龍血竭噴霧膜劑制備工藝的研究

徐小彬 胡華 黃慧學 李泓霏 陸鴻莊

[摘要]目的 以龍血竭為主藥，制備一種具有活血化瘀、消腫止痛等功效的新型劑型，為臨床用藥提供新的用藥選擇。方法 以成膜性、均勻性、成膜時間為考察指標，采用單因素實驗和正交實驗方法篩選龍血竭噴霧膜劑的輔料及組成。結果 龍血竭噴霧膜劑最優的處方為：4.0%龍血竭藥粉用量，4.0%聚維酮K30、0.1%羥丙甲纖維素為成膜材料，75%乙醇適量。結論 龍血竭噴霧膜劑的制備工藝穩定，方法簡單，制備的產品符合規定。

[關鍵詞]龍血竭；噴霧膜劑；處方組成

[中圖分類號] R283.6 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-4721（2018）8（c）-0008-05

[Abstract] Objective To prepare a new formulation which can promote blood circulation to remove blood stasis and relieve swelling and pain using Resina Draconis as the main ingredient. Methods The single factor experiment and the orthogonal experiment were carried out to screen the ingredient and composition of a new Resina Draconis Film-forming Spray， taking the film-forming ability， homogeneity and time into account. Results The optimal formula for Resina Draconis Film-forming Spray was as follows： 4.0% Resina Draconis powder， 4.0% povidone K30 and 0.1% hydroxypropyl methyl cellulose （HPMC） for film-forming material， and 75% ethanol， appropriate amount. Conclusion The technique for preparing Resina Draconis Film-forming Spray is simple and stable， and the prepared products meet relevant standards.

[Key words] Resina Draconis； Film-forming Spray； Prescription composition

龍血竭為百合科龍血樹屬物劍葉龍血樹Dranaenacochinchinensis （Lour.） S. C. Chen的含脂木材中經提取得到的樹脂，主產于廣西和云南南部[1]，其呈不規則塊片，紅棕色至黑棕色，有光澤，質脆，氣特異，微有清香，味淡、微澀。嚼之有碳粒感并微粘齒。本品具有活血散瘀、定痛止血、斂瘡生肌等功效，主要用于跌打損傷、外傷出血等[2]，其外用可以治療急性軟組織損傷、糖尿病足潰瘍及壓瘡等[3-6]。目前市售龍血竭制劑，有龍血竭膠囊劑、散劑、片劑等，大多用于口服，但也有人采用將膠囊殼打開，把內容物直接灑在傷口上外用或與75%乙醇混合使用的方式[7-9]，還有人把片劑粉碎用生理鹽水調成糊狀使用[10]，但上述用藥方式既不方便也不規范。目前市售含有龍血竭原料藥的外用制劑，例如復方金鳳搽劑[11]，使用時直接涂抹，存在涂抹時有效成分流失性大且易污染衣物等缺點。藥品研究機構和醫院也對龍血竭的外用劑型進行了研究，例如復方龍血竭凝膠劑和復方龍血竭巴布劑等[12-13]，但上述劑型往往還添加有其他藥材，同時存在著不易涂抹均勻的問題。為了提高藥效，方便使用，制備出一種噴霧膜劑可以較好解決上述存在的問題。噴霧膜劑是一種外用長效制劑，其同時結合了噴霧劑、涂劑、膜劑、貼劑的優點，使用時不僅能呈霧狀噴出，而且能快速成膜，既延長了藥物在病灶部位的滯留時間，提高療效，也因其成膜狀覆蓋病灶部位，減少了二次感染[14-15]。本實驗對一種新型的龍血竭噴霧膜劑的制備進行了研究，現報道如下。

1實驗材料

1.1儀器

DMHL生物顯微鏡[徠卡顯微系統（上海）貿易有限公司]；SZX7體視顯微鏡（廣州明美電子有限公司）；ME204E/02電子天平[梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司]；HH-S4型電熱恒溫水浴鍋（北京科偉永興儀器有限公司）；DF-101Z集熱式恒溫加熱磁力攪拌器（河南省予華儀器有限公司）；EYEL4油浴鍋（上海愛朗儀器有限公司）；KQ5200B型超聲波清洗儀（昆山市超聲儀器有限公司）；150 mm數顯游標卡尺（上海九量五金工具有限公司）；乳缽。

1.2藥材與試劑

龍血竭（廣西中醫藥大學制藥廠，批號：20151001）；聚維酮K30（PVP-K30）（博愛新開源制藥股份有限公司，批號：P160122013-1）；羥丙甲纖維素（HPMC）（山東光大科技發展有限公司，批號：20140602）。

2實驗方法

2.1單因素實驗

2.1.1溶解性考察 分別稱取龍血竭藥物8份，每份4.0 g，依次加入100 ml乙醇，濃度100%（無水乙醇）、95%、90%、85%、80%、75%、70%、65%進行溶解性考察。

2.1.2成膜材料的初步篩選 本實驗主要選取A：PVP-K30成膜材料，以成膜性和顯微形態為評價指標；B：HPMC輔助成膜材料，以成膜性和顯微形態評價指標；A+B：PVP-K30+HPMC兩種成膜材料，以成膜性、顯微形態、膜感官柔軟性為評價指標。

①成膜性：取配制好的各成膜材料濃度適量，噴在去毛大鼠皮膚表面，自然揮干成膜后[16]，分別用不成膜、稍微成膜、成膜和膜厚薄進行描述成膜情況。②成膜性能的顯微形態[15，17]：將配制好藥液與輔料不同濃度制成的龍血竭噴霧膜劑，噴涂在25.0 mm×76.2 mm載玻片上，置常溫下揮干，在生物顯微鏡40倍鏡下觀察，調整顯微鏡的光圈和焦距，采用拍照軟件Leica ec3 Camera對表面形態結果進行拍攝，以膜的均勻性、膜的邊緣平整度、輔料與藥物的融合程度來評價膜的性能。③膜感官柔軟性[18]：取配制好的各成膜材料適量，涂抹于手背部、腕部皮膚，成膜后，以柔軟、較柔軟、硬來標明膜的柔軟程度。柔軟是指成膜后皮膚幾乎無緊繃感、手觸膜感軟；較軟柔是指成膜后皮膚有稍微緊繃感、手觸膜感柔軟；硬是指成膜后皮膚有緊繃感、手觸膜感硬。

2.1.3成膜材料溶液的配制 A：4.0%龍血竭+PVP-K30溶液，取PVP-K30適量，分別配制100 ml質量濃度為3.0%、4.0%、5.0%、6.0%、7.0%、8.0%的溶液，備用。B：4.0%龍血竭+HPMC溶液，取HPMC適量，先溶脹，溶解分別配制質量濃度為0.1%、0.2%、0.3%、0.4%、0.5%、0.6%溶液，備用（100 ml）。A+B：4.0%龍血竭+PVP-K30溶液+HPMC溶液，先取PVP-K30適量配制6份6.0%的溶液，再取HPMC適量，溶解分別配制100 ml質量濃度為0.1%、0.2%、0.3%、0.4%、0.5%、0.6%的HPMC溶液和6.0%PVP-K30溶液混合均勻。

2.2正交設計實驗

2.2.1評價指標 ①成膜性：取上述配制好的各成膜材料溶液，噴在去毛大鼠皮膚表面，待成膜后，分別用極薄、薄、適中、厚、極厚來評價成膜情況[16]。以測得的能成膜且成膜適中為最大值100分，若未成膜計0分。成膜情況以極薄、薄、厚、極厚來劃分，每增加一個等級遞減20分。②均勻性：取供試品，置載玻片上，在50倍顯微鏡下觀察，用明美成像拍照軟件Mshot MD50拍出五個視野內平均垂直的粒徑計算平均值，其平均值最小者為100分，最大者為0分，每增加5 μm扣減10分[17]。③成膜時間：取配制好的成膜材料濃度適量，噴適量在去毛大鼠皮膚表面，開始計時，觀察藥液流動性，藥液不再流動即視為成膜[18-19]，以測得的最短成膜時間評價為100分，其余的每增加1 min就扣減10分。

上述3個評價指標按總體進行評分后，根據總體歸一化法進行處理，計算綜合得分。總分=（成膜性歸一值+均勻性歸一值+成膜時間歸一值）。歸一值（OD值）=（ymax-yi）/（ymax-ymin），ymax指樣本最大值，ymin指樣本最小值，yi指每一次的測量值。

2.3驗證實驗

按正交實驗的優選工藝制備3批龍血竭噴膜劑樣品進行驗證實驗，增加外觀性狀、噴霧效果、噴射實驗3項進行考察。①外觀性狀[20]：將噴膜劑噴于正常健康人的皮膚上，觀察其外觀。②噴霧效果[16，21]：掀壓制備好的噴膜劑，以噴出細霧、霧狀、線霧、線狀分級評價，以細霧效果最優。③噴射實驗[22-23]：取3批次供試品，每批次4瓶，除去瓶蓋，分別按壓試噴3次后，擦凈，精密稱定，記錄數據。再噴射5次后，擦凈，精密稱定并記錄數據。每批次供試品按上述方法重復操作3次，計算每瓶按壓1次平均噴射重量（50 ml/瓶）。

3實驗結果

3.1單因素實驗結果

3.1.1溶解度單因素考察結果

顯微鏡下觀察結果提示，4.0%的龍血竭藥量，在100%、95%、90%、85%、80%、75%乙醇濃度的情況下能完全溶解，無不溶解顆粒狀，有弧形紋理分布，能較好融合。在70%、65%濃度的乙醇下不能完全溶解，有不溶顆粒狀物質聚合，較粗糙。綜合考慮，雖然80%以上乙醇溶解度好，但其刺激性強。75%乙醇溶解度較好，且制備成成品后具備一定消毒功能，所以選擇75%濃度乙醇進行成膜性考察，于40倍顯微鏡下觀察的藥液顯微結構結果見圖1～8。

3.1.2成膜材料單因素實驗結果

PVP-K30和HPMC不同濃度制成的成膜材料，其成膜性、顯微形態考察結果見表1。

3.2正交實驗結果

根據溶解度及單因素考察結果，進行正交實驗，實驗因素及水平見表2，實驗結果及方差分析分別見表3、表4。

表3極差值表明，因素C（0.7540）>D（0.6920）>A（0.4290）>B（0.1470）。該結果提示，四個因素中，PVP-K30的用量對成膜性、均勻性、成膜時間的影響最大，為決定性因素。其次，HPMC的用量對其影響也較大，而藥物濃度、乙醇濃度的用量相對于PVP-K30和HPMC而言，其影響較為微弱。因此，在龍血竭噴霧膜劑的制備過程中，影響噴霧膜劑綜合質量的因素大小次序為C→D→A→B。

研究結果提示，PVP-K30對實驗結果具有顯著性影響，而HPMC濃度、藥物濃度和乙醇濃度對實驗結果均無顯著性影響，結合表3中的K值可以判斷出，本研究中龍血竭噴霧膜劑的最優處方為A3B2C1D1，即成膜材料PVP-K30為4.0%，HPMC為0.1%，藥物濃度為4.0%，乙醇濃度為75%，以此配方所制成得噴霧膜劑成膜性、均勻性好，有較好的成膜時間。

3.3驗證實驗結果

3.3.1驗證實驗結果

經過3批次的驗證，提示龍血竭噴霧膜劑具成膜性好、成膜均勻且成膜時間合適、噴霧效果良好等特點。

均勻性測量結果，以顯微觀察到粒徑計算平均值，均勻性、成膜時間用均數±標準差（x±s）表示（n=3）

3.3.2驗證實驗噴射檢查結果

經過3批次噴射實驗的驗證，提示龍血竭噴霧劑的每次噴射量穩定。

4討論

本研究結果提示，當原料藥4.0%龍血竭含量時，以75%乙醇溶劑、4%PVP-K30為主要成膜材料，以0.1%HPMC為輔助成膜材料，成膜快速，遇水易脫落，所制得噴霧膜劑的成膜時間、成膜性能、膜感官柔軟性各項指標均較好。

龍血竭在甲醇、乙醇中溶解性好，不溶于水[2]，故采用乙醇為溶劑。本研究通過了解4.0%龍血竭在不同濃度乙醇下的溶解情況，提示，75%乙醇溶液下龍血竭有較好的溶解性，對皮膚刺激較小，有一定的消毒功能，從而選用75%濃度的乙醇。

本實驗噴霧膜劑制備工藝研究中，重點在篩選成膜材料，噴霧膜劑通常以溶液的形式保存，噴出接觸空氣后能較短時間內成膜，單種材料往往使用量較大，也較難成膜，結合各種藥用輔料的優缺點[24]，經過篩選，確定PVP-K30作為主要成膜材料，HPMC作為輔助成膜材料，混合使用，成膜效果好，膜感官柔軟性好，噴射效果穩定。

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