MMR與PD-L1在Ⅱ期術(shù)后結(jié)直腸癌中的差異性表達

劉巖 李慧 趙丹丹 程穎

結(jié)直腸癌（colorectal cancer，CRC）是一種發(fā)病率高的惡性腫瘤，嚴重威脅著人類健康，根據(jù)中國癌癥統(tǒng)計數(shù)據(jù)，結(jié)直腸癌已成為我國發(fā)病率及病死率均居第5位的惡性腫瘤，其發(fā)病率呈現(xiàn)逐步上升趨勢［1-2］。

近年來，分子靶向治療在某些特定人群中療效顯著，基于生物標志物指導下的靶向藥物延長了患者生存并改善了生活質(zhì)量，細胞程序性死亡配 體 1（programmed cell death ligand 1，PD-L1）和錯配修復（mismatch repair def i cient，MMR）基因已經(jīng)成為免疫靶向藥物最重要的生物標志物，Pembrolizumab二線治療的推薦人群為PD-L1表達≥1%，一線治療優(yōu)勢患者的PD-L1需≥50%［3-4］，同時也被獲批治療帶有MMR缺失（def i cient mismatch repair，dMMR）的實體瘤患者。

腫瘤異質(zhì)性是導致腫瘤耐藥和治療療效差異的重要原因之一，腫瘤異質(zhì)性包括腫瘤間異質(zhì)性和腫瘤內(nèi)異質(zhì)性。為了探討MMR和PD-L1在同一腫瘤標本中的異質(zhì)性，本研究分析結(jié)直腸癌患者腫瘤組織標本中dMMR和PD-L1的差異性和一致性，為結(jié)直腸癌未來免疫靶向治療的精準診斷提供參考。

材料與方法

一、研究對象

選取2016年1月至2017年10月在吉林省腫瘤醫(yī)院接受CRC根治性手術(shù)的患者50例，手術(shù)前均未接受任何治療，術(shù)后病理證實為TNMⅡ期結(jié)直腸癌。本研究得到吉林省腫瘤醫(yī)院倫理委員會批準，患者及家屬簽署知情同意書。入組患者基本資料：男性27例，女性23例；年齡范圍為31～65歲，中位年齡57歲；手術(shù)切除新鮮結(jié)直腸組織標本后送病理科，以10%福爾馬林固定24 h以上，制備石蠟包塊。

二、試劑

鼠抗人MutL同源蛋白1（MutL homolog 1，MLH1）、Muts同 源 蛋 白 2（MutS homolog 2，MSH2）、Muts同 源 蛋 白 6（MutS homolog 6，MSH6）、減數(shù)分裂后分離蛋白2（Postmeiotic segregation increased 2，PMS2）單克隆抗體、HRP標記兔鼠專用二抗和AEC顯色液均購自福建邁新公司，鼠抗人PD-L1單克隆抗體購自cell signaling technology公司，蘇木素購自中杉公司，PBS粉末和水性封片劑購自鼎國公司。……