不同免疫檢驗(yàn)方法檢測(cè)抗HIV結(jié)果的可靠性分析

孫宗祥，劉旭翠，陳玫君 ，孫克濤

1.煙臺(tái)市中心血站檢驗(yàn)科，山東煙臺(tái) 264003；2．煙臺(tái)市醫(yī)學(xué)科學(xué)技術(shù)研究所科學(xué)管理辦公室，山東煙臺(tái)264000；3.煙臺(tái)市牟平區(qū)中醫(yī)醫(yī)院檢驗(yàn)科，山東煙臺(tái)264100；4.淄博市中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，山東淄博 255000

艾滋病屬于一種傳染性疾病，病原體為人類免疫缺陷病毒（HIV），主要是通過母嬰、血液、性接觸進(jìn)行傳播，該病毒會(huì)對(duì)T淋巴細(xì)胞產(chǎn)生嚴(yán)重破壞，致使機(jī)體免疫力下降，進(jìn)而被多種疾病感染，嚴(yán)重者會(huì)出現(xiàn)惡性腫瘤，病死率極高，威脅人類的生命健康[1-2]。目前臨床還未研究出確切的治療HIV病毒的特效藥與治療方法，而HIV的潛伏期較長(zhǎng)，不容易發(fā)覺。因此，如何科學(xué)快速確診HIV病毒攜帶，對(duì)預(yù)防艾滋病傳播意義非凡。該文旨在探析2015年1月—2018年1月HIV患者82例抗HIV采用不同免疫檢驗(yàn)方法進(jìn)行檢測(cè)的結(jié)果可靠性，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取該院接收的HIV患者82例，患者均簽署知情同意書，且研究經(jīng)過倫理委員會(huì)的批準(zhǔn)，年齡19～64歲，平均年齡（38.93±10.65）歲，其中男 42例，女 40例，體質(zhì)量43～64 kg，平均（49.73±11.67）kg，研究所用的質(zhì)控品由衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心提供，其中HIV抗體陰性有35例，HIV抗體陽性47例，16份血清2 NCU/mL、16份血清4 NCU/mL及50份室間質(zhì)量評(píng)價(jià)血清。

1.2 方法

①金免疫層析試驗(yàn)：加樣于金免疫試紙加樣區(qū)，使其浸在待檢樣本內(nèi)，等待10 s后認(rèn)真查看試紙顏色的變化狀況，如出現(xiàn)2條紅線提示檢測(cè)結(jié)果為陽性，若出現(xiàn)1條紅線則結(jié)果為陰性，查看陰性樣本的時(shí)間需超過30 min；②ELISA法分成雙抗原夾心法ELISA與間接ELISA，采用上海科華生物工程股份有限公司生產(chǎn)的HIV抗體診斷試劑盒，操作步驟和流程需嚴(yán)格依據(jù)對(duì)應(yīng)的實(shí)際使用說明實(shí)施操作,全部操作過程和檢測(cè)過程需確保標(biāo)準(zhǔn)的清潔標(biāo)準(zhǔn)，操作人員、材質(zhì)器械、操作室均進(jìn)行嚴(yán)格的消毒，然后方可實(shí)施檢驗(yàn)。

1.3 觀察指標(biāo)和評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)

記錄兩種檢測(cè)方法對(duì)2 NCU/mL血清、室間質(zhì)量評(píng)價(jià)血清與4 NCU/mL血清的陽性率；記錄兩種檢驗(yàn)方法的準(zhǔn)確率、特異度及敏感度；同時(shí)記錄兩種方法的假陽性率。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

全部數(shù)據(jù)均采用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理，計(jì)數(shù)資料用[n(%)]表示，比較采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩種檢測(cè)方法血清陽性結(jié)果比較

ELISA法檢驗(yàn)室間質(zhì)量評(píng)價(jià)血清、血清2 NCU/mL及血清4 NCU/mL的陽性率均優(yōu)于金免疫層析試驗(yàn) （P＜0.05），見表 1。

表1 兩種檢測(cè)方法血清陽性結(jié)果對(duì)比[n（%）]

2.2 兩種檢測(cè)方法準(zhǔn)確率、敏感度與特異度比較

ELISA法的特異度、準(zhǔn)確率及敏感度相比于金免疫層析試驗(yàn)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表2。

表2 兩種檢測(cè)方法準(zhǔn)確率、敏感度與特異度對(duì)比[n（%）]

2.3 兩種檢測(cè)方法假陽性率比較

ELISA法假陽性率顯著低于金免疫層析試驗(yàn) （P＜0.05），見表 3。

表3 兩種檢測(cè)方法假陽性率對(duì)比[n（%）]

3 討論

艾滋病是目前治療十分困難的疾病之一，該疾病受到的關(guān)注程度非常高，由于該病的發(fā)病原理十分復(fù)雜，會(huì)累及機(jī)體多個(gè)器官及系統(tǒng)，當(dāng)前還未有科學(xué)有效的治療手段，加上傳染性極高，患上疾病后不單對(duì)患者的日常生活與工作產(chǎn)生極大影響，更值得留意的是該病有較高的致死率，目前,社會(huì)各界對(duì)該病的預(yù)防與治療是十分重視的[3]。因此，及時(shí)有效發(fā)現(xiàn)與確診艾滋病，才能將患者更好的隔離開，以有效減少其傳播范圍。

該次研究結(jié)果顯示，ELISA法對(duì)血清2 NCU/mL、室間質(zhì)量評(píng)價(jià)血清與血清4 NCU/mL的檢驗(yàn)陽性率分別為100.00%、100.00%、100.00%，高于金免疫層析試驗(yàn)，并且該檢驗(yàn)方法的假陽性率與金免疫層析試驗(yàn)14.63%相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，結(jié)果與蔡勇進(jìn)[3]相關(guān)研究數(shù)據(jù)相符合（ELISA法檢驗(yàn)定值質(zhì)控血清2 NCU/mL和4 NCU/mL、室間質(zhì)量評(píng)價(jià)血清檢驗(yàn)陽性率均為100.0%），進(jìn)一步證實(shí)ELISA法檢驗(yàn)陽性率比較高，且假陽性率低，檢測(cè)結(jié)果可靠性更強(qiáng)。原因分析在于：艾滋病主要的傳播途徑有性傳播、血液傳播及母嬰傳播3種，確診艾滋病后通過阻斷對(duì)應(yīng)的傳播方式即可很大程度降低感染疾病的概率。因此，準(zhǔn)確診斷艾滋病是十分重要的，選取一種快速、精準(zhǔn)的檢測(cè)方法可以有效判斷是否感染艾滋病，以提升預(yù)防效果。目前臨床診斷HIV的過程中，較為常見的檢測(cè)方法有間接酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、金免疫層析試驗(yàn)與ELISA法，每一種檢測(cè)手段都有各自的優(yōu)缺點(diǎn)，因此，臨床當(dāng)前針對(duì)該3種檢測(cè)方法結(jié)果的可靠性仍存在一定的爭(zhēng)議[4]。檢測(cè)過程中用到的ELISA試劑、免疫金標(biāo)試紙等均為抗HIV結(jié)果檢驗(yàn)時(shí)不可或缺的試劑，由其出現(xiàn)的顏色反應(yīng)鑒別對(duì)應(yīng)的結(jié)果。本次研究通過應(yīng)用兩種檢測(cè)手段檢測(cè)82例HIV患者的血清樣本，金免疫層析試驗(yàn)具有較高的假陽性率。金免疫層析試驗(yàn)?zāi)軌驕p少處理標(biāo)本這一環(huán)節(jié)，其受到溫度與濕度的影響較小，在實(shí)施檢測(cè)的操作時(shí)，無需用到儀器設(shè)備，操作方法較為簡(jiǎn)便，不單能夠?qū)ρ簶颖具M(jìn)行單獨(dú)檢驗(yàn)，還能批量檢測(cè)血液樣本[5]。但該方法的特異性不高，同時(shí)檢測(cè)時(shí)需保持樣本的新鮮，有一定的局限性。ELISA法包括間接酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)與雙抗原夾心兩種方法，屬于當(dāng)前臨床用于檢測(cè)抗HIV最主要的手段，該檢測(cè)方法的結(jié)果是通過儀器進(jìn)行處理分析，數(shù)據(jù)結(jié)果更為準(zhǔn)確與客觀，同時(shí)檢測(cè)到的數(shù)據(jù)能夠輸?shù)诫娔X內(nèi)進(jìn)行對(duì)應(yīng)的存儲(chǔ)操作，相較于其他檢測(cè)手段，該手段更為科學(xué)化和自動(dòng)化。同時(shí)敏感度、特異度與準(zhǔn)確率分別為91.43%、97.87%、96.34%，均優(yōu)于金免疫層析試驗(yàn)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，該研究結(jié)果與楊黎普[6]研究文獻(xiàn)數(shù)據(jù)相符合（ELISA法檢測(cè)的敏感度為96.0%、特異度為92.0%、準(zhǔn)確度為97.3%）,進(jìn)一步證實(shí)與金免疫層析試驗(yàn)法相比較，采用ELISA法檢測(cè)抗HIV的準(zhǔn)確率更優(yōu)越，特異度與敏感度較高。原因分析考慮為，ELISA法的敏感度來自于基團(tuán)的酶，其產(chǎn)生的顯色反應(yīng)較為明顯，肉眼即可觀測(cè)到，實(shí)現(xiàn)了在亞細(xì)胞或細(xì)胞水平上抗體或抗原所在的位置，同時(shí)特異性強(qiáng)，主要是由于抗原或抗體的選擇性，抗體抗原結(jié)合的發(fā)生位置在空間構(gòu)型與化學(xué)結(jié)構(gòu)上存在互補(bǔ)的關(guān)系，因此特異性較高，漏診率較低[7]。我國(guó)目前用于免疫診斷的試劑類型較為多樣，質(zhì)量上也有一定的區(qū)別，因此，需對(duì)免疫診斷相關(guān)的管理進(jìn)行強(qiáng)化，以提升檢測(cè)的準(zhǔn)確性。ELISA法、間接酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)與金免疫層析試驗(yàn)在抗HIV檢驗(yàn)中均有一定的臨床價(jià)值，但在抗HIV檢測(cè)可靠性上有一定的差異，3種檢測(cè)手段相比較，ELISA法的準(zhǔn)確性與可靠性最高，有助于監(jiān)測(cè)抗HIV，具有十分重要的臨床意義。但值得注意的是，ELISA法檢驗(yàn)過程比較繁雜，易被多種因素干擾，加上檢測(cè)時(shí)間較長(zhǎng)，因此，對(duì)操作人員的專業(yè)知識(shí)與技術(shù)水平要求更高。作為1名醫(yī)護(hù)人員，醫(yī)學(xué)的準(zhǔn)確性是需要不斷追求的，特別是針對(duì)艾滋病此類危害性較大的疾病，任何判斷不準(zhǔn)確與疏忽都會(huì)極大傷害到患者，一旦確診患上艾滋病，對(duì)任何人都是極為殘酷的一件事，因此，精準(zhǔn)的檢測(cè)與診斷是十分重要的[8]。受研究時(shí)間、樣本例數(shù)等因素限制，關(guān)于抗HIV結(jié)果運(yùn)用不同檢測(cè)方法的可靠性還存在較多不足之處，有待臨床進(jìn)一步研究。

綜上所述，ELISA法對(duì)抗HIV的檢測(cè)結(jié)果比金免疫層析試驗(yàn)法更為可靠，不單具有較高的準(zhǔn)確率，同時(shí)敏感度及特異度均較高，臨床可行性良好。