全自動(dòng)尿液分析儀復(fù)檢規(guī)則的建立

李勍 王飛 韓豎霞

[摘要]目的 制定由迪瑞H-800尿干化學(xué)分析儀和IRIS IQ-200尿有形成分分析儀組成的全自動(dòng)尿液分析工作站的復(fù)檢規(guī)則，并驗(yàn)證該規(guī)則在臨床中的應(yīng)用效果。方法 使用該工作站對(duì)1715份標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)，同時(shí)對(duì)每份標(biāo)本進(jìn)行尿沉渣人工顯微鏡檢測(cè)。通過(guò)對(duì)兩種方法檢測(cè)結(jié)果的分析，制定本實(shí)驗(yàn)室的尿液分析工作站復(fù)檢規(guī)則，并用300份標(biāo)本進(jìn)行驗(yàn)證。結(jié)果 通過(guò)對(duì)1715份標(biāo)本的檢測(cè)，以人工鏡檢結(jié)果為標(biāo)準(zhǔn)，該尿液分析工作站檢測(cè)結(jié)果的假陰性率為1.22%，假陽(yáng)性率為2.97%，復(fù)檢率為33.41%。應(yīng)用制訂的復(fù)檢規(guī)則對(duì)臨床標(biāo)本驗(yàn)證結(jié)果的假陰性率為1.33%，假陽(yáng)性率為1.66%，復(fù)檢率為35.33%。結(jié)論 本實(shí)驗(yàn)室制定并驗(yàn)證了全自動(dòng)尿液分析工作站復(fù)檢規(guī)則，其假陰性率、假陽(yáng)性率、復(fù)檢率均能滿足要求，該復(fù)檢規(guī)則可以應(yīng)用于臨床工作中。

[關(guān)鍵詞]尿液分析；IRIS IQ-200；復(fù)檢規(guī)則

[中圖分類號(hào)] R446.12 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-4721（2018）9（b）-0161-03

[Abstract] Objective To establish a re-examination rule for the automatic urine analysis workstation consisting of Derry H-800 urine dry chemical analyzer and IRIS IQ-200 urine forming analyzer， and to verify the application of this rule in the clinic. Methods A total of 1715 specimens were tested by using this workstation. At the same time， each specimen was examined by urine sediments microscopic examination. Through the analysis of the test results of two methods， re-examination rules of the laboratory′s urine analysis workstation were developed and validated with 300 specimens. Results The results of the microscopic examination were taken as standards based on the examination of 1715 specimens. The false negative rate of the test results of urine analysis workstation was 1.22%， the false positive rate was 2.97%， and the re-examination rate was 33.41%. The results of the clinical specimen validation by the application of the re-examination rules were as follows： the false negative rate was 1.33%， the false positive rate was 1.66% and the re-examination rate was 35.33%. Conclusion The laboratory has developed and validated the re-examination rules for automated urine analysis workstation. The false negative rate， false positive rate and re-examination rate all can meet the requirements. This re-examination rule can be applied in clinical practice.

[Key words] Urine analysis； IRIS IQ-200； Re-examination rules

尿液分析作為重要的醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室常規(guī)檢驗(yàn)項(xiàng)目之一，在臨床疾病的診斷和治療中有著非常重要的用途。近年來(lái)，隨著醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室尿液分析自動(dòng)化程度越來(lái)越高，很多檢驗(yàn)工作者對(duì)儀器的依賴也越來(lái)越大。而在實(shí)際工作中，很多因素可以導(dǎo)致儀器結(jié)果出現(xiàn)假陽(yáng)性或者假陰性。因此，建立適合自己實(shí)驗(yàn)室的尿液分析復(fù)檢規(guī)則是很有必要的。本研究使用的儀器是由迪瑞H-800尿干化學(xué)分析儀和IRIS IQ-200尿有形成分分析儀組成全自動(dòng)尿液分析工作站。本研究制定該工作站復(fù)檢規(guī)則遵循以下原則：①保證假陰性率盡可能的低；②在降低假陰性率的前提下降低假陽(yáng)性率；③在滿足原則①、②的前提下，盡量降低復(fù)檢率，以便臨床報(bào)告時(shí)限（turn-around time，TAT）盡可能的縮短。

1資料與方法

1.1標(biāo)本來(lái)源

收集2017年3月湖北省中醫(yī)院住院的2015份患者尿液標(biāo)本進(jìn)行考察，其中男1123份，女892份，年齡1～88歲，每份標(biāo)本20 ml。其中的1715份標(biāo)本用于制定規(guī)則，300份標(biāo)本用于驗(yàn)證規(guī)則。以上標(biāo)本涵蓋本院住院部所有病房，包括腎病內(nèi)科、泌尿外科等。

1.2儀器與試劑

長(zhǎng)春迪瑞H-800尿干化學(xué)分析儀及其配套試紙條；美國(guó)國(guó)際遙控影像集團(tuán)公司（IRIS）的IQ-200尿有形成分分析儀、配套試劑及IQ質(zhì)控/調(diào)焦液（批號(hào)475-0060）；尿沉渣檢測(cè)離心管、離心機(jī)、OLYMPUS顯微鏡；Fast Read-10尿沉渣計(jì)數(shù)板。IQ-200尿有形成分分析儀嚴(yán)格按照儀器說(shuō)明書(shū)進(jìn)行調(diào)焦、質(zhì)控、樣本檢測(cè)。

1.3方法

1.3.1樣本檢測(cè) 所有樣本先用迪瑞H-800尿干化學(xué)分析儀及IQ-200尿有形成分分析儀檢測(cè)，IQ-200尿有形成分分析儀的結(jié)果經(jīng)有經(jīng)驗(yàn)的檢驗(yàn)技師進(jìn)行識(shí)別修飾。同時(shí)將10 ml標(biāo)本進(jìn)行人工顯微鏡鏡檢，于2 h內(nèi)檢測(cè)完畢。人工鏡檢法按《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》（第4版）[1]推薦的尿沉渣離心沉淀檢查法，準(zhǔn)確量取新鮮尿10 ml，以相對(duì)離心力400 g條件下離心5 min。離心后，一次性吸棄上清尿液，留取離心管底部液體約0.2 ml。充分混勻，取適量滴入Fast Read-10尿沉渣板。管型以低倍（10×10）鏡視野全片至少20個(gè)視野所見(jiàn)的平均值報(bào)告；細(xì)胞以高倍（10×40）鏡視野至少10個(gè)視野所見(jiàn)的最低至最高數(shù)的范圍報(bào)告。每份標(biāo)本采用雙盲法報(bào)告結(jié)果（2名經(jīng)驗(yàn)豐富的主管技師操作）。

1.3.2陽(yáng)性判斷標(biāo)準(zhǔn) 紅細(xì)胞、白細(xì)胞、透明管型超過(guò)參考范圍上限，或者出現(xiàn)病理性管型時(shí)，均為陽(yáng)性。尿液干化學(xué)分析儀的RBC、WBC和PRO以“+/-”為弱陽(yáng)性，“+～++++”為陽(yáng)性。IQ-200尿有形成分分析儀的參考范圍為廠家提供由本實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)證通過(guò)：①RBC：≤10個(gè)/μl（男），≤13個(gè)/μl（女）；②WBC：≤12個(gè)/μl（男），≤20個(gè)/μl（女）；③CAST：≤0.5個(gè)/μl。顯微鏡鏡檢有形成分參考范圍根據(jù)文獻(xiàn)[2]提供由本實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)證通過(guò)，參考范圍如下：①RBC：0～4個(gè)/HP（男），0～9個(gè)/HP（女）；②WBC：0～5個(gè)/HP（男），0～12個(gè)/HP（女）；③CAST：0～偶見(jiàn)/LP。

1.3.3復(fù)檢規(guī)則的建立 遵循前言中提及的建立復(fù)檢規(guī)則的原則，本實(shí)驗(yàn)室建立以下復(fù)檢規(guī)則：對(duì)照尿干化學(xué)結(jié)果和IQ-200尿有形成分分析儀圖像修飾后結(jié)果，在干化學(xué)弱陽(yáng)性或者陽(yáng)性時(shí)，IQ-200尿有形成分分析儀結(jié)果不相符者應(yīng)進(jìn)行鏡檢，即尿蛋白陽(yáng)性（+～++++）對(duì)應(yīng)管型陰性；隱血弱陽(yáng)性或者陽(yáng)性（+/-～+++）對(duì)應(yīng)尿紅細(xì)胞陰性；白細(xì)胞弱陽(yáng)性或者陽(yáng)性（+/-～+++）對(duì)應(yīng)尿白細(xì)胞陰性，出現(xiàn)以上情況時(shí)應(yīng)進(jìn)行鏡檢。IQ-200尿有形成分分析儀結(jié)果陽(yáng)性，而尿干化學(xué)結(jié)果陰性應(yīng)鏡檢。尿沉渣圖片模糊不清、不易辨認(rèn)的需鏡檢。腎病科及泌尿科患者無(wú)論結(jié)果如何均應(yīng)鏡檢。與患者病情不符，臨床醫(yī)生提出要求者需鏡檢。

1.3.4復(fù)檢規(guī)則的評(píng)估 運(yùn)用復(fù)檢規(guī)則，對(duì)300例驗(yàn)證標(biāo)本進(jìn)行分析，計(jì)算假陽(yáng)性率、假陰性率及復(fù)檢率。

2結(jié)果

2.1本實(shí)驗(yàn)室尿液分析工作站復(fù)檢規(guī)則的假陰性結(jié)果

全自動(dòng)尿液分析工作站干化學(xué)檢查弱陽(yáng)性或陽(yáng)性，尿沉渣陰性共53例標(biāo)本進(jìn)入復(fù)檢規(guī)則被正確檢出，即儀器結(jié)果陰性，人工鏡檢結(jié)果為陽(yáng)性（假陰性）。其中紅細(xì)胞干化學(xué)弱陽(yáng)性或陽(yáng)性15例，白細(xì)胞干化學(xué)弱陽(yáng)性或陽(yáng)性9例，管型干化學(xué)陽(yáng)性29例（表1）。

2.2本實(shí)驗(yàn)室尿液分析工作站復(fù)檢規(guī)則的假陽(yáng)性結(jié)果

全自動(dòng)尿液分析工作站干化學(xué)陰性，尿沉渣陽(yáng)性共106例標(biāo)本進(jìn)入復(fù)檢規(guī)則被正確檢出，即儀器結(jié)果陽(yáng)性，人工鏡檢結(jié)果為陰性（假陽(yáng)性）。其中紅細(xì)胞干化學(xué)陰性36例，白細(xì)胞干化學(xué)陰性45例，管型干化學(xué)陰性25例（表2）。

2.3本實(shí)驗(yàn)室尿液分析工作站的復(fù)檢率

在1715份標(biāo)本的檢測(cè)過(guò)程中，有32份標(biāo)本的圖片模糊不清、不易辨認(rèn)，需要顯微鏡鏡檢，其占全部標(biāo)本的1.87%（32/1715）。綜合2.1及2.2中通過(guò)復(fù)檢規(guī)則的標(biāo)本數(shù)據(jù)及以上32份標(biāo)本，應(yīng)用復(fù)檢規(guī)則后，得到整體復(fù)檢率為33.41%[（344+197+32）/1715]。

2.4未進(jìn)入復(fù)檢規(guī)則標(biāo)本的實(shí)際假陰性率和假陽(yáng)性率

另有21例假陰性標(biāo)本未進(jìn)入復(fù)檢規(guī)則，被漏檢，即干化學(xué)及沉渣結(jié)果均陰性，人工鏡檢為陽(yáng)性的標(biāo)本21例，故本研究制定的復(fù)檢規(guī)則應(yīng)用后的假陰性率為1.22%（21/1715）。同理，另有51例假陽(yáng)性標(biāo)本未進(jìn)入復(fù)檢規(guī)則，故本研究制定的復(fù)檢規(guī)則應(yīng)用后的假陽(yáng)性率為2.97%（51/1715）。

2.5驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)結(jié)果

應(yīng)用300份標(biāo)本驗(yàn)證本實(shí)驗(yàn)室制定的復(fù)檢規(guī)則，假陰性標(biāo)本4例，假陰性率：1.33%；假陽(yáng)性標(biāo)本5例，假陽(yáng)性率：1.66%；共復(fù)檢106例，復(fù)檢率：35.33%。

3討論

IQ-200尿沉渣分析儀采用平面流式細(xì)胞技術(shù)、高速攝影成像、自動(dòng)粒子識(shí)別技術(shù)的測(cè)定原理，通過(guò)尿液中有形成分的外形等特性對(duì)每種微粒成分進(jìn)行分類，其特異性、敏感性較高，這是IQ-200自動(dòng)化的優(yōu)點(diǎn)[3]。本研究選取的1715份標(biāo)本中，有21份標(biāo)本未進(jìn)入復(fù)檢規(guī)則為假陰性，假陰性率是1.22%，其中有12份為白細(xì)胞漏檢，研究進(jìn)一步通過(guò)瑞氏染色發(fā)現(xiàn)其中有8份標(biāo)本中的白細(xì)胞為淋巴細(xì)胞，另外9份標(biāo)本為紅細(xì)胞漏檢；這21份標(biāo)本中的細(xì)胞鏡檢結(jié)果均<18個(gè)/HP，無(wú)1例腎病漏檢。51份標(biāo)本為假陽(yáng)性，假陽(yáng)性率為2.97%，其中既有結(jié)晶、真菌孢子誤認(rèn)為紅細(xì)胞和白細(xì)胞，也有黏液絲誤認(rèn)為管型的。

在第一階段實(shí)驗(yàn)，即1715份標(biāo)本的檢測(cè)中，復(fù)檢規(guī)則中未納入“腎病科及泌尿科患者都應(yīng)鏡檢”這一條，而在第二階段驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)時(shí)采用了這條復(fù)檢規(guī)則，最終導(dǎo)致假陽(yáng)性率有所下降，而復(fù)檢率有所上升。

目前應(yīng)用于臨床實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)尿液有形成分的自動(dòng)化設(shè)備主要有兩種，一種是以SYSMEX UF系列為代表的尿流式細(xì)胞分析系統(tǒng)，另一種是以IRIS IQ-200為代表的機(jī)器視覺(jué)尿有形成分分析系統(tǒng)。這兩種不同檢測(cè)原理的儀器各有利弊[4]。本研究使用的儀器是由迪瑞H-800尿干化學(xué)分析儀和IRIS IQ-200尿有形成分分析儀組成全自動(dòng)尿液分析工作站，應(yīng)用復(fù)檢規(guī)則后假陰性率為1.33%，而其他機(jī)器視覺(jué)尿有形成分分析系統(tǒng)的研究在應(yīng)用復(fù)檢規(guī)則后的假陰性率為1.07%[5]、0.8%[6]、0.75%[7]，尿流式細(xì)胞分析系統(tǒng)的研究在應(yīng)用復(fù)檢規(guī)則后的假陰性率為1.34%[8]，1.3%[9]。本研究在制定尿液分析的復(fù)檢規(guī)則時(shí)，要求假陰性率盡量小，但到底小到什么程度為宜卻沒(méi)有明確規(guī)定[10-12]，不同研究者在制定尿液分析復(fù)檢規(guī)則時(shí)，均采用血液分析復(fù)檢規(guī)則中要求的假陰性率<5%[13-15]。本研究結(jié)果提示，相對(duì)于血液分析復(fù)檢而言，尿液分析復(fù)檢耗時(shí)更少，鏡檢操作更便捷，臨床工作中應(yīng)該更嚴(yán)格地制定復(fù)檢規(guī)則，提高復(fù)檢率，進(jìn)而降低假陰性率。

綜上所述，尿液分析復(fù)檢規(guī)則的假陰性率必須<2%才能應(yīng)用于臨床實(shí)驗(yàn)室。

[參考文獻(xiàn)]

[1]中華人民共和國(guó)國(guó)家衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì)醫(yī)政醫(yī)管局.全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M].第4版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2015：171.

[2]劉成玉，羅春麗.臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)[M].第5版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2012：166-167.

[3]楊曉波，王振楠.IQ 200尿沉渣分析儀中結(jié)果審核的必要性[J].中國(guó)醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2011，8（6）：153-154.

[4]叢玉隆.尿液有形成分檢查及鏡檢篩選標(biāo)準(zhǔn)的制定[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2011，34（6）：481-482.

[5]王銀鋒，李鋒，李想，等.尿常規(guī)復(fù)檢規(guī)則的建立與驗(yàn)證[J].寧夏醫(yī)學(xué)雜志，2014，36（5）：429-431.

[6]鮑蘊(yùn)文，孫龍喬子.IQ-200全自動(dòng)尿沉渣分析儀鏡檢復(fù)檢規(guī)則制訂與應(yīng)用[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2013，10（21）：2865-2867.

[7]吳鵬，謝世英，黃茜.迪瑞尿沉渣流水線用于尿液有形成分鏡檢篩選標(biāo)準(zhǔn)的研究[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2015，12（24）：3660-3663.

[8]馬俊龍，叢玉隆，陸玉靜，等.尿干化學(xué)與流式細(xì)胞術(shù)聯(lián)合用于尿液有形成分鏡檢篩選的研究與應(yīng)用[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2011，34（6）：494-500.

[9]梁紅英，關(guān)植芝，楊麗紅，等.建立尿液流水線尿沉渣分析儀檢查結(jié)果復(fù)檢規(guī)則的探討[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2016， 37（13）：1842-1843.

[10]梁肖云，黃鎮(zhèn)華，張素娟，等婦女及兒童尿液分析復(fù)檢規(guī)則的建立與應(yīng)用[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2016，37（6）：797-799.

[11]張霞，李代碧，李倩.兩種儀器在尿液分析中的綜合應(yīng)用[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志2016，37（17）：2485-2486.

[12]呂純莉，肖代敏，朱紹玲，等.URIT-1500尿干化學(xué)分析儀與AVE-764B尿有形成分分析儀聯(lián)合尿液檢測(cè)復(fù)檢規(guī)則的制定和應(yīng)用[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2016，31（1）：45-48.

[13]劉萬(wàn)超，陳龍梅，楊振華，等.愛(ài)威尿液分析流水線鏡檢規(guī)則制訂及驗(yàn)證[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2017，32（1）：22-25.

[14]陳彩虹，曹利蕉，許慶豐，等.SYSMEX全自動(dòng)尿液分析系統(tǒng)有形成分顯微鏡復(fù)檢規(guī)則制定與驗(yàn)證[J].浙江醫(yī)學(xué)教育，2016，15（4）：52-54.

[15]賴?yán)A，楊春燕，傅雙雙.常規(guī)尿液分析復(fù)檢規(guī)則再評(píng)估、修訂及驗(yàn)證[J].重慶醫(yī)學(xué)，2016，45（19）：2689-2692.