30年冷凍湖羊“復蘇”記—“湖羊冷凍精液和冷凍胚胎保存效果驗證試驗”項目通過驗收

文│本刊記者 劉源

2018年，全國畜牧總站在浙江省湖州市、杭州市等地組織實施了“國家家畜基因庫湖羊冷凍精液和冷凍胚胎保存效果驗證試驗”項目，本項目由國家家畜基因庫和浙江省畜牧技術推廣總站共同承擔，杭州華麗牧業有限公司和長興永盛牧業有限公司兩個湖羊種羊場參與實施。為科學客觀評估試驗效果，進一步做好家畜地方品種保種工作，10月22～24日，全國畜牧總站組織由浙江省農業科學院、揚州大學、內蒙古自治區農牧業科學院、內蒙古自治區農牧場科學技術推廣站、浙江省湖州市畜牧獸醫局組成的專家組一行五人，前往湖州、杭州兩地，對項目進行驗收。農業農村部種業管理司畜禽種業處周曉鵬、全國畜牧總站畜禽資源處處長劉長春、全國畜牧總站畜禽遺傳資源保存利用中心（國家家畜基因庫）常務副主任孫飛舟、浙江省畜牧技術推廣總站副站長任麗等參加了項目驗收鑒定。

認真謀劃，推動首例活體驗證試驗順利實施

孫飛舟向專家組介紹，2017年年底，全國畜牧總站就開始謀劃在2018年對國家家畜基因庫長期保存的湖羊冷凍胚胎、冷凍精液開展復蘇試驗，檢查保存效果。湖羊是我國特有的羔皮和多胎綿羊品種，也是首批列入《國家畜禽遺傳資源保護目錄》的珍貴地方畜禽品種之一。為加強湖羊品種資源保護工作，針對浙江省湖羊部分個體純度不夠等問題，在2018年年初，浙江省畜牧獸醫局向農業農村部畜牧業司申請使用湖羊冷凍精液和冷凍胚胎。之后，全國畜牧總站兩次派專家考察試驗點條件，2月初，經農業農村部批準，國家家畜基因庫與浙江省畜牧技術推廣站合作，開展湖羊冷凍胚胎保存效果驗證試驗。

試驗使用了制作于1988年5只公羊的27劑顆粒凍精、1998年3只公羊的75劑細管凍精以及1998年4對公母羊組合的22枚胚胎。到2018年，這些冷凍精液和冷凍胚胎已經保存長達30年、20年，是我國最早一批保存在國家家畜基因庫的冷凍精液和冷凍胚胎之一。同時，這也是首次用國家家畜基因庫保存的冷凍精液和冷凍胚胎進行活體驗證試驗，首次驗證了1988年、1998年制作的冷凍精液和1998年制作的冷凍胚胎保存質量。

為確保試驗效果，國家家畜基因庫和浙江省畜牧技術推廣總站前期進行了充分溝通，做了大量細致的準備工作，精心設計試驗方案，明確項目進度和各單位職責分工。項目啟動后，國家家畜基因庫立即對試驗用冷凍精液按照不同個體、不同批次進行活力、劑量、前進運動精子數和畸形率4項指標進行了質量檢測；3月15日，冷凍精液和冷凍胚胎一同運抵杭州，浙江省畜牧技術推廣總站保存；4月11日開始，國家家畜基因庫邀請國內頂尖專家，采用內窺鏡子宮角輸精手術操作方式，在兩個試驗種羊場進行了胚胎移植和凍精配種；8月29日至9月14日，凍精配種和胚胎移植羔羊陸續出生。

浙江省畜牧技術推廣總站副站長任麗介紹，試驗人工授精母羊共79只，其中麗華牧業配種46只，永盛牧業配種33只，配種成功48只母羊，共產羔羊94只，凍精配種受胎率達到61%；胚胎移植母羊共9只，移植胚胎22枚，懷孕6只，分娩9只，胚胎復蘇率41%。下一步，項目組還將制作凍精3000份、冷凍胚胎200枚，返還國家家畜基因庫；同時對試驗羔羊生長發育、繁殖性能、生產性能、市場需求等做好綜合評估。

利用現代保種技術，讓基因活起來

目前為止，國內外還沒有對保存時間長達20年的羊冷凍胚胎和30年的冷凍精液進行復蘇效果驗證的相關文獻報道，試驗也沒有現成的經驗模式可以參考。因此，有必要對試驗結果進行認真評估，指出成績，尋找不足，提出有針對性的改進措施，為下一步保種工作提供指導和遵循。在聽取了項目組匯報后，專家組認真審閱了試驗相關檔案資料和保存的試驗材料，實地察看了胚胎移植和冷凍精液人工授精生產的湖羊羔羊。

經過一整天緊張的評估與討論，專家組對試驗成果給予了充分肯定。經過超低溫長期冷凍的精液和胚胎，受胎率和產羔率都高于預期，甲級羔皮羊比例達到34%。與對照組相比，冷凍精液和冷凍胚胎活羔的毛色更加潔白、波浪形花紋更加突出，再現了20、30年前湖羊的典型特征，就像20、30年前的湖羊“復蘇”在眼前，這也表明冷凍精液和冷凍胚胎保存對種群恢復保留原有遺傳資源特征，豐富原產地群體的血統，開展異地保種具有十分重要的作用。專家們一致同意項目通過驗收。對下一步工作，專家們建議，要加強對試驗羊的飼養管理和跟蹤觀察，采用分子生物學手段研究評估湖羊保種效果，設立家畜冷凍精液和冷凍胚胎保種效果評價專項，讓基因活起來，進一步做好遺傳資源保護利用工作。

專家們表示，此次試驗成功代表著我國畜禽保種技術的重大突破。采用冷凍精液和冷凍胚胎技術保存相關家畜遺傳資源，對進一步探索我國特有畜禽品種，特別是珍貴、稀有、瀕危畜禽品種的保種具有深遠意義。

農業農村部種業管理司畜禽種業處周曉鵬指出，此次評估只是對試驗的階段性評價，今后還有很多工作需要持續開展下去。畜禽遺傳資源保護是一項投入大、持續時間長的基礎性工作，需要長期堅持，不間斷地進行檢測評估，怎樣保護好、用好這些遺傳物質是一大關鍵。

隨著現代畜牧業發展，散戶逐漸退出，生產效率不能滿足現在市場需要的品種逐漸被大量選育淘汰，畜禽遺傳資源保護利用的壓力也越來越大。全國畜牧總站畜禽資源處處長劉長春表示，這次試驗另辟蹊徑，一方面驗證了利用超低溫冷凍技術可以長期保存種質資源；另一方面也驗證了國家家畜基因庫連續30年的保種工作沒有出現紕漏。同時，證明了當初設立國家家畜基因庫的設想是正確的，超低溫冷凍技術在保種工作中可以發揮獨特的重要作用。

據了解，全國畜牧總站畜禽遺傳資源保存利用中心在2008年被農業農村部授予首批國家級家畜基因庫。主要從事全國畜禽遺傳資源冷凍精液、冷凍胚胎和體細胞等遺傳物質的制作、收集和保存工作。國家家畜基因庫是目前亞洲最大的以現代生物技術為主要手段，進行異地基因保種的基因庫，也是我國保存畜禽品種遺傳物質數量最多、范圍最廣的基因庫。截至2018年6月，已保存牛、羊、豬、馬（驢）、犬等遺傳物質，涉及品種共計104個。其中牛、羊、豬、驢的冷凍精液55萬余劑；冷凍胚胎1.5萬余枚；牦牛、綿山羊品種的成纖維細胞系5000余頭份；收集了60個豬品種、88個牛品種、74個綿羊、山羊品種和55個馬（驢）品種、共計2萬余份DNA和血樣等。（更多資訊，請關注微信公眾號：中國畜牧業）