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百子蓮子房組織培養研究

2018-11-20 10:25:26李成慧韋慶華汪成忠錢劍林
安徽農學通報 2018年21期

李成慧 韋慶華 汪成忠 錢劍林

摘 要:以百子蓮子房為外植體,采用不同培養基對百子蓮愈傷、不定芽誘導、生根培養進行研究,以建立百子蓮組培快繁體系。試驗結果表明:在MS+6-BA2mg/L+NAA0.1mg/L的培養基上愈傷誘導率最高,為32.4%;在MS+6-BA3mg/L+NAA0.1mg/L的培養基上不定芽增殖系數最高,為5.1;在1/2MS+NAA0.2mg/L的培養基上平均根數最多,為5.3,生根率達100%。

關鍵詞:百子蓮;子房;組織培養

中圖分類號 S629 文獻標識碼 A 文章編號 1007-7731(2018)21-0051-02

The Tissue Culture of Agapanthus praecox

Li Chenghui et al.

(Suzhou Polytechnic Institute of Agriculture,Suzhou 215008,China)

Abstract:In this experiment,the ovaries of Agapanthus were used as explants to study callus,axillary buds induction and rooting culture in different media,in order to establish tissue culture and rapid propagation system of Agapanthus.The results showed that the highest callus induction rate was 32.4% in MS+6-BA2mg/L+NAA0.1mg/L medium,the highest multiplication coefficient was 5.1 in MS+6-BA3mg/L+NAA0.1mg/L medium,and the maximum root number was 5.3 in MS+NAA0.2mg/L medium and the rooting rate was 100%.

Key words:Agapanthus praecox;Ovary;Tissue culture

百子蓮(Agapanthus praecox)又稱藍百合,為單子葉多年生草本花卉,具有地下肉質根狀塊莖,原產于非洲南部的熱帶與亞熱帶地區。百子蓮屬植物觀賞性很強,具有大的傘形花序,每個花序著生小花50~130朵,可開放30~40d。因其花色淡雅,花朵姿態優美,花期持續時間長,在歐美具有“愛情花”之稱,是除了玫瑰花以外最能表達愛意的愛情花,目前已被廣泛應用于切花生產、園林觀賞、干燥花的藝術創作以及藥用成分提取。我國引入百子蓮的時間較短,花卉市場的植物資源稀少,而且其生產中所采用的種苗完全依賴國外進口。百子蓮目前主要的繁殖手段是分株和播種,繁殖速度慢,時間長。筆者對百子蓮新子房組織培養技術進行研究,構建了繁育體系,從而滿足園林綠化的需要,推動該花卉在蘇南地區的廣泛應用。

1 材料與方法

1.1 供試材料 以蘇州農業職業技術學院相城科技園內4年生露地實生苗為試驗材料,2018年6月份從田間將還未開放的花蕾連同花梗取回作為外植體。

1.2 試驗方法 先用洗潔精進行表面清洗,并浸泡20min,用流水沖洗干凈。在超凈工作臺內用75%酒精浸泡30s后再用0.1%升汞處理7min,無菌水沖洗5~6遍,再用消毒濾紙吸干表面水分,用解剖刀和鑷子剝去苞片,將子房進行橫向剖切形成子房切片。

以MS為基本培養基,初代培養添加6-BA(1、1.5、2、2.5、3mg/L)、NAA0.1mg/L,繼代培養添加6-BA(2、2.5、3、3.5、4mg/L)、NAA(0.1、0.2mg/L);生根培養以MS、1/2MS為基本培養基,添加NAA(0.1、0.2、0.3mg/L)、AC0.1g/L、蔗糖3%、瓊脂0.7%,pH調至5.8,高溫高壓濕熱滅菌。初代培養每個培養瓶接種8個外植體,每個處理接種10瓶,重復3次。最初7d進行暗培養,30d后統計愈傷誘導率。繼代培養每個處理接種10個不定芽,重復3次。觀察并記錄不定芽增殖情況,30d后根據新芽個數和生長情況統計增殖率。生根培養每個處理接種20棵壯苗,重復3次,30d后根據根數和生長情況統計生根率。

2 結果與分析

2.1 不同6-BA濃度對百子蓮子房誘導分化的影響 百子蓮子房切片接種7d后基部開始膨大,形成嫩黃色愈傷組織,7d后移至光培養下,20d后逐漸轉綠并形成少量芽點。從表1可以看出,隨著6-BA濃度的增加,子房切片愈傷誘導率呈上升趨勢。在MS+6-BA2mg/L+NAA0.1mg/L培養基上愈傷生長情況最好,愈傷呈嫩黃色且芽點較多,愈傷誘導率也最高,達30.1%。6-BA3mg/L時,雖然愈傷誘導率較高,但是愈傷發白變硬,后期芽點也較少。

2.2 不同激素配比對百子蓮不定芽增殖率的影響 將百子蓮已分化的不定芽叢切取下來接種在不同激素水平的培養基上,觀察不定芽增殖情況。總體而言,百子蓮不定芽增殖比較困難,隨著6-BA濃度的增加,不定芽增殖系數呈上升趨勢,在6-BA3mg/L時,形成不定芽數最多,增殖系數達到最高5.1,隨后增殖系數隨著6-BA濃度的增加又呈下降趨勢,而NAA2個不同濃度水平差異不明顯(見表2)。因此,百子蓮不定芽增殖率主要受6-BA影響。較適宜激素配比為6-BA3mg/L+NAA0.1mg/L。

2.3 不同培養基對百子蓮生根培養的影響 當不定芽長至2~3cm時,將不定芽切至不同培養基上進行生根培養,從表3中可以看出百子蓮生根率總體較高,1/2MS基本培養基生根率要高于MS,隨著NAA濃度增加,生根率呈上升趨勢,達到了100%。但根據平均生根數來看,NAA0.2mg/L生根數最多,平均生根5.3條。1/2MS+NAA0.2mg/L+AC0.1g/L培養基最適宜百子蓮生根培養。

2.4 組培苗馴化移栽 百子蓮組培苗長至3~5cm,并具有2~3條根時,便可以出瓶移栽。移栽前先將瓶苗移至常溫條件下煉苗5~7d,然后用鑷子輕輕夾出植株,洗凈組培苗基部的培養基,在蛭石:珍珠巖:泥炭=3∶2∶1的基質上進行栽培,設施管理,注意遮光處理,然后逐漸增加光照,濕度保持在85%左右,1個月后成活率為92.3%。

3 小結

百子蓮種子發芽率較低,因此通過組織培養建立快繁體系可以實現百子蓮種苗快速高效的周年生產。試驗選用百子蓮子房為外植體,通過不同的激素配比誘導愈傷組織。激素是影響植物器官形成的主要因素,6-BA和NAA配合使用可以提高誘導率,高濃度的6-BA對不定芽的增殖具有顯著的促進作用,1/2MS更利于百子蓮生根培養。百子蓮生根培養較容易,生根率可達100%,馴化后的組培苗成活率可達92.3%。

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(責編:徐世紅)

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