李丹丹 隋路
【摘要】目的:探討分析細菌培養、革蘭染色和PCR這幾種檢驗方式對陰道細菌檢驗的檢出率。方法:選取2013年1月至3月來我院接受治療的陰道疾病患者進行分析,取患者的陰道分泌物樣本,并使用細菌培養、革蘭染色及PCR這幾種檢驗方式,對檢驗的結果進行比較分析,對比三中檢驗方式的臨床檢出率情況。結果:經過檢驗后,將細菌培養作為金標準,革蘭染色法的臨床檢出率是75%,PCR的臨床檢出率是、9706%;PCR檢驗結果和細菌培養檢驗結果無統計學差異性,P>005,格蘭染色法和細菌培養檢測結果存在統計學差異性,P<001;PCR檢測和革蘭染色檢測的結果存在統計學差異性,P<005。結論:陰道細菌檢驗可以選擇PCR檢驗法使用較為便捷,且臨床診斷的準確率比較高,符合臨床診斷需要,為陰道細菌檢驗提供幫助,選擇最合適的檢驗方式,提升檢驗的準確度,讓患者的治療更加順利便捷,值得推廣使用。
【關鍵詞】陰道細菌;細菌培養;PCR;革蘭染色法
【中圖分類號】R71173
【文獻標志碼】B
【文章編號】1005-0019(2018)09-210-01
健康女性的陰道內所有菌群都會處于相對平衡的狀態,而當自身免疫減弱或者內部環境出現變化的時候,菌群的數量就會出現變化,導致菌群失衡,引起陰道發炎[1]。陰道炎是婦科中的高發感染性疾病,炎癥會引起異位妊娠、急性盆腔炎和不孕癥[2]。此次我院針對陰道分泌性開展了不同檢驗方式的研究,探討臨床最佳的檢驗方式,現進行以下報道。
1資料與方法
11一般資料根據2013年1月至3月來我院接受治療的陰道疾病患者86例來分析研究,最小患者是21歲,最大患者是48歲,平均(2863±426)歲;全部患者的陰道炎癥明顯,并且陰道瘙癢明顯,有白帶分泌物存在。
12方法
121樣本采集為患者進行樣本采集,取陰道分泌物,分別使用三種不同的檢驗方式,患者采集樣本時,取截石體位,使用無菌陰道鏡來進行分泌物的采集,用棉簽沾取并置入無菌生理鹽水試管,轉移到試管內。
122細菌培養方法將樣本去除,在無菌的環境下進行接種、分離和培養等操作,在二氧化碳培養箱內進行培養,控制好溫度,培養完成后,取滴露狀菌株來進行生化檢驗。
123革蘭染色方法將樣本取出置于經乙醇溶液浸泡擦干的玻片上,通過醫學顯微鏡來觀察樣本情況。
124PCR方法提取500μL試管中的陰道分泌物樣本放入至生理鹽水中,以12000r/min速度離心10min后去清除上清液,加入帶有適當堿性的裂解液,于98℃溫度下加熱10min,以12000r/min速度再次離心5min,取上清液制備為DNA模板。無添加物的DNA作為陰性組,添加了DNA模板后的PCR擴容作為陽性組。將兩組進行對比分析,檢查PCR的產物與擴容情況,自總體積當中取得25 μL引物、模板、緩沖液及離子水,以無菌石蠟油30μl將其覆蓋,進入至PCR循環,循環共32環[3]。
13統計學分析法3種檢驗方法的檢驗結果進行循環對比,采取x2檢驗,使用SPSS190軟件進行計算;以細菌培養法檢驗結果為金標準,計算革蘭染色法與PCR法陽性檢出率。
2結果
經過檢驗后,將細菌培養作為金標準,革蘭染色法的臨床檢出率是75%,PCR的臨床檢出率是、9706%;PCR檢驗結果和細菌培養檢驗結果無統計學差異性,P>005,格蘭染色法和細菌培養檢測結果存在統計學差異性,P<001;PCR檢測和革蘭染色檢測的結果存在統計學差異性,P<005。
3討論
細菌檢驗在臨床中扮演者非常重要的角色,它是為患者提供病情分析依據,治療依據,預后分析依據的可靠手段,為臨床科學治療提供指導性意見,對于疾病的傳播防控具有非常好的效果。陰道炎患者的臨床發病是因為陰道上皮細胞在陰道內環境影響下,受到了細菌侵襲,表層糖元被細菌浸潤,陰道內的酸堿度失衡,桿菌數量減少,致病菌數量增加而引起的陰道炎癥。陰道炎患者的發病緩慢,初期癥狀比較隱蔽,很難被患者察覺,因此臨床總提供可靠的診斷非常重要,陰道細菌檢驗是對陰道病情進行診斷的有效方式,檢驗的準確度和病菌的確定對后續治療都非常重要。
現在臨床中使用比較多的額陰道細菌檢驗方式主要是細菌培養法、PCR法及革蘭染色法等。細菌檢驗法在臨床檢驗中被當成檢驗的金標準來使用,可是該種檢驗方式比較復雜,設備和環境的要求比較高,在基層醫院中很難進行推廣,因此其使用受到了一定的限制。革蘭染色檢驗方式的操作簡單,臨床中使用較多,可是受到多方面因素的影響,其結果準確率不夠高,并且檢驗過程的誤差會影響結果,這些誤差包括了染色時不恰當的脫色,過度脫色會讓革蘭陽性菌在顯微鏡下被當成革蘭陽性菌,而脫色不足又會將革蘭陰性菌當成革蘭陰性菌,所以雖然該種檢測方式的操作比較簡單,使用便捷,但是因為結果準確度的問題,不推介。而PCR技術是在1971年就提出來的,該技術融合了敏感性、雜交DNA的特異性以及光譜學精確度等,因此其精確度比較高,使用的簡便程度也比較高。
經過檢驗后,將細菌培養作為金標準,革蘭染色法的臨床檢出率是75%,PCR的臨床檢出率是、9706%;PCR檢驗結果和細菌培養檢驗結果無統計學差異性,P>005,格蘭染色法和細菌培養檢測結果存在統計學差異性,P<001;PCR檢測和革蘭染色檢測的結果存在統計學差異性,P<005。該結果顯示,PCR檢驗方式對陰道細菌檢驗的臨床效果比較突出,患者的陽性率比較高,該種檢驗方式操作簡單,快速便捷,因此在陰道檢驗中可以進行推廣使用。
總而言之,陰道細菌檢驗的方式方法比較多,而臨床中探討分析各種檢驗方式的優缺點能夠為臨床檢驗提供參考,選擇最合適的檢驗方式,提升檢驗的準確度,讓患者的治療更加順利便捷。
參考文獻
[1]鐘里華.156例婦女陰道細菌臨床檢驗方法的比較分析[J].中國醫藥指南,2013,11(19):553-554
[2]史躍杰.99例陰道細菌的檢驗方法比較分析[J].現代預防醫學,2011,38(14):2815-2817
[3]吳祥如.實驗室對陰道細菌的兩種檢驗方法對比[J].中國衛生產業,2013,10(32):18-18,20