川中南地區兒童下呼吸道感染病原菌分布及藥物敏感性特征

胡 容，聶 濱，向小節，丁貴梅，劉能英，楊學強

（宜賓市第二人民醫院檢驗科，四川 宜賓 644000）

下呼吸道感染（lower respiratory tract infection，LRI）是兒童最常見的感染性疾病，是＜5歲兒童死亡的首要原因[1]。及時、準確地進行病原菌檢測和合理的抗菌藥物治療對減少死亡起至關重要的作用。由于病原菌的培養與鑒定及藥物敏感性試驗需要幾小時甚至幾天的時間，對于兒童病情發展迅速的實際情況，經驗用藥就顯得尤為重要。本研究對宜賓市第二人民醫院2014—2016年收治的6 205例LRI患兒的病原菌分布及耐藥性進行分析，以期為川中南地區兒童LRI預防方案的制定和臨床醫師的經驗治療提供科學依據。

1 材料和方法

1.1 一般資料

選取2014—2016年宜賓市第二人民醫院LRI住院患兒6 205例，其中男3 282例、女2 923例，年齡（5.3±3.6）歲。

1.2 樣本采集

采集所有患兒入院當天、用藥前用一次性吸痰器從鼻孔進入抽取的下呼吸道痰液。連續2 d采集痰樣本送檢，送檢樣本按《全國臨床檢驗操作規程》（第4版）[2]的要求進行檢驗，不合格的樣本重新采集送檢。

1.3 方法

1.3.1 細菌培養 將痰樣本分別接種于血瓊脂平板、麥康凱瓊脂平板和嗜血桿菌巧克力瓊脂平板（鄭州安圖公司），于5% CO2孵育箱培養24 h。

1.3.2 細菌鑒定及藥物敏感性試驗 分離出的病原菌采用法國生物梅里埃公司VITEK 2 Compact全自動微生物分析系統及配套的鑒定卡和藥物敏感性試驗卡進行細菌鑒定和藥物敏感性試驗。肺炎鏈球菌分別采用GP和GP68卡進行細菌鑒定和藥物敏感性試驗，未被覆蓋的青霉素用E-test條復核；流感嗜血桿菌采用NH卡進行細菌鑒定；流感嗜血桿菌和卡他莫拉漢菌的藥物敏感性試驗采用紙片擴散法補充完成，HTM平板為溫州康泰公司產品，藥物敏感性試驗紙片為英國Oxoid公司產品。

1.3.3 結果判定 根據美國臨床實驗室標準化協會（the Clinical and Laboratory Standards Institute，CLSI）M100-S25（2014）文件[3]和M45-A2（2010）文件[4]判定藥物敏感性試驗結果。用頭孢硝噻吩試驗定性檢測流感嗜血桿菌和卡他莫拉漢菌的β-內酰胺酶。

1.4 質量控制

質控菌株為大腸埃希菌（ATCC 25922）、金黃色葡萄球菌（ATCC 29213）、銅綠假單胞菌（ATCC 27853）、流感嗜血桿菌（ATCC 49247）、肺炎鏈球菌（ATCC 49619），由四川省臨床檢驗中心提供。

1.5 統計學方法

采用Whonet 5.6和SPSS 10.0軟件進行統計分析。組間比較采用χ2檢驗。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 病原菌的分布

6 205份痰樣本中共分離出病原菌14種（2 147株），陽性檢出率為34.6%，主要的菌種為肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌、卡他莫拉漢菌。其中肺炎鏈球菌檢出率呈逐年減少趨勢，而卡他莫拉漢菌檢出率呈逐年上升趨勢。見表1。

2.2 病原菌對常見抗菌藥物的耐藥率

2014—2016年肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌、卡他莫拉漢菌對常用抗菌藥物的耐藥率見表2～表4。

表1 2014—2016年分離自LRI住院患兒痰樣本的病原菌

表2 2014—2016年肺炎鏈球菌對13種常用抗菌藥物的耐藥率

表3 2014—2016年流感嗜血桿菌對13種常用抗菌藥物的耐藥率

表4 2014—2016年卡他莫拉漢菌對10種常用抗菌藥物的耐藥率

3 討論

由于兒童免疫系統及呼吸系統的發育未完善，LRI發病率高。抗菌藥物的廣泛使用，造成病原菌的耐藥性不斷增強，且不同地區由于使用抗菌藥物的習慣不同，造成致病菌的不同，致病菌對抗菌藥物產生耐藥的程度也不同[5]。

本研究對宜賓市第二人民醫院2014—2016年6 205例LRI住院患兒痰樣本進行培養，共分離病原菌14種（2 147株），陽性率為34.6%，與國內報道相近[6]，但較國外報道的50%～70%偏低[7]。原因可能為：（1）住院前使用了抗菌藥物；（2）患兒依從性差，痰樣本合格率低。本研究對患兒入院當天用藥前用一次性吸痰器從鼻孔進入抽取下呼吸道的痰樣本進行培養，大大提高了培養的陽性率和準確率。本研究結果顯示，宜賓市第二人民醫院兒童LRI常見的致病菌主要為肺炎鏈球菌（39.17%）、流感嗜血桿菌（23.43%）、卡他莫拉漢菌（20.63%）、金黃色葡萄球菌（7.59%），其中肺炎鏈球菌檢出率逐年降低，卡他莫拉漢菌檢出率逐年上升，與羅宇鵬[8]的研究結果相近，與袁萍等[6]和周衛萍等[9]的研究結果存在較大差異。可能由氣候以及居民生活環境等多種因素而造成流行病原菌不同所致，也可能由采樣的方法不同所致。

肺炎鏈球菌是川中南地區兒童社區獲得性肺炎的主要病原菌。近年來，肺炎鏈球菌對青霉素不敏感和對大環內酯類抗菌藥物耐藥率的日趨上升已受到廣泛關注[10]。本研究結果顯示，宜賓市第二人民醫院的肺炎鏈球菌對青霉素的耐藥率有上升趨勢（P＜0.05），其原因可能與患兒入院前濫用抗菌藥物有關。對大環內脂類的阿奇霉素的耐藥率達78.5%，說明大環內酯類抗菌藥物已不能作為LRI抗感染治療的首選藥物。肺炎鏈球菌對四環素、復方磺胺甲噁唑和頭孢呋辛等抗菌藥物的耐藥率均有上升趨勢（P＜0.05），說明需根據藥物敏感性試驗結果選擇用藥。

本研究結果顯示，流感嗜血桿菌對復方磺胺甲噁唑、氯霉素的耐藥率有明顯上升趨勢（P＜0.05），對氨芐西林、復方磺胺甲噁唑耐藥率較高。作為條件致病菌的卡他莫拉漢菌可定植于呼吸道，當呼吸道局部免疫功能低下或黏膜屏障受損時，該菌可自呼吸道定植的部位向鄰近區域擴散，導致出現感染的臨床癥狀[11]。本研究結果顯示，卡他莫拉漢菌對10種常用抗菌藥物中的2種耐藥。卡他莫拉漢菌主要通過產生β-內酰胺酶而耐藥，其高產酶率導致其對青霉素類抗菌藥物普遍耐藥，但對頭孢菌素類、β-內酰胺酶 ／抑制劑類、四環素及喹諾酮類藥物仍保持很高的敏感性。但是喹諾酮類藥物會影響軟骨發育，兒童慎用。所以流感嗜血桿菌和卡他莫拉漢菌感染首選的抗菌藥物應是β-內酰胺酶／抑制劑類和頭孢二、三代抗菌藥物。

綜上所述，川中南地區引起兒童LRI的病原菌主要有肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌、卡他莫拉漢菌及金黃色葡萄球菌，這些病原菌對青霉素、復方磺胺甲噁唑等抗菌藥物的耐藥率有上升趨勢。臨床醫師經驗用藥應避免抗菌藥物的濫用，降低抗菌藥物使用不當而產生多重耐藥菌株的風險。