百子蓮子房組織培養(yǎng)研究

李成慧 韋慶華 汪成忠 錢劍林

摘 要：以百子蓮子房為外植體，采用不同培養(yǎng)基對(duì)百子蓮愈傷、不定芽誘導(dǎo)、生根培養(yǎng)進(jìn)行研究，以建立百子蓮組培快繁體系。試驗(yàn)結(jié)果表明：在MS+6-BA2mg/L+NAA0.1mg/L的培養(yǎng)基上愈傷誘導(dǎo)率最高，為32.4%；在MS+6-BA3mg/L+NAA0.1mg/L的培養(yǎng)基上不定芽增殖系數(shù)最高，為5.1；在1/2MS+NAA0.2mg/L的培養(yǎng)基上平均根數(shù)最多，為5.3，生根率達(dá)100%。

關(guān)鍵詞：百子蓮；子房；組織培養(yǎng)

中圖分類號(hào) S629 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 1007-7731（2018）21-0051-02

The Tissue Culture of Agapanthus praecox

Li Chenghui et al.

（Suzhou Polytechnic Institute of Agriculture，Suzhou 215008，China）

Abstract：In this experiment，the ovaries of Agapanthus were used as explants to study callus，axillary buds induction and rooting culture in different media，in order to establish tissue culture and rapid propagation system of Agapanthus.The results showed that the highest callus induction rate was 32.4% in MS+6-BA2mg/L+NAA0.1mg/L medium，the highest multiplication coefficient was 5.1 in MS+6-BA3mg/L+NAA0.1mg/L medium，and the maximum root number was 5.3 in MS+NAA0.2mg/L medium and the rooting rate was 100%.

Key words：Agapanthus praecox；Ovary；Tissue culture

百子蓮（Agapanthus praecox）又稱藍(lán)百合，為單子葉多年生草本花卉，具有地下肉質(zhì)根狀塊莖，原產(chǎn)于非洲南部的熱帶與亞熱帶地區(qū)。百子蓮屬植物觀賞性很強(qiáng)，具有大的傘形花序，每個(gè)花序著生小花50～130朵，可開放30～40d。因其花色淡雅，花朵姿態(tài)優(yōu)美，花期持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)，在歐美具有“愛情花”之稱，是除了玫瑰花以外最能表達(dá)愛意的愛情花，目前已被廣泛應(yīng)用于切花生產(chǎn)、園林觀賞、干燥花的藝術(shù)創(chuàng)作以及藥用成分提取。我國(guó)引入百子蓮的時(shí)間較短，花卉市場(chǎng)的植物資源稀少，而且其生產(chǎn)中所采用的種苗完全依賴國(guó)外進(jìn)口。百子蓮目前主要的繁殖手段是分株和播種，繁殖速度慢，時(shí)間長(zhǎng)。筆者對(duì)百子蓮新子房組織培養(yǎng)技術(shù)進(jìn)行研究，構(gòu)建了繁育體系，從而滿足園林綠化的需要，推動(dòng)該花卉在蘇南地區(qū)的廣泛應(yīng)用。

1 材料與方法

1.1 供試材料 以蘇州農(nóng)業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院相城科技園內(nèi)4年生露地實(shí)生苗為試驗(yàn)材料，2018年6月份從田間將還未開放的花蕾連同花梗取回作為外植體。

1.2 試驗(yàn)方法 先用洗潔精進(jìn)行表面清洗，并浸泡20min，用流水沖洗干凈。在超凈工作臺(tái)內(nèi)用75%酒精浸泡30s后再用0.1%升汞處理7min，無菌水沖洗5～6遍，再用消毒濾紙吸干表面水分，用解剖刀和鑷子剝?nèi)グ瑢⒆臃窟M(jìn)行橫向剖切形成子房切片。

以MS為基本培養(yǎng)基，初代培養(yǎng)添加6-BA（1、1.5、2、2.5、3mg/L）、NAA0.1mg/L，繼代培養(yǎng)添加6-BA（2、2.5、3、3.5、4mg/L）、NAA（0.1、0.2mg/L）；生根培養(yǎng)以MS、1/2MS為基本培養(yǎng)基，添加NAA（0.1、0.2、0.3mg/L）、AC0.1g/L、蔗糖3%、瓊脂0.7%，pH調(diào)至5.8，高溫高壓濕熱滅菌。初代培養(yǎng)每個(gè)培養(yǎng)瓶接種8個(gè)外植體，每個(gè)處理接種10瓶，重復(fù)3次。最初7d進(jìn)行暗培養(yǎng)，30d后統(tǒng)計(jì)愈傷誘導(dǎo)率。繼代培養(yǎng)每個(gè)處理接種10個(gè)不定芽，重復(fù)3次。觀察并記錄不定芽增殖情況，30d后根據(jù)新芽個(gè)數(shù)和生長(zhǎng)情況統(tǒng)計(jì)增殖率。生根培養(yǎng)每個(gè)處理接種20棵壯苗，重復(fù)3次，30d后根據(jù)根數(shù)和生長(zhǎng)情況統(tǒng)計(jì)生根率。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同6-BA濃度對(duì)百子蓮子房誘導(dǎo)分化的影響 百子蓮子房切片接種7d后基部開始膨大，形成嫩黃色愈傷組織，7d后移至光培養(yǎng)下，20d后逐漸轉(zhuǎn)綠并形成少量芽點(diǎn)。從表1可以看出，隨著6-BA濃度的增加，子房切片愈傷誘導(dǎo)率呈上升趨勢(shì)。在MS+6-BA2mg/L+NAA0.1mg/L培養(yǎng)基上愈傷生長(zhǎng)情況最好，愈傷呈嫩黃色且芽點(diǎn)較多，愈傷誘導(dǎo)率也最高，達(dá)30.1%。6-BA3mg/L時(shí)，雖然愈傷誘導(dǎo)率較高，但是愈傷發(fā)白變硬，后期芽點(diǎn)也較少。

2.2 不同激素配比對(duì)百子蓮不定芽增殖率的影響 將百子蓮已分化的不定芽叢切取下來接種在不同激素水平的培養(yǎng)基上，觀察不定芽增殖情況。總體而言，百子蓮不定芽增殖比較困難，隨著6-BA濃度的增加，不定芽增殖系數(shù)呈上升趨勢(shì)，在6-BA3mg/L時(shí)，形成不定芽數(shù)最多，增殖系數(shù)達(dá)到最高5.1，隨后增殖系數(shù)隨著6-BA濃度的增加又呈下降趨勢(shì)，而NAA2個(gè)不同濃度水平差異不明顯（見表2）。因此，百子蓮不定芽增殖率主要受6-BA影響。較適宜激素配比為6-BA3mg/L+NAA0.1mg/L。

2.3 不同培養(yǎng)基對(duì)百子蓮生根培養(yǎng)的影響 當(dāng)不定芽長(zhǎng)至2～3cm時(shí)，將不定芽切至不同培養(yǎng)基上進(jìn)行生根培養(yǎng)，從表3中可以看出百子蓮生根率總體較高，1/2MS基本培養(yǎng)基生根率要高于MS，隨著NAA濃度增加，生根率呈上升趨勢(shì)，達(dá)到了100%。但根據(jù)平均生根數(shù)來看，NAA0.2mg/L生根數(shù)最多，平均生根5.3條。1/2MS+NAA0.2mg/L+AC0.1g/L培養(yǎng)基最適宜百子蓮生根培養(yǎng)。

2.4 組培苗馴化移栽 百子蓮組培苗長(zhǎng)至3～5cm，并具有2～3條根時(shí)，便可以出瓶移栽。移栽前先將瓶苗移至常溫條件下煉苗5～7d，然后用鑷子輕輕夾出植株，洗凈組培苗基部的培養(yǎng)基，在蛭石：珍珠巖：泥炭=3∶2∶1的基質(zhì)上進(jìn)行栽培，設(shè)施管理，注意遮光處理，然后逐漸增加光照，濕度保持在85%左右，1個(gè)月后成活率為92.3%。

3 小結(jié)

百子蓮種子發(fā)芽率較低，因此通過組織培養(yǎng)建立快繁體系可以實(shí)現(xiàn)百子蓮種苗快速高效的周年生產(chǎn)。試驗(yàn)選用百子蓮子房為外植體，通過不同的激素配比誘導(dǎo)愈傷組織。激素是影響植物器官形成的主要因素，6-BA和NAA配合使用可以提高誘導(dǎo)率，高濃度的6-BA對(duì)不定芽的增殖具有顯著的促進(jìn)作用，1/2MS更利于百子蓮生根培養(yǎng)。百子蓮生根培養(yǎng)較容易，生根率可達(dá)100%，馴化后的組培苗成活率可達(dá)92.3%。

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（責(zé)編：徐世紅）