市售雞蛋中氟喹諾酮類藥物殘留的調(diào)查分析

◎ 李 婧，劉 正，張 磊

（天津市乳品食品監(jiān)測中心，天津 300381）

環(huán)丙沙星、達氟沙星、恩諾沙星、沙拉沙星均是常見的氟喹諾酮類藥物，主要對革蘭氏陰性菌和大多數(shù)革蘭氏陽性菌有效[1]，可有效抑制DNA螺旋酶的活性。DNA螺旋酶又稱拓撲異構(gòu)酶Ⅱ，由A、B兩個亞基組成四聚體（A2B2），是DNA復(fù)制所必需的酶。氟喹諾酮類藥物主要作用于A亞基，使DNA無法形成雙螺旋結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致菌體無法進行DNA復(fù)制，從而抑制細胞分裂，達到抑菌的目的[2]。氟喹諾酮類藥物作用范圍廣，抗菌活性強，在現(xiàn)代畜禽養(yǎng)殖業(yè)中得到廣泛應(yīng)用。

實際生產(chǎn)中，氟喹諾酮類藥物濫用的現(xiàn)象普遍存在，不僅會造成畜禽中毒、人產(chǎn)生過敏反應(yīng)、病原菌對該類藥物產(chǎn)生耐藥性等問題，還會造成藥物在畜禽產(chǎn)品中殘留，藥物隨畜禽排泄物排出污染環(huán)境，嚴重影響人類健康和生態(tài)環(huán)境。

基于此，本文對市售雞蛋中氟喹諾酮類藥物殘留情況進行了調(diào)查分析，為今后生產(chǎn)、流通環(huán)節(jié)的市場監(jiān)管提供參考。筆者分別在A、B、C三地的市場、超市隨機抽取共20批次的樣品，對雞蛋中的氟喹諾酮類藥物殘留進行液相色譜檢測，并對結(jié)果進行分析。

1 實驗部分

1.1 儀器與試劑

島津LC-20AD液相色譜儀，配RF-20A熒光檢測器。磷酸鹽提取液：稱取磷酸二氫鉀6.8 g，加水溶解并稀釋至500 mL，用5.0 mol·L-1氫氧化鈉溶液調(diào)pH至7.0。

磷酸 /三乙胺溶液 0.05 mol·L-1（pH 2.4）：取 85%的磷酸3.4 mL，加水稀釋到1 000 mL，攪拌下滴加三乙胺，調(diào)pH至2.4。

乙腈（30%）緩沖液：量取30 mL的乙腈和70 mL的磷酸/三乙胺溶液（pH 2.4），混合振蕩均勻。

1.2 樣品的制備與凈化

取適量新鮮的雞蛋，將蛋清和蛋黃攪拌均勻，稱取2 g試料，置于勻漿杯中，加磷酸鹽提取液2.0 mL，攪勻振蕩混合10 min，5 000 r·min-1離心10 min。上清液轉(zhuǎn)入另一離心管中。用磷酸鹽提取液2.0 mL洗殘渣，攪勻，振蕩，離心。合并上層清液于同一離心管中，加入10 mL水飽和的正己烷，振蕩5 min，5 000 r·min-1離心10 min，用吸管將上層正己烷吸出棄去，將絮凝狀固體吸出并轉(zhuǎn)移至另一離心管中，用2.0 mL磷酸鹽提取液清洗絮凝狀固體，振蕩，離心，清液與之前的下層提取液合并。在下層溶液中再加入10 mL水飽和的正己烷，振蕩，離心。棄去上層正己烷，下層為備用液。

C18固相萃取柱依次用5 mL乙腈，5 mL乙腈（30%）緩沖液和5 mL磷酸鹽提取液潤洗。備用液過柱，用5 mL水洗，真空抽干。加1.00 mL流動相洗脫，真空抽干，收集洗脫液作為試樣溶液，溶液過濾膜后，供高效液相色譜分析。在淋洗和洗脫過程中流速控制在1 mL/min左右。

1.3 液相色譜工作條件

色譜柱：C18，250 mm×4.6 mm，粒徑5 μm；流動相：0.05 mol·L-1磷酸/三乙胺溶液-乙腈（81+19），用前過0.45 μm濾膜；流速：1.0 mL·min-1；檢測波長：激發(fā)波長280 nm，發(fā)射波長450 nm；進樣量：20 μL。

2 結(jié)果與分析

2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線

在本次檢測過程中，選取了5個濃度水平做標(biāo)準(zhǔn)曲線，標(biāo)準(zhǔn)曲線方程見表1。

表1 環(huán)丙沙星、達氟沙星、恩諾沙星、沙拉沙星標(biāo)準(zhǔn)曲線表

2.2 質(zhì)控樣品的加標(biāo)回收實驗

根據(jù)實際檢測結(jié)果，設(shè)計了3個濃度水平的加標(biāo)回收實驗作為檢測過程的質(zhì)量控制，回收率見表2。

表2 質(zhì)控樣品加標(biāo)回收結(jié)果表

2.3 檢測結(jié)果

隨機抽檢的雞蛋中氟喹諾酮類藥物殘留檢測共涉及20批次樣品，檢測結(jié)果顯示，在這次隨機抽樣檢測中，A、B、C三地市售雞蛋均沒有上述4種氟喹諾酮類藥物檢出，符合國標(biāo)規(guī)定的不得檢出的要求。見表3。

表3 雞蛋中氟喹諾酮類藥物檢測結(jié)果統(tǒng)計表（抽樣批次/檢出批次）

3 討論

氟喹諾酮類藥物在動物及人體蓄積到一定程度時，會產(chǎn)生不良反應(yīng)和副作用，危害動物和人體健康[3]。長期食用氟喹諾酮類藥物殘留超標(biāo)的畜禽產(chǎn)品可造成人體長期吸收該類藥物，藥物蓄積到一定程度時就會對人體產(chǎn)生直接危害，引發(fā)不良反應(yīng)。氟喹諾酮類藥物殘留不但對人體有直接的危害，而且會使致病菌和人體的耐藥性逐漸增強，不利于該類藥物對人類相關(guān)疾病的治療[4]。

目前，我國對氟喹諾酮類藥物殘留檢測的研究還處于發(fā)展階段，隨著研究的深入，今后氟喹諾酮類藥物殘留檢測技術(shù)獎逐步向更高靈敏度、更方便于現(xiàn)場大規(guī)模快速篩選和多殘留組分同時檢測等方向發(fā)展。