不同播種期對(duì)穿心蓮產(chǎn)量及質(zhì)量的影響研究*

★ 王振 周 鵬 王章偉 張功俊 呂武清 楊小玲 謝寧 *（1.江西青峰藥業(yè)有限公司 江西 贛州 341000；.創(chuàng)新天然藥物與中藥注射劑國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 江西 贛州 341000）

藥材穿心蓮藥材為爵床科植物穿心蓮Andrographis paniculata（Burm.f.）Nees 的地上干燥部分。穿心蓮藥材藥用有效成分為穿心蓮內(nèi)酯、脫水穿心蓮內(nèi)酯和新穿心蓮內(nèi)酯等二萜類內(nèi)酯化合物，具有清熱解毒，涼血，消腫功效。用于感冒發(fā)熱，咽喉腫痛，口舌生瘡，頓咳勞嗽，泄瀉痢疾，熱淋澀痛，癰腫瘡瘍，蛇蟲(chóng)咬傷等疾病的治療［1］。穿心蓮原產(chǎn)于印度，自引種至我國(guó)后，在長(zhǎng)江以南的廣西、廣東、福建等省廣泛種植，筆者通過(guò)實(shí)地考察，發(fā)現(xiàn)各產(chǎn)地穿心蓮種植技術(shù)粗放，田間管理較為簡(jiǎn)單，未對(duì)播種期進(jìn)行有效控制，造成產(chǎn)品質(zhì)量不均一、波動(dòng)較大。通過(guò)文獻(xiàn)調(diào)研，報(bào)道的穿心蓮播種期有4月上旬［2-3］、4 月中上旬［4］、5 月中上旬［5］等，時(shí)間跨度長(zhǎng)，對(duì)穿心蓮規(guī)范化種植指導(dǎo)意義不大，且未對(duì)不同播種期對(duì)穿心蓮的產(chǎn)量及質(zhì)量影響做深入研究。作為國(guó)家中醫(yī)藥管理局中藥標(biāo)準(zhǔn)化項(xiàng)目“喜炎平注射液標(biāo)準(zhǔn)化建設(shè)”研究?jī)?nèi)容之一，筆者在廣東湛江穿心蓮種植實(shí)驗(yàn)基地開(kāi)展不同播種期對(duì)穿心蓮產(chǎn)量及質(zhì)量影響的實(shí)驗(yàn)研究工作，通過(guò)考察不同播種期的穿心蓮生長(zhǎng)量、內(nèi)酯含量及畝產(chǎn)量等指標(biāo)變化情況，確定穿心蓮最佳播種期，為粵西穿心蓮規(guī)范化種植提供理論依據(jù)。現(xiàn)將研究結(jié)果整理報(bào)道如下。

1 材料與儀器

穿心蓮內(nèi)酯對(duì)照品（中國(guó)食品藥品檢定研究院，批號(hào)：110797-201609）；脫水穿心蓮內(nèi)酯對(duì)照品（中國(guó)食品藥品檢定研究院，批號(hào)：110854-201509）；甲醇為色譜純，水為純化水，其余試劑均為分析純。穿心蓮樣本采集于廣東湛江實(shí)驗(yàn)基地，經(jīng)江西中醫(yī)藥大學(xué)葛菲教授鑒定為爵床科植物穿心蓮Andrographis paniculata（Burm.f.）Nees的干燥地上部分。

Waters e2695 高效液相色譜系統(tǒng)，XS105DU/ML204T 電子天平（梅特勒-托利多科技有限公司），KQ-300DE 數(shù)控超聲清洗器（昆山市超聲儀器有限公司，250W，33KHz）。

2 方法與結(jié)果

2.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)方法 文中試驗(yàn)用穿心蓮種植在廣東湛江實(shí)驗(yàn)基地，實(shí)驗(yàn)基地前茬作物為土豆，土質(zhì)為磚紅色土壤，有機(jī)質(zhì)為7.8mg/kg（檢測(cè)單位：廣東省綠色產(chǎn)品認(rèn)證檢測(cè)中心），肥力中等以上。根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道并結(jié)合湛江地區(qū)在清明前后開(kāi)展穿心蓮種植的歷史背景情況，試驗(yàn)設(shè)計(jì)考察3月底、4月初、4月中旬、4月底4個(gè)不同播種期，試驗(yàn)區(qū)按照要求完成整地備耕后，定量施用生物有機(jī)肥，施用量為0.75 kg/m2。播種方式為機(jī)械播種（參數(shù)設(shè)置如下：行距25 cm，畦距40 cm，每畦地播種4行，畦寬120 cm），播種量0.59 g/m2，每個(gè)試驗(yàn)組播種面積666.7 m2，各試驗(yàn)組中耕除草、排灌、施肥、病蟲(chóng)害防治等田間管理措施同當(dāng)?shù)卮筇锓N植技術(shù)。

2.2 測(cè)產(chǎn)取樣方法 為保證測(cè)定的準(zhǔn)確性必須科學(xué)的使用取點(diǎn)方法，因此，取點(diǎn)要力求做到合理，具有足夠的代表性、真實(shí)性，不應(yīng)有任何主觀偏見(jiàn)。為了確保田間取點(diǎn)不出現(xiàn)人為錯(cuò)誤，本次采取交叉法（梅花點(diǎn)）取點(diǎn)，地頭、周邊保護(hù)行、缺苗斷壟的地方因植株生長(zhǎng)特殊，不具有代表性，應(yīng)避免取點(diǎn)。每個(gè)試驗(yàn)組取5個(gè)點(diǎn)，每個(gè)取樣點(diǎn)1m2左右，在播種后穿心蓮進(jìn)入開(kāi)花期（140天左右）開(kāi)展測(cè)產(chǎn)取樣工作，記錄相關(guān)株高、分支數(shù)、鮮重、干重等參數(shù)，換算畝產(chǎn)量（畝產(chǎn)量=取樣點(diǎn)樣本干重平均值（kg）/樣本采集面積（m2）×666.7m2），計(jì)算每個(gè)試驗(yàn)組平均值。

2.3 含量測(cè)定方法 穿心蓮藥材中穿心蓮內(nèi)酯及脫水穿心蓮內(nèi)酯含量測(cè)定，按2015版《中華人民共和國(guó)藥典》（一部）［1］“穿心蓮”項(xiàng)下“含量測(cè)定”方法進(jìn)行測(cè)定，具體方法如下：

2.3.1 對(duì)照品溶液的制備 取穿心蓮內(nèi)酯對(duì)照品與脫水穿心蓮內(nèi)酯對(duì)照品各10mg，精密稱定，置同一100mL棕色瓶中，加甲醇使溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得混合對(duì)照品溶液。

2.3.2 供試品溶液的制備 取2.2項(xiàng)下測(cè)產(chǎn)樣品，粉碎，取本品粉末（過(guò)四號(hào)篩）0.5 g，精密稱定重量，精密加入40%甲醇25mL，稱定重量，浸泡1h，超聲處理（功率250W，33 KHz）30min，放冷，再稱定重量，用40%甲醇補(bǔ)足減失重量，搖勻，濾過(guò)。精密量取續(xù)濾液10mL，置中性氧化鋁柱（200～300目，5g，內(nèi)徑1.5cm）上，用甲醇15mL洗脫，收集全部洗脫液，置50mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，過(guò)濾，續(xù)濾液作為供試品溶液。

2.3.3 色 譜 條 件 色 譜 柱：Ultimate?XB- C18（4.6mm×250mm，5μm）；流 動(dòng) 相：甲 醇∶水（52∶48）；檢測(cè)波長(zhǎng)：穿心蓮內(nèi)酯為225nm，脫水穿心蓮內(nèi)酯為254nm；流速0.8mL/min；柱溫30℃；進(jìn)樣量5μL。理論板數(shù)按穿心蓮內(nèi)酯峰計(jì)算均應(yīng)不低于6000，相鄰色譜峰分離度應(yīng)大于1.5，對(duì)照品及供試品色譜圖見(jiàn)圖1。

圖1 HPLC色譜圖

表1 不同播種期對(duì)穿心蓮生長(zhǎng)和產(chǎn)量的影響（n=5）

2.4 結(jié)果與分析

2.4.1 不同播種期對(duì)穿心蓮生長(zhǎng)和產(chǎn)量的影響 通過(guò)表1數(shù)據(jù)可知，在相同田間管理?xiàng)l件下，不同播種期對(duì)穿心蓮生長(zhǎng)及產(chǎn)量均有較大的影響。在平均株高方面，由高到低依次為：4月底實(shí)驗(yàn)組、4月中旬實(shí)驗(yàn)組、3月底/4月初實(shí)驗(yàn)組；在分支數(shù)方面，由高到低依次為：4月初實(shí)驗(yàn)組、4月中旬實(shí)驗(yàn)組、4月底實(shí)驗(yàn)組、3月底實(shí)驗(yàn)組；在畝產(chǎn)量方面，由高到低依次為：4月中旬實(shí)驗(yàn)組、4月底實(shí)驗(yàn)組、4月初實(shí)驗(yàn)組、3月底實(shí)驗(yàn)組，其中4月中旬實(shí)驗(yàn)組相對(duì)最低組3月底實(shí)驗(yàn)組增產(chǎn)73.21 kg，增產(chǎn)率為18.80%，4月底實(shí)驗(yàn)組相對(duì)最低組3月底實(shí)驗(yàn)組增產(chǎn)61.38 kg，增產(chǎn)率為15.76%，四月初實(shí)驗(yàn)組相對(duì)最低組3月底實(shí)驗(yàn)組增產(chǎn)56.91kg，增產(chǎn)率為14.62%。結(jié)合田間觀察及播種后土壤溫度情況，3月底、4月初實(shí)驗(yàn)組播種后穿心蓮種子在7天左右才能發(fā)芽，而4月中旬及4月底實(shí)驗(yàn)組播種后穿心蓮種子在4天左右就開(kāi)始發(fā)芽，時(shí)間較短，提示在播種時(shí)應(yīng)同步考慮溫度對(duì)穿心蓮種子發(fā)芽的影響。根據(jù)不同播種期穿心蓮生長(zhǎng)情況和產(chǎn)量實(shí)驗(yàn)結(jié)果來(lái)看，播種時(shí)期在4月中旬最佳，4月底及4月初次之。

2.4.2 不同播種期對(duì)穿心蓮有效成分含量的影響 根據(jù)含量測(cè)定結(jié)果，計(jì)算穿心蓮藥材有效成分含量的平均值，詳細(xì)數(shù)據(jù)見(jiàn)表2，通過(guò)數(shù)據(jù)可知，在相同田間管理?xiàng)l件下，不同播種期穿心蓮藥效成份穿心蓮內(nèi)酯、脫水穿心蓮內(nèi)酯及內(nèi)酯總量均有所變化。隨著播種期的延后，穿心蓮內(nèi)酯含量呈現(xiàn)降低趨勢(shì)，脫水穿心蓮內(nèi)酯含量波動(dòng)不明顯。穿心蓮內(nèi)酯含量以播種期3月底實(shí)驗(yàn)組最好，高達(dá)4.74%、4月初實(shí)驗(yàn)組稍次，為4.73%，兩者無(wú)明顯差異；其次為4月中旬實(shí)驗(yàn)組，為4.44%，4月底實(shí)驗(yàn)組穿心蓮內(nèi)酯含量最低，僅為3.73%；脫水穿心蓮內(nèi)酯含量以播種期4月初實(shí)驗(yàn)組較高，為0.71%，3月底及4月底實(shí)驗(yàn)組稍低，為0.51%，4月中旬實(shí)驗(yàn)組最低，僅為0.43%；穿心蓮內(nèi)酯總量以播種期4月初實(shí)驗(yàn)組最高，為5.44%，3月底實(shí)驗(yàn)組稍低，為5.27%，4月底內(nèi)酯總量最低，僅為4.26%；通過(guò)表2數(shù)據(jù)可知，不同播種期的穿心蓮藥材，穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯的總量均遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過(guò)“中國(guó)藥典”該品種項(xiàng)下的含量標(biāo)準(zhǔn)（不得少于0.80%）。因此，從穿心蓮有效成分含量指標(biāo)來(lái)看，播種期以4月初實(shí)驗(yàn)組最佳。

表2 不同播種時(shí)期對(duì)穿心蓮質(zhì)量的影響（n=5）

3 討論與結(jié)論

上述結(jié)果分析可知，在相同播種量、相同田間管理?xiàng)l件下，不同播種期對(duì)穿心蓮產(chǎn)量及質(zhì)量均有一定的影響。穿心蓮喜溫暖濕潤(rùn)氣候，怕干旱，故4月初及4月中旬播種，穿心蓮藥材的產(chǎn)量和含量均相對(duì)較高；3月底播種，由于環(huán)境溫度較低，前期生長(zhǎng)受到抑制，植株偏矮，造成其畝產(chǎn)量較低；而4月底播種時(shí)，穿心蓮發(fā)芽后在幼苗期至快速生長(zhǎng)階段，隨著環(huán)境溫度的升高，穿心蓮植株生長(zhǎng)未能及時(shí)封行，水分蒸發(fā)較快，增加田間管理難度。

穿心蓮畝產(chǎn)量與穿心蓮內(nèi)酯含量、脫水穿心蓮內(nèi)酯含量、內(nèi)酯總量間部分呈現(xiàn)負(fù)相關(guān)，說(shuō)明穿心蓮的產(chǎn)量性狀與質(zhì)量性狀是一對(duì)矛盾體。為達(dá)到效益的最大化，追求最大的經(jīng)濟(jì)產(chǎn)量，參考本研究結(jié)果并結(jié)合 “喜炎平注射液” 產(chǎn)品對(duì)原材料的要求，筆者以穿心蓮內(nèi)酯含量及畝產(chǎn)量為指標(biāo)，計(jì)算畝產(chǎn)穿心蓮內(nèi)酯量（畝產(chǎn)穿心蓮內(nèi)酯量=穿心蓮內(nèi)酯含量×畝產(chǎn)量），以畝產(chǎn)穿心蓮內(nèi)酯量為主要評(píng)判指標(biāo)確定穿心蓮最佳播種期。結(jié)果表明，畝產(chǎn)穿心蓮內(nèi)酯量以4月初播種實(shí)驗(yàn)組最高，為21.11kg，4月中旬播種實(shí)驗(yàn)組稍低，畝產(chǎn)穿心蓮內(nèi)酯量為20.54kg，3月底播種實(shí)驗(yàn)組畝產(chǎn)穿心蓮內(nèi)酯量為18.46kg，4月底播種實(shí)驗(yàn)組最低，畝產(chǎn)穿心蓮內(nèi)酯量?jī)H為16.81kg。

綜上所述，本研究初步確定粵西地區(qū)穿心蓮最佳播種期為4月初，研究結(jié)果與廣東湛江種植歷史背景基本吻合，為實(shí)現(xiàn)穿心蓮藥用植物資源的可持續(xù)利用及發(fā)展提供技術(shù)支持，同時(shí)為后續(xù)在粵西地區(qū)開(kāi)展穿心蓮規(guī)范化種植提供理論依據(jù)。