去除葡萄籽提取物中農(nóng)藥殘留的研究

◎ 蔣江紅

（深圳勁創(chuàng)生物技術(shù)有限公司，廣東 深圳 518057）

葡萄在生長(zhǎng)過(guò)程中，會(huì)遇到許多病害，為了預(yù)防和治療這些疾病，保障葡萄產(chǎn)量，減少經(jīng)濟(jì)損失，在葡萄整個(gè)生長(zhǎng)階段和生產(chǎn)季節(jié)中，使用了各種各樣的農(nóng)藥，有效控制了有害生物，但其殘留造成了葡萄的污染。國(guó)內(nèi)外在葡萄和葡萄酒中農(nóng)藥殘留分析檢測(cè)方面做了大量工作，已經(jīng)能準(zhǔn)確分析檢測(cè)近200種農(nóng)藥殘留（殺菌劑、殺蟲(chóng)劑和除草劑等）[1-4]。通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)，葡萄皮渣、葡萄籽等會(huì)吸附沉淀一定量的農(nóng)藥。

葡萄籽提取物是具有抗氧作用的植物提取產(chǎn)品，在保健食品、化妝品中應(yīng)用廣泛，農(nóng)藥殘留物，可能會(huì)引起產(chǎn)品安全隱患。國(guó)際上對(duì)農(nóng)殘要求越來(lái)越嚴(yán)，歐盟不斷修訂（EC）No396/2005中的農(nóng)藥殘留限量，多次大幅度調(diào)整農(nóng)殘標(biāo)準(zhǔn)，標(biāo)準(zhǔn)也越來(lái)越苛刻。因此，為保證葡萄籽提取物在國(guó)際市場(chǎng)上具有較強(qiáng)競(jìng)爭(zhēng)力，有必要開(kāi)發(fā)一種簡(jiǎn)便、環(huán)保、利于生產(chǎn)并可去除或降低葡萄籽原料及葡萄籽提取物產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留的方法。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

葡萄籽：采購(gòu)自德國(guó)、法國(guó)、澳大利亞；乙醇；大孔樹(shù)脂；活性炭(活性炭1#、活性炭2#、活性炭3#）；Buchi旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀R-210：上海亞榮生化儀器廠；HPLC Agilent 1200；BSA124S電子天平：賽多利斯科學(xué)儀器（北京）有限公司；UV759S：上海精科儀器廠；實(shí)驗(yàn)型噴霧干燥機(jī)：上海雅程儀器設(shè)備有限公司；圓底燒瓶，電熱套，鐵架臺(tái)，冷凝管，燒杯，量筒，層析柱。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 提取過(guò)程

稱取葡萄籽500 g，加入5倍量的65%乙醇-水，浸泡2 h，加熱至沸騰，回流2 h，過(guò)濾，渣再加入4倍量65%乙醇-水，回流2 h，過(guò)濾，合并濾液，回收乙醇，加5倍量水，靜置5 h，過(guò)濾，濾液備用。

1.2.2 活性炭處理

將活性炭加入濾液中，攪拌、過(guò)濾、干燥。

1.2.3 活性炭對(duì)葡萄籽提取物的吸附率

將1.2.1的濾液均分4份，其中3份分別用3、4.85 g及7.84 g同一型號(hào)的活性炭處理和過(guò)濾，1份不處理。然后將4份樣品分別干燥，計(jì)算收率，計(jì)算活性炭處理后的損失率，損失率/%=（未處理產(chǎn)品收率-處理后收率）/未處理收率×100%。

1.2.4 活性炭去除農(nóng)藥的效果

對(duì)比未經(jīng)活性炭處理的葡萄籽提取物和經(jīng)活性炭處理后的葡萄提取物中的農(nóng)藥殘留。活性炭處理去除農(nóng)殘效果計(jì)算公式如下：

農(nóng)殘去除率/%=（未處理產(chǎn)品農(nóng)殘量-處理后產(chǎn)品農(nóng)殘量）/未處理農(nóng)殘量×100%。

1.2.5 去除農(nóng)藥因素考察

選擇活性炭的型號(hào)、活性炭添加量和加入活性炭后攪拌時(shí)間為考察因素，采用L9（34）正交設(shè)計(jì)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，結(jié)果以農(nóng)殘去除率進(jìn)行評(píng)價(jià)，實(shí)驗(yàn)因素水平設(shè)計(jì)見(jiàn)表1。

表1 實(shí)驗(yàn)因素水平設(shè)計(jì)表

2 結(jié)果與分析

2.1 活性炭對(duì)葡萄籽提取物吸附率

采用不同量的活性炭處理，結(jié)果如表2。

表2 葡萄籽提取物的收率和損失率表

由表2的結(jié)果表明，加入活性炭越多，葡萄籽提取物被活性炭吸附越多，葡萄籽提取物損失越大。

2.2 活性炭去除農(nóng)藥效果考察

活性炭處理前后農(nóng)藥殘留情況見(jiàn)表3。

表3 活性炭處理前后農(nóng)藥殘留情況表

從表3中可看出，活性炭對(duì)嘧菌酯、啶酰菌胺、烯酰嗎啉、環(huán)酰菌胺、異丙菌胺和戊唑醇6種農(nóng)藥有較好的吸附作用，可使產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留下降50%以上，其中的環(huán)酰菌胺農(nóng)藥去除率達(dá)89.04%。對(duì)甲霜靈、腈菌唑、鄰苯二甲酰亞胺吸附作用稍弱些，對(duì)農(nóng)藥的去除率＜50%，其中對(duì)鄰苯二甲酰亞胺的去除效果最差，僅為20.70%。

2.3 活性炭處理因素考察

活性炭不同處理?xiàng)l件下對(duì)葡萄籽提取物中殘留農(nóng)藥的影響如表4，從數(shù)據(jù)分析結(jié)果中可以看出，不同型號(hào)的活性炭對(duì)農(nóng)藥去除影響最大，其次是活性炭加入量，活性炭加入后的攪拌時(shí)間對(duì)農(nóng)藥去除影響效果不明顯。

表4 活性炭處理因素考察結(jié)果表

3 結(jié)論

在利用物理方法去除葡萄籽提取物中農(nóng)藥殘留的實(shí)驗(yàn)研究中，結(jié)果表明活性炭對(duì)一些農(nóng)藥具有良好的吸附能力，對(duì)葡萄籽提取物中嘧菌酯、啶酰菌胺、烯酰嗎啉、環(huán)酰菌胺、異丙菌胺和戊唑醇等6種農(nóng)藥殘留的去除率達(dá)到75%以上。此物理方法不發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，不會(huì)影響產(chǎn)品質(zhì)量，但加入活性炭吸附農(nóng)藥殘留的同時(shí)，會(huì)吸附活性成分，導(dǎo)致收率下降。因此，在生產(chǎn)中，活性炭使用量需做進(jìn)一步研究。