臨床病理技術(shù)在胸腔積液細(xì)胞塊中的臨床分析

陳惠芹

（福建省廈門(mén)大學(xué)附屬第一醫(yī)院杏林分院病理科，福建 廈門(mén) 361022）

作為胸部腫瘤患者的常見(jiàn)并發(fā)癥，胸腔積液主要是因癌細(xì)胞的刺激性、癌栓阻塞淋巴管造成的組織液回流障礙。雖然多數(shù)胸腔積液可以應(yīng)用常規(guī)細(xì)胞學(xué)涂片常規(guī)染色法測(cè)定，敏感度高達(dá)68.3%，但是根據(jù)臨床數(shù)據(jù)證實(shí)，細(xì)胞涂片法的應(yīng)用在臨床中缺少客觀標(biāo)準(zhǔn)，不能及時(shí)的測(cè)定間皮細(xì)胞以及腺癌細(xì)胞，無(wú)法對(duì)腫瘤來(lái)源類(lèi)型進(jìn)行判定，容易導(dǎo)致誤診情況發(fā)生，所以臨床中需要?jiǎng)?chuàng)新檢測(cè)方法。針對(duì)于此，本文將以我院于2017年3月至2018年3月所收集的懷疑腫瘤的胸腔積液患者共60例進(jìn)行分析，評(píng)定細(xì)胞塊免疫組化染色的測(cè)定價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料：在2017年3月至2018年3月，我院共收集胸腔積液患者218例，其中臨床懷疑腫瘤的患者60例，其中男性32例，女性28例，最大年齡76歲，最小年齡36歲，中位年齡（35.7±6.5）歲，大學(xué)學(xué)歷11例、高中學(xué)歷32例，高中以下學(xué)歷17例。患者均經(jīng)過(guò)臨床確診，排除精神病癥；肝腎功能障礙以及不配合檢查的患者。

1.2 方法：患者入院后第2日早晨，護(hù)理人員收集100～300 mL胸腔積液，送至病理科在室溫狀態(tài)下靜置20 min，取容器底層標(biāo)本20～50 mL離心5 min/3000 r，去除上清，保留沉淀物并在試管內(nèi)加入10%的中性甲醛福爾馬林約10 mL固定沉淀物，固定時(shí)間為4～6 h。讓沉淀物處于凝固硬化的狀態(tài)，取細(xì)胞塊放置宣紙上包好于包埋盒里，放進(jìn)自動(dòng)脫水機(jī)中進(jìn)行處理，石蠟包埋，細(xì)胞塊切成厚3～4 μm切片，在65 ℃狀態(tài)下烘干約60 min，將細(xì)胞涂片以及細(xì)胞塊切片進(jìn)行HE染色和陽(yáng)性片行免疫組化學(xué)檢測(cè)（依據(jù)試劑盒說(shuō)明進(jìn)行處理）。

1.3 判定依據(jù)：免疫組化染色標(biāo)本陽(yáng)性：CEA、CK7和TTF1在胞質(zhì)或者胞質(zhì)以及包膜和胞核出現(xiàn)棕黃色顆粒。WT-1在細(xì)胞核出現(xiàn)棕黃色顆粒，間皮細(xì)胞或者腺癌10%以上細(xì)胞陽(yáng)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析：本次研究的所有數(shù)據(jù)均行SPSS17.0軟件處理，其中兩種測(cè)定方式陽(yáng)性率方式對(duì)比用率（%）的形式表示，行χ2檢驗(yàn)，P＜0.05差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 兩種檢測(cè)方法陽(yáng)性率分析：細(xì)胞塊切片免疫組化染色法陽(yáng)性率優(yōu)于細(xì)胞學(xué)涂片染色測(cè)定陽(yáng)性率，兩種方法比較，差異性顯著（P＜0.05），見(jiàn)表1。

表1 兩種測(cè)定方法陽(yáng)性率分析

2.2 腺癌和間皮細(xì)胞不同抗體表達(dá)情況：腺癌細(xì)胞中：CEA 93.3%、CR 3.3%、CK7 98.3%、TTF-1 93.3%、WT-1 28.3%；間皮性腫瘤細(xì)胞中：CEA 10.0%、CR 86.7%、CK7 73.3%、TTF-1 3.3%、WT-1 85.0%。

3 討 論

胸腔積液主要來(lái)源于非小細(xì)胞肺癌以及惡性胸膜間皮瘤病癥，受到癌細(xì)胞刺激、癌栓阻塞淋巴管以及血管導(dǎo)致的組織液回流障礙造成這一病癥出現(xiàn)，是胸部腫瘤的多見(jiàn)并發(fā)癥。胸腔積液的主要臨床特征為胸膜腔內(nèi)的病理性反應(yīng)出現(xiàn)，液體不斷的積聚造成的臨床反應(yīng)[1]，因胸膜腔屬于臟層以及壁層胸膜之間的潛在間隙，普通人胸膜腔內(nèi)存在5～50 mL的液體[2]，在進(jìn)行運(yùn)動(dòng)和呼吸進(jìn)行中產(chǎn)生潤(rùn)滑的效果[3]，因此無(wú)論是內(nèi)部因素或者是外部因素的發(fā)生均會(huì)造成胸膜腔內(nèi)液體出現(xiàn)增多或者降低的情況，臨床胸腔積液病癥發(fā)生[4]。臨床中多行細(xì)胞學(xué)涂片法予以測(cè)定，操作方便、容易便于掌握，還能夠有效保證細(xì)胞學(xué)形態(tài)特征，但是臨床實(shí)踐證實(shí)[5]，細(xì)胞學(xué)涂片的準(zhǔn)確度以及敏感度均較低，特別是惡性胸腔積液，診斷率在68.3%左右[6]，單獨(dú)應(yīng)用細(xì)胞涂片染色來(lái)判定治療方法會(huì)導(dǎo)致誤診情況出現(xiàn)。所以，一旦惡性腫瘤患者并發(fā)胸腔積液情況，間皮細(xì)胞以及腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞形態(tài)十分相似[7]，這一情況的發(fā)生主要是因?yàn)檫@兩種細(xì)胞均浸泡在其中，受到胸腔積液的刺激均會(huì)造成形態(tài)學(xué)變化出現(xiàn)[8]，所以，應(yīng)用基礎(chǔ)方式無(wú)法有效的對(duì)這兩種細(xì)胞進(jìn)行鑒別。作為一種病理測(cè)定方式，免疫組化染色主要是應(yīng)用已經(jīng)標(biāo)記的特異性抗體來(lái)測(cè)定細(xì)胞內(nèi)的未知抗原體，通過(guò)酶出現(xiàn)的著色反映，顯示細(xì)胞活性，這種方式操作方便。根據(jù)本次研究證實(shí)，細(xì)胞學(xué)涂片陽(yáng)性率68.3%，細(xì)胞塊切片和免疫組化染色陽(yáng)性率100%，組間對(duì)比差異性顯著（P＜0.05）；腺癌細(xì)胞中：CEA 93.3%、CR 3.3%、CK7 98.3%、TTF1 93.3%、WT-1 28.3%。間皮性腫瘤細(xì)胞中：CEA 10.0%、CR 86.7%、CK7 73.3%、TTF-1 3.3%、WT-1 85.0%。

臨床研究證實(shí)，細(xì)胞塊能夠減少穿刺活檢的傷害，作為一種無(wú)創(chuàng)型方式，切片中的腫瘤細(xì)胞保證了原發(fā)灶的抗原特異性，因癌細(xì)胞豐富處于集中狀態(tài)，保證了部分組織結(jié)構(gòu)，另外，細(xì)胞塊切片細(xì)胞分布處于均勻狀態(tài)，保證脫落細(xì)胞實(shí)際形態(tài)構(gòu)造，在鑒別測(cè)定的過(guò)程中能夠辨別細(xì)胞形態(tài)。

綜上所述，細(xì)胞塊切片免疫組化染色不管是病理診斷的敏感度還是特異度特征，均優(yōu)于細(xì)胞涂片染色，能夠防止誤診情況發(fā)生，是臨床準(zhǔn)確度較高的測(cè)定胸腔積液方式。但是因本文研究年限以及例數(shù)存在一定限制，需要臨床進(jìn)一步的對(duì)此進(jìn)行研究，但綜合以上結(jié)論，細(xì)胞塊切片免疫組化染色操作方式簡(jiǎn)便，標(biāo)本容易放置，臨床推廣價(jià)值存在。