì)特征，主要體現(xiàn)在物種來源、細(xì)胞或組織類型以及培養(yǎng)類型三個不同的方面。

2.2 遺傳修飾獲得的特征

實(shí)際生產(chǎn)中，在實(shí)驗(yàn)室遺傳修飾獲得的重組細(xì)胞與其非重組類似物相比較，通常對生物健康和環(huán)境破壞的能力要更強(qiáng)一些。所以在實(shí)際評估動物細(xì)胞培養(yǎng)風(fēng)險(xiǎn)時(shí)，還必須確定重組細(xì)胞獲得的遺傳修飾特征，將其對評估的影響考慮在內(nèi)。

2.3 致病因子感染獲得的特征

病原體故意感染：實(shí)際對細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)的過程中存在著病原體侵染培養(yǎng)細(xì)胞的可能性。所以要確定與被感染細(xì)胞培養(yǎng)物潛在的相關(guān)危害，就要對傳染性病原體本身的特性加以驗(yàn)證。

外來污染因子：實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)的過程中，外來污染因子是對生物的主要危害來源。因?yàn)榇嬖诘耐鈦砦廴疽蜃訒ㄟ^某些特殊物種的來源從而對細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)生一定的污染，影響生物健康和環(huán)境的安全。其中主要包括以下幾個方面的來源。①細(xì)菌和真菌：通常檢測細(xì)胞的培養(yǎng)物都會有細(xì)菌或真菌污染物存在，主要因其具有超過細(xì)胞培養(yǎng)物的生長能力。此種情況在實(shí)際生產(chǎn)中還是相對比較容易加以防治的。②支原體：在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，支原體污染的情況相對屬于比較嚴(yán)重的，無論是影響范圍、檢測難度還是防治等方面都存在比較難以處理的情況。因?yàn)樵诩?xì)胞培養(yǎng)的大多階段不是非常容易能夠檢測出支原體感染情況的存在，所以就會造成非常多的不可預(yù)測的效應(yīng)出現(xiàn)，所以細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)不能忽視對于支原體的檢測工作。③病毒：細(xì)胞培養(yǎng)的過程中還不能忽視病毒污染的情況存在，可能包含著某些具有廣泛宿主的病毒侵染動物的情況。④寄生蟲：生產(chǎn)中在處理或者制備各原始細(xì)胞培養(yǎng)物的時(shí)候很可能會遭受到外來寄生蟲造成的侵襲，又或者是來源于已知和疑似被特異寄生蟲感染的供體細(xì)胞或組織，試驗(yàn)時(shí)也不能忽視。⑤朊病毒：少數(shù)培養(yǎng)的細(xì)胞系通過繼代培養(yǎng)能夠顯示出促進(jìn)PrP（ Sc）的穩(wěn)定和持續(xù)復(fù)制以及感染的作用，但是大多數(shù)的細(xì)胞系對朊病毒感染具有抵抗力。

2.4 操作類型

進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)的時(shí)候，除了應(yīng)該確定生物學(xué)風(fēng)險(xiǎn)以外，還有一個比較重要的方面就是操作類型因素的影響。動物細(xì)胞培養(yǎng)操作類型存在的主要問題體現(xiàn)在以下幾個方面：可能暴露的環(huán)境特征、行為特征、非標(biāo)準(zhǔn)操作三個方面的內(nèi)容。

2.5 生物安全建議和防護(hù)

細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)必須考慮相關(guān)的生物學(xué)風(fēng)險(xiǎn)，并且進(jìn)行相應(yīng)的監(jiān)測手段，此外操作類型也是需要考慮的事項(xiàng)，將以上因素都確定之后采取適當(dāng)?shù)姆雷o(hù)等級，以保護(hù)生物安全以及環(huán)境的健康。實(shí)際生產(chǎn)中在建立適當(dāng)?shù)姆雷o(hù)等級時(shí)，需要通過實(shí)施普通的和特殊的工作實(shí)踐和防護(hù)措施來實(shí)現(xiàn)。在進(jìn)行動物細(xì)胞培養(yǎng)的整個操作過程中都應(yīng)該通過防護(hù)措施的落實(shí)而避免污染的情況出現(xiàn)。這些措施應(yīng)該在保護(hù)操作者和培養(yǎng)物的基毒的侵染，防護(hù)措施應(yīng)與相應(yīng)傳染性病原體的建議礎(chǔ)上，進(jìn)一步降低外來因子污染的風(fēng)險(xiǎn)。

3 結(jié)語

動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，對于防護(hù)等級的準(zhǔn)確劃分的要求一般不能夠適應(yīng)于特殊的環(huán)境，所以在防護(hù)等級劃分時(shí)應(yīng)該針對具體案例的具體情況加以考慮，同時(shí)還要依賴于全面的風(fēng)險(xiǎn)評估內(nèi)容。但是在實(shí)際生產(chǎn)中因?yàn)橥鈦淼奈廴疽蜃雍懿蝗菀妆粰z測出來，而且又很少能夠被驗(yàn)證，所以可能構(gòu)成與細(xì)胞培養(yǎng)操作相關(guān)的主要危害。技術(shù)人員會更加重視并且關(guān)注生物安全和風(fēng)險(xiǎn)評估的問題，并且總結(jié)出更加有效的防護(hù)措施，減少相關(guān)的損失。