HIF-1α蛋白在胃癌患者組織、癌旁組織中的表達(dá)及與其TNM 分期的關(guān)聯(lián)性分析

侯志斌

【摘要】目的：分析缺氧誘導(dǎo)因子-1α（HIF-1α）、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1（TGF-β1）、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）蛋白在胃癌患者組織、癌旁組織中的表達(dá)情況。方法：選取2017年5月～2019年7月我院胃癌手術(shù)切除標(biāo)本138例，對(duì)比HIF-1α、TGF-β1、VEGF蛋白在胃癌、癌旁組織中的陽(yáng)性表達(dá)情況，并分析HIF-1α、TGF-β1、VEGF陽(yáng)性表達(dá)與胃癌患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、浸潤(rùn)程度、TNM分期的相關(guān)性。結(jié)果：胃癌組織HIF-1α、TGF-β1、VEGF陽(yáng)性表達(dá)率高于癌旁組織（P<0.05）;胃癌患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、浸潤(rùn)程度、TNM分期等不同臨床病理?xiàng)l件的HIF-1α、TGF-β1、VEGF陽(yáng)性表達(dá)率均存在明顯差異（P<0.05）;Spearman相關(guān)性分析結(jié)果顯示：HIF-1α、TGF-β1、VEGF陽(yáng)性表達(dá)與胃癌患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移（r=0.637，P<0.001;r=0.582，P=0.005;r=0.604，P<0.001）、浸潤(rùn)程度（r=0.539，P=0.004;r=0.619，P<0.001;r=0.574，P=0.003）、TNM分期（r=0.626，P=<0.001;r=0.594，P=0.004;r=0.568，P=0.001）呈正相關(guān)。結(jié)論：HIF-1α、TGF-β1、VEGF在胃癌組織中呈異常高表達(dá)狀態(tài)，且其與胃癌患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、浸潤(rùn)程度、TNM分期呈正相關(guān)，檢測(cè)三者陽(yáng)性表達(dá)情況可作為評(píng)估胃癌患者病情的參考指標(biāo)，對(duì)臨床早期治療有重要意義。

【關(guān)鍵詞】HIF-1α蛋白;胃癌;癌旁組織;TNM分期

【中圖分類號(hào)】R735

【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A

【文章編號(hào)】2095-6851（2020）05-241-01

胃癌是臨床常見惡性腫瘤，發(fā)病率高，占惡性腫瘤第4位，呈逐年升高趨勢(shì)，目前臨床治療多采用手術(shù)切除、放療、化療等，但其病情復(fù)雜，易復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移，患者5年生存率不足50%，降低患者生存質(zhì)量[1]。相關(guān)研究證實(shí)，缺氧誘導(dǎo)因子-1α（HIF-1α）、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1（TGF-β1）、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）蛋白與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展有關(guān)。基于此，本研究選取我院胃癌手術(shù)切除標(biāo)本138例，旨在分析其在在胃癌患者組織及癌旁組織中的表達(dá)情況。現(xiàn)報(bào)告如下。

1?資料與方法

1.1?一般資料?本研究經(jīng)我院倫理委員會(huì)審核通過，選取2017年5月～2019年7月我院胃癌手術(shù)切除標(biāo)本138例。其中男80例，女58例，年齡24～85歲，平均（54.75±14.39）歲;腫瘤直徑：<5cm 48例，≥5cm 90例，分化程度：低分化86例，中、高分化52例，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)有轉(zhuǎn)移105例，無轉(zhuǎn)移33例;浸潤(rùn)程度：黏膜下層50例，漿膜88例;TNM分期：Ⅰ、Ⅱ期55例，Ⅲ、Ⅳ期83例。所有患者術(shù)前均未行放療及化療。排除合并其他腫瘤患者、免疫系統(tǒng)功能障礙者、不配合本研究者。

1.2?方法?（1）免疫組織化學(xué)染色：標(biāo)本均經(jīng)10%中性福爾馬林固定和常規(guī)石蠟包埋，常規(guī)切片并脫蠟至水。采用磷酸鹽緩沖液（PBS）沖洗5min×2次，用3%過氧化氫溶液室溫封閉10min，蒸餾水沖洗3次，利于90℃微波抗原修復(fù)10min;PBS沖洗5min×3次，滴加正常山羊血清封閉特異性抗原位點(diǎn)，室溫封閉20min，甩去多余液體，滴加一抗，置于4℃冰箱過夜;PBS沖洗5min×3次，滴加生物素化二抗，37℃孵育20min;PBS沖洗2min×3次;滴加細(xì)胞免疫組化（SABC）試劑，20～37℃孵育20min;PBS沖洗5min×4次，二氨基聯(lián)苯胺（DAB）顯色，蒸餾水沖洗;蘇木精復(fù)染1min、鹽酸乙醇分化，氨水返藍(lán)，常規(guī)脫水、透明、封固、鏡檢。兔抗人成熟型HIF-1α、TGF-β1及VEGF多克隆抗體，SABC試劑盒、DAB顯色試劑盒均購(gòu)自北京博奧森公司。（2）判斷標(biāo)準(zhǔn)：TGF-β1、VEGF定位于細(xì)胞質(zhì)中，HIF-1α定位于細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)中。采用半定量積分法判斷陽(yáng)性結(jié)果：按染色強(qiáng)度評(píng)分：無染色為0分，淺黃色1為分，棕黃色為2分，棕褐色為3分;高倍鏡（×400）下隨機(jī)對(duì)每張切片取10個(gè)視野，每個(gè)視野計(jì)數(shù)100個(gè)細(xì)胞，計(jì)算陽(yáng)性細(xì)胞占同類細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)：細(xì)胞陽(yáng)性率無為0分，<25%為1分，25%～50%為2分，>50%為3分。二者積分乘積大于2判定為陽(yáng)性，小于2判定為陰性。

1.3?觀察指標(biāo)?（1）HIF-1α、TGF-β1、VEGF蛋白在胃癌、癌旁組織中的陽(yáng)性表達(dá)情況。（2）不同臨床病理?xiàng)l件的HIF-1α、TGF-β1、VEGF陽(yáng)性表達(dá)情況。（3）HIF-1α、TGF-β1、VEGF陽(yáng)性表達(dá)與胃癌患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、浸潤(rùn)程度、TNM分期的相關(guān)性。

1.4?統(tǒng)計(jì)學(xué)分析?以SPSS23.0分析，計(jì)數(shù)資料以n（%）表示，行χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料以（x±s）表示，行t檢驗(yàn)，采用Spearman進(jìn)行相關(guān)性分析，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2?結(jié)果

2.1?HIF-1α、TGF-β1、VEGF蛋白在胃癌、癌旁組織中的陽(yáng)性表達(dá)情況。胃癌組織HIF-1α、TGF-β1、VEGF陽(yáng)性表達(dá)率高于癌旁組織（P<0.05）。見表1。

2.2?不同臨床病理?xiàng)l件的HIF-1α、TGF-β1、VEGF陽(yáng)性表達(dá)情況。胃癌患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、浸潤(rùn)程度、TNM分期等不同臨床病理?xiàng)l件的HIF-1α、TGF-β1、VEGF陽(yáng)性表達(dá)率均存在明顯差異（P<0.05）。

3?討論

胃癌是消化道常見惡性腫瘤，其病因復(fù)雜，與遺傳、環(huán)境、飲食習(xí)慣等因素相關(guān)，死亡率較高，位居惡性腫瘤第2位，威脅患者生命健康，因此，早期診斷、及時(shí)治療對(duì)臨床改善患者預(yù)后有重要作用。

本研究結(jié)果還顯示，胃癌患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、浸潤(rùn)程度、TNM分期等不同臨床病理?xiàng)l件的HIF-1α、TGF-β1、VEGF陽(yáng)性表達(dá)率均存在明顯差異（P<0.05）;Spearman相關(guān)性分析結(jié)果顯示：HIF-1α、TGF-β1、VEGF陽(yáng)性表達(dá)與胃癌患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、浸潤(rùn)程度、TNM分期呈正相關(guān)（P<0.05），表明HIF-1α、TGF-β1、VEGF與胃癌患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、浸潤(rùn)程度、TNM分期呈正相關(guān)，檢測(cè)三者陽(yáng)性表達(dá)情況可作為評(píng)估胃癌患者病情的參考指標(biāo)。

綜上可知，HIF-1α、TGF-β1、VEGF在胃癌組織中呈異常高表達(dá)狀態(tài)，且其與胃癌患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、浸潤(rùn)程度、TNM分期呈正相關(guān)，檢測(cè)三者陽(yáng)性表達(dá)情況可作為評(píng)估胃癌患者病情的參考指標(biāo)，對(duì)臨床早期治療有重要意義。

參考文獻(xiàn)：

[1]?劉鵬，劉玉剛，曠建剛，等.膀胱癌組織中NF-κB1、VEGF-C、Smad4與HIF-1α表達(dá)及其意義分析[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志，2017，26（12）：1349-1351.