Rb、p16和cyclinD1基因在早期胃癌組織中的表達及臨床意義分析

彭微　袁桂　劉潔　黃旭

【摘 要】目的：探究Rb、p16和cyclinD1基因在早期胃癌組織中的表達及臨床意義。方法：選取2017年8月-2018年4月我院收治的50例胃部疾病患者， 將他們分為兩組，對照組為32例良性胃部疾病患者，其中有15例患者胃粘膜細胞異型增生，17例患者的胃粘膜細胞正常；研究組為18例早期胃癌患者。觀察比較兩組患者體內Rb、p16和cyclinD1基因的表達水平差異以及不同種類細胞內陽性表達率。結果：研究組患者中cyclin D1基因的表達水平明顯高于對照組（P<0.05），Rb與p16的基因表達水平明顯低于對照組（P<0.05）；研究組患腫瘤細胞中cyclin D1基因表達的陽性率高于異型增生細胞，差異有統計學意義（P<0.05），Rb與p16的基因表達陽性率低于對照組，差異有統計學意義（P<0.05）。結論：廣大醫學工作者應該加大對cyclinD1、p16和Rb基因表達機制及其調控癌癥發生機制的研究，不斷創新早期胃癌的治療方法，為臨床上通過調控基因表達途徑來治療早期胃癌提供一種有效的依據。

【關鍵詞】Rb；p16；cyclinD1；早期胃癌；

【中圖分類號】R735.2 【文獻標識碼】A 【文章編號】1672-3783（2019）01-03--01

胃癌是我國臨床上比較常見的一種惡性腫瘤疾病，嚴重威脅著人類的身體健康，尤其是近幾年隨著人們生活環境的變化，胃癌的發病率呈現逐年上升的趨勢。本文探究分析了cyclinD1、p16和Rb基因在早期胃癌組織中的表達及其臨床意義，旨在為臨床上提供一種有效的早期胃癌的治療依據，現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2017年8月-2018年4月我院收治的50例胃部疾病患者， 依據他們的病情將他們隨機分為兩組，對照組為32例良性胃部疾病患者，其中17例胃粘膜細胞正常的患者中男10例，女7例，患者的年齡為22—85歲，平均年齡為（60.1±4.5）歲， 15例胃粘膜細胞異型增生患者中男7例，女8例，患者的年齡為20—80，平均年齡為（57.1±2.5）歲。研究組為18例早期胃癌患者男10例，女8例，患者的年齡為21—78歲，平均年齡為（53.6±6.5）歲。兩組患者在年齡、性別、身體狀況等方面比較差異均不具有可比性（P>0.05），患者及其家屬均知情同意本研究，同時經過醫院倫理委員會批準。

1.2 方法

首先，采用聚合酶鏈式反應（PCR）法擴增cyclinD1、p16和Rb基因，具體的步驟為：①變性：cyclinD1、p16和Rb基因模板DNA在90～95℃下加熱一定時間后，使之變性成為單鏈；②退火（復性）：降低溫度到50～60℃，使引物與模板DNA單鏈的互補序列配對結合；③延伸：調整溫度到70～75℃，使DNA模板與引物在DNA聚合酶的作用下相結合，并以dNTP為反應原料重新合成DNA雙鏈，重復循環此過程。之后采用免疫組化S-P法，即鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物酶連結法檢測所有患者體內cyclinD1、p16和Rb基因的表達。具體方法：將事先準備的患者的切片標本依次進行常規脫蠟至水、消除標本中內源性的過氧化物酶的活性，放置室溫下在3%的H2O2中孵育 5-10 分鐘，接下來用緩沖液水洗，再經一抗標記、水洗以及辣根酶酶標記二抗、沖洗后染色。cyclinD1、p16和Rbcyclin 抗體的稀釋倍數分別度為75倍、50倍、100倍，陽性對照采取事先已經明確測定為陽性的組織切片，用磷酸鹽緩沖液代替一抗做陰性對照。

1.3 觀察指標

陽性：患者的胃組織標本上細胞核或細胞質內出現均一的棕黃色顆粒；陰性：患者的細胞核或細胞質內沒有出現棕黃色顆粒；

陽性標準為弱陽性：患者組織切片內的陽性細胞數小于25% ；陽性：患者組織切片內的陽性細胞數在25%～55%； 強陽性：患者組織切片內的陽性細胞數細胞數大于55%。

1.4 統計學方法

數據應用SPSS18.0進行分析，其中計數進行X2（%）檢驗，計量進行t檢測（）檢驗， P<0.05提示有顯著差異。

2 結果

研究組患者中cyclin D1基因的表達水平明顯高于對照組（P<0.05），Rb與p16的基因表達水平明顯低于對照組（P<0.05），具體見表一。

研究組患者早期胃癌組織細胞中cyclin D1基因表達的陽性率高于異型增生組織細胞，差異有統計學意義（P<0.05），Rb與p16的基因表達陽性率低于對照組，差異有統計學意義（P<0.05），具體見表2。

3 討論

胃癌是我國臨床上比較常見的一種惡性腫瘤疾病，具有較高的發病率，在胃癌的發生的早期對患者進行治療具有相對較高的治愈率。

綜上所述，廣大醫學工作者應該加大對cyclinD1、p16和Rb基因表達機制及其調控癌癥發生機制的研究，不斷創新早期胃癌的治療方法，為臨床上通過調控基因表達途徑來治療早期胃癌提供一種有效的依據。

參考文獻

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