腦外傷合并不同程度獲得性肺炎患者外周血T細胞亞群表達水平觀察

楊華林,楊月麗

醫院內獲得性肺炎(hospital acquired pneumonia，HAP)，是指患者在住院48～72 h發生的肺部感染，在神經外科臨床中，HAP具有較高的患病率及病死率，并已成為顱腦外傷(traumatic brain injury, TBI)患者住院期間主要并發癥之一。新近國外文獻[1-3]顯示，這些HAP發生、進展顯然與患者體內相關細胞免疫失衡關系密切，但迄今為止，國內專門涉及到TBI患者類似內容報告還不算多。為此，我們觀察了一組近期在我院住院的TBI合并HAP患者外周血T細胞亞群(CD3+、CD4+、CD8+及CD4+/CD8+)指標表達變化，并與同期住院確診TBI但無HAP患者(TBI組)及同期參加我院體檢結論健康者(對照組)的相同檢測結果進行比較。

1 對象與方法

1.1 對象 連續選擇2013-01至2015-06在我院神經外科住院的TBI合并HAP患者，入選標準：(1)有近期TBI史；(2)臨床表現、頭顱影像學檢查符合TBI診斷；(3)年齡≥18歲；(4)符合1.2.1HAP確診條件。排除條件：(1)肺結核、肺部腫瘤、非感染性肺間質性疾病、肺水腫、肺不張、肺栓塞、肺嗜酸性粒細胞浸潤癥及肺血管炎患者；(2)接受腫瘤放、化療及免疫抑制藥治療患者；(3)人類免疫缺陷病毒感染(艾滋病)患者；(4)粒細胞缺乏者。符合入選標準并除外排除條件后，實際入選TBI合并HAP患者31例。另選擇同期住院診斷TBI但無HAP患者24例(TBI組)，該組納入標準符合TBI合并HAP組入選條件的(1)、(2)、(3)和(5)及全部排除條件。另有同期參加我院體檢結論健康者為對照組(27例)。表1為3組對象基線參數資料比較，結果表明，3組患者的平均年齡、性別分布接近(P均>0.05)。

項目TBI合并HAP組(n=31)TBI組(n=24)對照組(n=27)年齡范圍(歲)27～7624～7312～40平均年齡(歲)54.80±9.1552.69±8.2431.62±3.97男性21(67.74)13(54.17)19(70.37)女性10(32.26)11(45.83)8(29.63)

1.2 方法

1.2.1 HAP診斷標準及嚴重程度評估 (1)HAP診斷標準[4]：本研究選擇美國感染病學會/美國胸科學會(IDSA/ATS)確立的HAP診斷標準：①新出現咳嗽、咳痰或原有呼吸道疾病癥狀加重，并發生膿性痰，伴或不伴胸痛；②發熱；③肺實變體征和(或)聞及濕性啰音；④外周血細胞>10×109/L，和(或)<4×109/L，伴或不伴細胞核左移；⑤胸部X線影像學顯示片狀、斑片狀浸潤性或間質性改變，伴或不伴胸腔積液。TBI患者出現以上①至④中任何1項加⑤表現納入本研究。⑵HAP嚴重程度評估：根據IDSA/ATS制定的相關標準[4]來評估HAP嚴重程度。

1.2.2 外周血T細胞亞群表達水平測定 各組入選對象均在住院后第5天進行血液標本采集，均行空腹采集靜脈血8 ml，高速離心10 min后，分離血清，在超低溫冰箱保存待檢。T細胞亞群(CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+)指標表達水平測定應用美國FC-500-MPL流式細胞儀，試劑盒由海豐翔生物科技有限公司提供，按使用說明書規定步驟進行相關操作。

2 結 果

2.1 外周血各T細胞亞群表達水平比較 3組對象外周血各T細胞亞群表達水平比較，結果表明，TBI合并HAP患者外周血CD3+、CD4+表達水平及CD4+/CD8+比值則明顯低于TBI組及對照組(P均<0.05，表2)。

項目TBI合并HAP組(n=31)TBI組(n=24)對照組(n=27)CD3+52.71±5.24②63.28±5.79②70.46±7.15CD4+29.30±3.15②34.52±3.41①38.72±4.63CD8+32.66±3.6333.16±3.2232.69±3.35CD4+/CD8+0.89±0.17①0.97±0.14①1.18±0.21

注：與對照組比較：①P<0.05，②P<0.01

2.2 HAP患者外周血各T細胞亞群表達水平比較 31例TBI合并HAP患者中，重度HAP組14例(45.16%)，輕度HAP組17例(54.84%)。表3為輕及重度HAP患者外周血各T細胞亞群表達水平比較，結果表明，重度HAP組外周血CD3+、CD4+表達水平以及CD4+/CD8+比值均明顯低于輕度HAP組(P均<0.05，表3)。

項目重度HAP組(n=14)輕度HAP組(n=17)CD3+49.64±4.81②54.38±5.60CD4+28.76±3.04①32.42±3.48CD8+30.21±2.9532.69±3.55CD4+/CD8+0.85±0.13①0.98±0.19

注：與輕度HAP組比較：①P<0.05，②P<0.01

3 討 論

隨著我國社會、經濟迅猛發展，TBI也呈逐年增加趨勢。這些患者病情嚴重，常常伴隨意識不清，尤其會發生咳嗽反應機能減弱或消失，不能及時、有效地自主排痰；重癥TBI救治過程中，氣管插管及切開等侵入性手術較多，這都促使HAP患病率明顯上升，并已成為TBI患者主要死亡原因之一[5，6]。現已證實，機體免疫功能紊亂或損害是TBI發生HAP重要機制之一，他們體內大都存在明確的T淋巴細胞反應性降低或無反應狀態。一般認為，T淋巴細胞亞群是體內重要的細胞免疫組成部分，T淋巴細胞介導的細胞免疫扮演著核心角色，是機體免疫功能執行者及調節者。T淋巴細胞亞群中CD3+、CD4+及CD8+分別代表總T淋巴細胞、輔助T淋巴細胞及抑制T淋巴細胞等3種不同單克隆抗體，各司相關職能，輔助T淋巴細胞可增強體液及細胞免疫應答功能，抑制T淋巴細胞則是抑制體液及細胞免疫發揮作用，當體內發生上述各類T淋巴細胞數量不足或作用缺失時，免疫調控失衡，導致HAP發生。

近年來，國內外學者從細胞免疫學角度對HAP病因及發病機制進行了多種分層系列研究[7，8]，但專門涉及到TBI合并HAP患者上述內容報告較少。為此，我們觀察了一組近期在我院住院的TBI合并HAP患者外周血T細胞亞群(CD3+、CD4+、CD8+及CD4+/CD8+)指標表達變化，并與同期住院確診TBI但無HAP患者(TBI組)及同期參加我院體檢結論健康者(對照組)的相同指標檢測結果進行比較，我們發現，TBI合并HAP患者外周血CD3+、CD4+表達水平及CD4+/CD8+比值則明顯低于TBI組及對照組，同時，進一步按HAP病情分層后，重度HAP患者外周血CD3+、CD4+表達水平以及CD4+/CD8+比值也顯著低于輕度HAP組。上述外周血T細胞亞群變化數據與國內外一些非TBI患者發生HAP臨床研究結論[9,10]一致，提示TBI合并HAP患者存在明確的外周血T細胞亞群表達異常，是后者發生可能機制之一，且隨病情加重趨于顯著。

鑒于TBI合并HAP患者外周血存在明確的T細胞亞群指標異常，這些表現可作為其免疫學病因診斷、設計治療方案及評估治療療效的參考數據。同時，這些發現也告知我們，提高相關T細胞數量，恢復各類T細胞構成比，可成為HAP抗炎、抗內毒素治療新途徑。