張玉萍 王 芳 孟麗君 陳 雨 尉敬濤 王 欣 史興海
(1. 山西省生物研究所,山西 太原 030006;2. 山西省農業科學院作物科學研究所,山西 太原 030031)
平菇是山西省食用菌主栽品種之一。山西省地處華北西部的黃土高原地帶,屬于暖溫帶、中溫帶大陸性氣候,夏季炎熱多雨,立秋之后,晝夜溫差大,平菇出菇變得可行,一直到第二年春季,都是平菇鮮菇的盛產期。立秋時節倒推 60天是平菇制作母種的高峰期,母種質量的優劣直接影響原種和栽培種的質量[1],因而獲得優質母種至關重要。筆者根據多年的制種經驗,將成熟原種的培養基煮汁添加到加富 PDA培養基中,取得良好效果?,F總結報道如下。
平菇早秋615、玉專2號、南京1號、科大雜優、早秋 509,均為山西省生物研究所食用菌研究室保存。
PDAP培養基(對照組):馬鈴薯(去皮)200 g,葡萄糖20 g,瓊脂粉18 g,蛋白胨2 g,水1 000 mL。
PDAP加富培養基(試驗組):馬鈴薯(去皮)200 g,葡萄糖20 g,瓊脂粉18 g,蛋白胨2 g,原種培養基200 g,水1 000 mL。其中,原種培養基配方為:棉籽殼 84.9%,麩皮 10%,白砂糖 2%,石膏粉2%,磷肥1%,尿素0.1%。
(1)PDAP培養基。將馬鈴薯洗凈去皮,切成約1 cm3的小塊,稱取200 g加水1 000 mL,加熱煮沸20~30 min至熟而不爛。用4層紗布過濾取濾液,向其中加入瓊脂粉18 g及經溫水溶解的2 g蛋白胨,用文火加熱,并不斷用玻璃棒攪拌,直至瓊脂全部溶化。加入葡萄糖 20 g,加蒸餾水定容至1000 mL。采用 30×200(mm)試管分裝,無棉蓋體試管塞塞口,7支一組,外用牛皮紙包好,棉線繩扎緊,放于高壓蒸汽滅菌鍋內。120 ℃恒溫高壓(1.0~1.2 kg/cm2)滅菌30 min,在潔凈的培養間內擺好斜面,冷卻備用。
(2)PDAP加富培養基。在煮馬鈴薯的同時將200 g原種培養基用兩層紗布包裹后放入容器內煮汁。其他操作同上。
將5個菌株的母種在無菌條件下接種于PDAP培養基試管斜面上,每個菌株接種3支試管,22~25 ℃培養5天。5天后選取生長狀況良好的活化菌株,分別轉接到PDAP培養基和PDAP加富培養基試管中,每個品種每種培養基轉接5支,3次重復。22~25 ℃避光培養。
母種接種3天后開始定時觀察記錄各母種菌絲的生長情況。①菌絲長勢:觀察菌絲濃密度。②菌絲長速:菌絲平均生長速度,每3天劃線并測量,重復3次取平均值,計算平均生長速率(mm/d)。③均一性:各管之間的生長速度是否一致。利用Spss21.0數據分析軟件,對數據進行整理,對比其平均值大小,初步判斷對照組與試驗組數據的差別。為了進一步確定檢驗試驗組與對照組數據之間的顯著差異性,進行獨立樣本t檢驗。以各組數據的標準差,來說明菌絲生長的均一性高低。
圖1為5個平菇菌株在兩種培養基上生長中期的菌絲生長狀況??梢钥闯?,試驗組(T)PDAP加富培養基的菌絲長勢較對照組(C)PDAP培養基的菌絲長勢旺盛、濃密,菌絲呈明顯的波浪狀。
由表1可以看出,5個平菇菌株在試驗組(T)加富培養基上的菌絲生長速度均大于對照組(C)。經數據分析軟件 spss21.0對數據進行的獨立樣本 t檢驗結果(表2),早秋615、玉專2號和科大雜優Sig.值小于0.05,試驗組(T)PDAP加富培養基中的菌絲生長速度顯著快于對照組(C)PDAP培養基中的菌絲生長速度。南京1號和早秋509的Sig.值大于0.05,兩種培養基的菌絲長速無顯著差異。

表1 不同菌株在不同培養基上菌絲生長速度(單位:cm/d)
表1中,各平菇菌株的菌絲生長速度用其平均值加減標準差來表示,標準差是樣本數據方差的平方根,用以衡量樣本數據的離散程度,數據越大說明樣本數據的離散程度越大,均一性越小[2]。由表1可以看出,對照組(C)5個菌株的菌絲生長速度標準差均大于試驗組(T),如早秋 615,C0.471>T0.143,表明試驗組加富培養基菌絲生長速度的均一性高于對照組。

圖1 5個平菇菌株在兩種母種培養基上的生長情況

表2 不同平菇菌株在不同培養基上菌絲生長速度的獨立樣本檢驗
本試驗從菌絲的長勢、生長速度和均一性3個方面研究5個受市場歡迎的廣溫型深色硬柄平菇菌株在2種不同培養基上的菌絲生長情況:各菌株菌絲在PDAP加富培養基上表現出明顯的生長優勢,菌絲生長旺盛,呈波浪狀,菌落邊緣整齊;生長速度均快于對照組,其中早秋615、玉專2號和科大雜優3個菌株生長速度顯著快于對照組;且各菌株在PDAP加富培養基菌絲生長的均一性均高于對照組培養基。試驗結果表明,PDAP加富培養基可作為廣溫型深色硬柄平菇母種的優選培養基。