食源性相關腹瀉病原菌感染監測分析

李宏杰 陳志杭 王海明 葉斌 葛榮躍

食源性疾?。‵oodborne Diseases）是指食品中致病因素進入人體引起的感染性、中毒性等疾病。龐璐等［1］分析2006-2010年我國食源性疾病暴發資料，共發生食源性疾病暴發事件2023起，微生物引起的事件數及患者數分別占40.09%和61.92%。食源性腹瀉的病原菌種類繁多，通過臨床癥狀難以區分病原菌種類，準確的細菌病原學診斷，是抗生素合理應用的基礎［2］，因此在食源性腹瀉診斷中，應明確大便培養及藥敏結果。食源性腹瀉是有不潔飲食史引起各種病原體腸道感染的腹瀉，是食源性疾病中最常見的一種癥狀類型，臨床常見的急性胃腸炎較多均是食源性腹瀉。因此，應對社區居民做好針對性的健康宣教［3］，預防病從口入。在“五水共治”背景下，本市水源性腹瀉暴發案例鮮有報道。

1 材料與方法

1.1 菌株來源 對2015年至2017年2家社區衛生服務中心就診的食源性相關腹瀉患者糞便（或肛拭子）標本經細菌培養、分離與鑒定100株致瀉菌。

1.2 主要儀器 VITEK濁度儀及VITEK-2 compact全自動微生物分析系統（法國bioMérieux公司）。

1.3 主要培養基和試劑［4］Carry-Blair運送培養基、Macc平板、SS平板、克氏雙糖鐵培養管、血平板、TCBS瓊脂、四硫磺酸鈉煌綠增菌液、亞硒酸鹽增菌液（S.F增菌液）、堿性蛋白胨水、mEC肉湯、PBS增菌液、O157平板、VITEK GNI鑒定卡/藥敏卡（法國bioMérieux公司）、志賀菌診斷血清（寧波天潤生物藥業有限公司）、沙門菌診斷血清（寧波天潤生物藥業有限公司）、致瀉性大腸埃希菌（DEC）診斷血清（蘭州生物制品檢定所）、O1群及O139群霍亂弧菌診斷血清（寧波天潤生物藥業有限公司）。

1.4 儀器校準及室內質控 儀器按廠家要求進行校準并按室內質控的要求完成室內質控。室內質控菌株在直接分離、增菌分離、血清學凝集試驗和細菌鑒定上與待檢標本同步，使用沙門菌標準菌株為腸炎沙門菌CMCC50041、大腸埃希菌標準菌株為大腸埃希菌ATCC25922等。

1.5 檢測方法 （1）菌株分離鑒定：依據國家規定的相關檢測程序進行細菌培養、分離與鑒定。（2）自動化細菌鑒定及抗菌藥物敏感性試驗：菌種鑒定可以常規快速血清學凝集試驗與自動化細菌鑒定，并將鑒定菌種與藥敏報告相關聯。

1.6 流行病學現況調查 通過現況調查進行流行病學危險因素分析，考慮為食物中毒事件應綜合患者臨床表現、流行病學調查結果和實驗室檢測結果［5-6］。

2 結果

2.1 室內質控菌株質控結果 室內質控菌株在直接分離、增菌分離、血清學凝集試驗和細菌鑒定上與待檢標本同步在控。

2.2 分離菌株菌種分布及構成比 見表1。

表1 分離菌株菌種分布及其構成比［n（%）］

2.3 分離的沙門菌株菌種分布及構成比 見表2。

表2 分離菌株菌種分布及其所占百分比［n（%）］

2.4 部分菌種的藥敏結果 以鼠傷寒沙門菌為例，可對氟喹諾酮類、三/四代頭孢類與碳青霉烯類等敏感（敏感率＞98.00%），而對氨基糖苷類可雙向耐藥。

2.5 流行病學危險因素分析結果 通過現況調查，發現患者有腹痛、腹瀉等胃腸道癥狀，可伴有發熱，所有患者48h內有可疑食物暴露史，無水源性案例，均為散發。

3 討論

通過監測可將沙門菌屬、副溶血弧菌、志賀菌屬、致病性大腸埃希菌、空腸彎曲菌、金黃色葡萄球菌和非O1群霍亂弧菌等致病菌列為10種常見食源性腹瀉病原菌。食源性相關腹瀉病原菌除傳統致病菌以外，條件致病菌導致的細菌性感染也占一定的比例［7］。因此實驗室做好病原菌的檢測工作，掌握病原譜的構成分布對食源相關性腹瀉病的診療具有重要指導意義［8］。臨床微生物實驗室應在開展沙門菌、志賀菌和O1、O139群霍亂弧菌篩選的基礎上擴大病原菌種類的檢測，以滿足臨床需求。致瀉性大腸埃希菌初步鑒定的血清凝集率及血清學鑒定效率的判定存在一定的局限［9］。一些條件致病菌在腹瀉中的作用也有待進一步研究。而一些病原菌（如空腸彎曲菌等）由于培養條件要求苛刻可能導致檢測失真，則需要分子生物學鑒定發揮重要作用。分子生物學方法也可實現對以上菌屬菌株不同組合的多重檢測，具有快速、多重、高靈敏度及高通量等優勢。盡管如此，基層單位已有能力將細菌形態學標記方法、生理生化標記方法與免疫學標記方法納入系統性微生物學鑒定工作中，且鑒定與藥敏可實現自動化，并有手工鑒定與藥敏試驗作為基礎與補充。

沙門菌是威脅人類生命健康的重要病原菌，廣泛存在于自然界［10］，可通過食物、水源污染傳播，可涉及到各個菌種與型別。42株非傷寒沙門菌以腸炎沙門菌、鼠傷寒沙門菌和斯坦利沙門菌為主，其中腸炎沙門菌占全部菌株的23.81%，鼠傷寒沙門菌占19.06%，斯坦利沙門菌占14.29%。據相關資料統計［11-14］，我國細菌性食物中毒例次中，將近78.9%為沙門菌所致，人們一旦攝入含有沙門菌的食物就會導致細菌性感染，在細菌毒素作用下導致食用中毒。提示仍需高度重視沙門菌流行現狀［10］，與本資料相符。

近年來隨著廣譜抗菌藥在臨床、社區和家養動物中的廣泛應用及濫用，沙門菌出現大量的新型耐藥菌株，沙門菌的耐藥給臨床治療帶來較大困難［11］。菌種鑒定應以常規血清學快速鑒定結果為準，自動化細菌鑒定僅供參考，并將鑒定菌種與藥敏報告相關聯，依據藥敏試驗結果指導用藥［15］。早期診斷和合理選用敏感抗菌藥物是控制兒童沙門菌感染的關鍵［15-16］。對于腹瀉患兒要做到逢瀉必檢，且應多次送檢［15］。以鼠傷寒沙門菌為例，可對氟喹諾酮類、三/四代頭孢菌素類與碳青霉烯類等敏感，而對氨基糖苷類可產生雙向耐藥，提示臨床在進行經驗治療的同時也要盡快獲悉抗菌藥物藥敏試驗結果，目前臨床治療仍以二代喹諾酮類與三代頭孢菌素類為主。沙門菌（包括腸炎沙門菌）多重耐藥菌株不斷出現，耐藥模式呈現多樣化，耐藥人群可分布于各年齡組且有年輕化趨勢，實驗室應加強抗菌藥物耐藥性檢測，及時指導臨床合理用藥與針對性用藥；相關部門應加強對畜禽養殖與漁牧業中濫用抗生素的監管，減少耐藥菌株的產生。

近年來，食物來源海產品中副溶血弧菌的食源性感染監測引起臨床越來越多的重視。腹瀉患者副溶血弧菌致病性菌株與大流行菌株的檢出，表明該地區具有潛在的食源性疾病暴發的風險。雖然本菌對常見抗菌藥物敏感性高，但耐藥率有所上升。基層單位已有能力做好副溶血弧菌系統性微生物學檢測工作，可以更好地服務于臨床。

相關部門要加強飲食衛生管理，防止病從口入，并對各人群做好健康宣教，普及腸道病預防知識十分必要［17］。應根據患者和社區居民的年齡、文化程度及實際需求等給予針對性的健康教育，預防食源性腹瀉的發生［18］。市售食品存在不同程度的食源性致病菌污染，衛生指示菌不符合情況嚴重，存在一定安全風險和隱患，應加強食品安全管理，減少食源性疾病的發生［19］。相關食品安全監管部門應加強對畜和禽類制品行業監管工作，從控制傳染源的角度可以降低沙門菌感染及食物中毒事件的發生［20-21］。在世界范圍內，沙門菌感染是導致食源性腹瀉的常見病原菌，臨床應注重對沙門菌感染的耐藥性檢測和血清分型，從而減少疾病區域性爆發的可能性［22］。